| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
α-glucosidase (IC₅₀ = 79.88 μM) [2]
α-amylase (IC₅₀ > 250 μM) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
槲皮素对α-葡萄糖苷酶表现出选择性抑制活性，IC₅₀值为79.88 μM，而其对α-淀粉酶的IC₅₀值大于250 μM，表明其对α-淀粉酶的抑制作用较弱[2]。
采用Lineweaver-Burk作图法测定了槲皮素对α-葡萄糖苷酶的抑制动力学。所有曲线均与γ轴负方向相交，Vmax保持不变，Km随抑制剂浓度的增加而降低，表明其抑制机制为竞争性抑制[2]。对于α-淀粉酶，槲皮苷也表现出竞争性抑制作用，但其对α-淀粉酶的Km值远高于对α-葡萄糖苷酶的Km值，表明其对α-葡萄糖苷酶具有更高的亲和力[2]。荧光猝灭实验表明，槲皮苷以浓度依赖的方式猝灭α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的固有荧光。猝灭常数（Ksv）随温度升高而增大（在300.15–310.15 K时，α-葡萄糖苷酶的Ksv从0.17增至0.21 × 10⁵ L/mol，α-淀粉酶的Ksv从0.13增至0.18 × 10⁵ L/mol）。 Kq 值远大于动态猝灭最大碰撞常数 (2.0 × 10¹⁰ L/mol)，表明由于基态复合物的形成而发生静态猝灭 [2]。槲皮素与 α-葡萄糖苷酶的结合常数 (Ka) (310.15 K 时为 0.41 ± 0.06 × 10⁵ M) 大于与 α-淀粉酶的结合常数 (310.15 K 时为 0.26 ± 0.01 × 10⁵ M)，且两种酶的结合位点数 (n) 均约为 1。热力学参数（ΔH < 0，ΔS < 0）表明氢键和范德华力是主要的结合力，且结合是自发的（ΔG < 0）[2]。 同步荧光光谱显示，随着槲皮素浓度的增加，α-葡萄糖苷酶在Δλ = 15 nm（酪氨酸残基）和Δλ = 60 nm（色氨酸残基）处的荧光强度均降低，且色氨酸残基峰发生显著红移，表明色氨酸残基附近的微环境发生了变化[2]。 分子对接结果显示，槲皮素以-81.17 kcal/mol的分子间能量对接至α-葡萄糖苷酶的活性口袋，并与ARG202、ASP203、ASP327、TRP406、ASP443等残基形成氢键。 ASP542以及疏水相互作用。α-葡萄糖苷酶的对接评分远高于α-淀粉酶[2]。 在一项使用HUVEC（人脐静脉内皮细胞）的抗血管生成研究中，100 μM的槲皮素抑制了HUVEC的增殖（图3，参考文献[3]）。然而，它并未抑制HUVEC在重组基底膜上的管状结构形成（抑制率低于20%，表1，参考文献[3]）。由于样本量不足，未检测其对HUVEC趋化性的影响[3]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在以db/db糖尿病小鼠为模型的体内淀粉负荷试验中，口服给予槲皮素（低剂量组100 mg/kg，高剂量组200 mg/kg）可显著降低餐后血糖水平。低剂量组的降血糖效果与阿卡波糖组（100 mg/kg）相似，而高剂量组的血糖水平显著低于对照组和阿卡波糖组。与阿卡波糖相比，100 mg/kg 和 200 mg/kg 剂量下葡萄糖曲线下面积 (AUC) 分别降低了 19.0% 和 24.5%，而阿卡波糖组的 AUC 降低了 20.31% [2]。
在离体大鼠主动脉环血管生成实验中，100 μM 的槲皮苷抑制了微血管的生长，但其抑制作用弱于槲皮素和异槲皮苷（槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖）。芦丁（槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-[1,6]-O-α-L-鼠李糖）则无此作用 [3]。 |
| 酶活实验 |
采用分光光度法进行体外α-葡萄糖苷酶活性测定。在pH 6.8的磷酸盐缓冲液中，使用0.5 U/mL的α-葡萄糖苷酶和0.6 mM的对硝基苯基-D-吡喃葡萄糖苷（pNGP）底物。将待测化合物和阿卡波糖溶解于DMSO中，配制成10 mM的储备液，然后用磷酸盐缓冲液进行系列稀释。在96孔板中，加入10 μL待测化合物、40 μL酶溶液和100 μL磷酸钾缓冲液，于37℃预孵育10 min。然后加入50 μL底物，于37℃孵育20 min。在405 nm处测定吸光度。抑制率计算公式为 [(Abscontrol - Abssample)/Abscontrol] × 100，IC₅₀ 值采用非线性拟合（logit 法）计算 [2]。
