| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
R-268712 is a potent, orally active inhibitor of activin receptor-like kinase 5 (ALK-5), which is the type I receptor of transforming growth factor-beta (TGF-β). Its in vitro half-maximal inhibitory concentration (IC₅₀) against ALK-5 is 2.5 nM [1].
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在HFL-1细胞中，R-268712（3、10、30、100、300 nM；1 h）以剂量依赖的方式抑制Smad3磷酸化，IC50为10.4 nM [1]。R-268712（3、10、30、100和300 nM；72 h）在不影响HFL-1细胞增殖的情况下，以剂量依赖的方式抑制成纤维细胞的肌成纤维细胞转分化（MTD）[1]。
抑制Smad3磷酸化：在用TGF-β1（5 ng/mL）刺激的HFL-1人肺成纤维细胞中，R-268712以剂量依赖的方式抑制Smad3的磷酸化。该抑制剂的IC₅₀值为10.4 nM [1]。 抑制肌成纤维细胞转分化（MTD）：在HFL-1人肺成纤维细胞中，用TGF-β1（5 ng/mL）刺激72小时可增加α-平滑肌肌动蛋白（αSMA）阳性细胞的数量，αSMA是肌成纤维细胞的标志物。R-268712以剂量依赖的方式抑制TGF-β1诱导的肌成纤维细胞转分化，而不影响细胞增殖[1]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 UUO 模型中，R-268712（1、3、10 mg/kg；口服；每日一次，连续 3 天）以剂量依赖的方式抑制肾脏荧光素酶活性[2]。在 Thy1 肾炎模型中，R-268712（0.3、1、3、10 mg/kg；口服；单剂量）在 1 mg/kg 剂量下表现出肾脏保护作用（改善和维持肾功能以及抑制肾小球功能）[2]。
在博来霉素诱导的肺纤维化模型中的疗效（短期）：在采用 Col1a1-IRES-Luc 敲入 (KI) 小鼠的博来霉素 (BLM) 诱导的肺纤维化模型中，口服 R-268712 可显著抑制 BLM 灌注后 7 天测得的肺荧光素酶活性（I 型胶原表达的报告基因）的增加。在 30 mg/kg 的剂量下，与载体对照组相比，该药物可使荧光素酶活性降低 79% [1]。 在博来霉素诱导的肺纤维化模型中的疗效（长期）：在 C57BL/6 小鼠的 21 天博来霉素诱导的肺纤维化模型中，口服 R-268712 可显著减弱肺羟脯氨酸含量（胶原沉积的指标）的增加。在 30 mg/kg 和 100 mg/kg 的剂量下均观察到显著疗效 [1]。 |
| 酶活实验 |
先前已测定了R-268712对ALK-5的体外抑制活性。它是一种强效的ALK-5抑制剂，是通过对SB-431542进行优化而开发的，其IC₅₀值为2.5 nM，比SB-431542（IC₅₀ = 96 nM）的效力高40倍[1]。
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| 细胞实验 |
细胞活力检测[1]
细胞类型： HFL-1 细胞 测试浓度： 3、10、30、100、300 nM 孵育时间： 1 或 72 小时 实验结果： 以剂量依赖的方式抑制 Smad3 的磷酸化，IC50 为 10.4 nM（孵育 1 小时）。以剂量依赖的方式抑制成纤维细胞的肌成纤维细胞转分化 (MTD)，但不抑制细胞生长（孵育 72 小时）。 HFL-1 细胞中 Smad3 磷酸化检测：将 HFL-1 人肺成纤维细胞接种于 96 孔培养板中。细胞经过夜培养后，在无血清培养基中饥饿培养4小时。随后，用5 ng/mL重组人TGF-β1和不同浓度的R-268712处理细胞。孵育1小时后收集细胞。使用Smad3 PhosphoTracer ELISA试剂盒检测磷酸化Smad3 (pSmad3)水平，并以GAPDH PhosphoTracer ELISA试剂盒检测的GAPDH蛋白水平进行标准化[1]。 HFL-1细胞肌成纤维细胞转分化(MTD)实验：将HFL-1细胞接种于96孔透明底黑色微孔板中。过夜培养后，细胞饥饿培养，然后用5 ng/mL TGF-β1和不同浓度的R-268712处理72小时。随后用冷丙酮-甲醇固定细胞，封闭，并与抗αSMA抗体孵育，接着用Alexa Fluor 488标记的二抗和Hoechst 33342进行核染色。使用IN Cell Analyzer 6000测量免疫荧光强度。对αSMA阳性区域进行定量，并根据细胞数量（基于细胞核计数）进行标准化[1]。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性WKY/Hos大鼠[2]。剂量