体外 α-淀粉酶活性测定采用类似方法，使用 5 U/mL α-淀粉酶和 2-氯-4-硝基苯基 α-D-麦芽三糖苷 (G3-CNP, 0.6 mM) 作为底物。预孵育和测定条件相同（37°C，20 分钟，405 nm 波长处测定吸光度）[2]。 在不同的底物浓度下进行抑制动力学分析。采用 Lineweaver-Burk 方程 1/v = (Km/Vmax)(1/[S]) + 1/Vmax 计算 Vmax 和 Km 值。测试了一系列化合物浓度和底物（α-葡萄糖苷酶使用pNaPG，α-淀粉酶使用G3-CNP）的反应[2]。 荧光猝灭实验：使用槲皮素溶液（0–200 mM，1.0 mL）滴定α-葡萄糖苷酶（1.0 mL，2 U/mL）或α-淀粉酶（1.0 mL，2 U/mL），并平衡5分钟。在不同温度（305.15、310.15、315.15 K）下，以280 nm激发，测量295–500 nm（发射）处的荧光强度。在Δλ = 15 nm和Δλ = 60 nm（260–320 nm）处测定同步荧光光谱。采用 Stern-Volmer 方程 F₀/F = 1 + Kqτ₀[Q] = 1 + Ksv[Q] 计算猝灭常数。结合常数和结合位点数采用 log[(F₀-F)/F] = logKa + n log[Q] 计算。热力学参数采用 Van 't Hoff 方程 lnKa = -ΔH/RT + ΔS/R 和 ΔG = ΔH - TΔS [2] 计算。 |
| 细胞实验 |
HUVEC增殖实验：将HUVEC细胞用胰蛋白酶消化分散，并以15,000个细胞/mL的浓度悬浮于HuMedia EG2培养基中。取100 μL细胞悬液接种于96孔培养板中，并在37℃、5% CO₂条件下培养24小时。之后更换新鲜培养基，并加入0–100 μM的槲皮素或其他多酚类化合物。72小时后，加入10 μL WST-1试剂，并在37℃下孵育4小时。测定450 nm处的吸光度。结果显示，100 μM的槲皮素抑制了HUVEC细胞的增殖（图3，参考文献[3]）。
管状结构形成实验：使用体外血管生成实验试剂盒在96孔板上制备固体凝胶。将 HUVEC 细胞（1 × 10⁵ 个细胞/mL）接种于含有 0–100 μM 槲皮素的 HuMedia EG-2 培养基中，每孔 100 μL，置于凝胶表面。细胞在 37°C、5% CO₂ 条件下培养 12 小时。使用倒置显微镜在 40 倍放大倍率下观察管状结构的形成，并测量管状结构的总长度。100 μM 槲皮素的抑制率低于 20%（无显著影响）（表 1，参考文献 [3]）。趋化性实验（改良的 Boyden 小室）：将 24 孔细胞培养插入板的微孔膜（8 μm）涂覆 0.1% 明胶。将HUVEC细胞分离后，重悬于含0.1% BSA的199培养基中，并以1.0 × 10⁵个细胞/400 μL的密度接种于上室。下室加入400 μL含0.1% BSA和10 ng/mL VEGF的199培养基，并添加或不添加化合物。37℃孵育6小时后，去除未迁移的细胞。将下室表面的迁移细胞用甲醇固定，Diff-Quik™染色，并在200倍显微镜下计数每个膜上五个视野中的细胞。本研究未探讨槲皮素对趋化性的影响[3]。 |
| 动物实验 |
餐后血糖测定：本研究采用db/db小鼠（糖尿病模型）和C57BL/6J小鼠（空白对照）。db/db小鼠适应环境1周后，随机分为四组（每组n=10）：生理盐水组（模型组）、100 mg/kg阿卡波糖组（阳性对照组）、100 mg/kg槲皮素组（低剂量组，LD）和200 mg/kg槲皮素组（高剂量组，HD）。C57BL/6J小鼠作为正常空白对照。小鼠禁食过夜后，分别灌胃给予10 mL/kg生理盐水（模型组）、100 mg/kg阿卡波糖生理盐水溶液、100 mg/kg槲皮素生理盐水溶液或200 mg/kg槲皮素生理盐水溶液。所有小鼠在治疗后60分钟经口给予淀粉（2 g/kg）。分别于0、30、60和120分钟从尾静脉采集血样并测定血糖。采用梯形法则计算曲线下面积（AUC）[2]。
大鼠主动脉环血管生成实验：雄性Wistar大鼠（体重约200 g）在乙醚麻醉下处死。取出胸主动脉，用RPMI 1640培养基洗涤，翻转，切成1-1.5 mm的片段。胶原凝胶的制备方法为：8体积猪肌腱胶原溶液（3 mg/mL）、1体积10× Eagle's MEM培养基和1体积重组缓冲液（0.08 M NaOH，200 mM HEPES）。将每段主动脉置于6孔板中，覆盖0.5 mL凝胶基质，于37°C下凝胶20分钟，然后覆盖2 mL含1% ITS+的RPMI 1640培养基。加入槲皮苷（100 μM）或溶剂对照。在37°C、5% CO₂条件下培养10天，第7天更换培养基。使用相差显微镜和Adobe Photoshop软件测量从主动脉段切端到毛细血管大致平均点的毛细血管长度。100 μM槲皮苷的抑制作用弱于槲皮素和异槲皮苷，但强于芦丁（图2，参考文献[3]）。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
槲皮素 7-O-α-L-鼠李糖苷是一种槲皮素 O-糖苷，其结构中槲皮素通过糖苷键与 α-L-鼠李糖基部分在 7 位连接。它是一种代谢产物。它是一种 α-L-鼠李糖苷、单糖衍生物、四羟基黄酮、槲皮素 O-糖苷，也是一种黄酮醇化合物。其功能与 α-L-鼠李糖基相关。据报道，在短果柱状白花藻 (Stylidocleome brachycarpa)、金黄色图林藻 (Thulinella chrysantha) 和其他具有相关数据的生物体中发现了柱状白花藻 B。
槲皮素 在 12 种黄酮类糖苷中，通过虚拟筛选和体外酶活性测定，被鉴定为一种高效的 α-葡萄糖苷酶选择性抑制剂。其选择性抑制机制涉及通过非共价键（主要是氢键）与α-葡萄糖苷酶活性口袋中的氨基酸残基形成更高的结合亲和力，从而导致构象变化并形成酶-抑制剂复合物，进而阻断底物结合[2]。 在构效关系分析中，与C3位糖基化相比，A7位糖基化（如槲皮苷）显著增强了α-葡萄糖苷酶抑制活性。B4'和B5'位的羟基也有利于α-葡萄糖苷酶抑制[2]。 在抗血管生成研究中，C-3位连接葡萄糖（异槲皮苷）对于抗血管生成活性至关重要，而C-7位糖基化（槲皮苷）的活性较弱，二糖基化（芦丁）则无效[3]。 |
| 分子式 |
C21H20O11
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|---|---|
| 分子量 |
448.3769
|
| 精确质量 |
448.1
|
| CAS号 |
22007-72-3
|
| PubChem CID |
5748601
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| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
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| 密度 |
1.7±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
801.1±65.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
174-175℃ (methanol )
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| 闪点 |
283.8±27.8 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±3.0 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.755
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| LogP |
1.72
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| tPSA |
190.28
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
7
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
11
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
741
|
| 定义原子立体中心数目 |
5
|
| SMILES |
C[C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]([C@@H](O1)OC2=CC(=C3C(=C2)OC(=C(C3=O)O)C4=CC(=C(C=C4)O)O)O)O)O)O
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| InChi Key |
QPHXPNUXTNHJOF-XNFUJFQVSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C21H20O11/c1-7-15(25)17(27)19(29)21(30-7)31-9-5-12(24)14-13(6-9)32-20(18(28)16(14)26)8-2-3-10(22)11(23)4-8/h2-7,15,17,19,21-25,27-29H,1H3/t7-,15-,17+,19+,21-/m0/s1
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| 化学名 |
2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,5-dihydroxy-7-[(2S,3R,4R,5R,6S)-3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxychromen-4-one
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| 别名 |
Vincetoxicoside B
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~223.03 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2303 mL | 11.1513 mL | 22.3025 mL | |
| 5 mM | 0.4461 mL | 2.2303 mL | 4.4605 mL | |
| 10 mM | 0.2230 mL | 1.1151 mL | 2.2303 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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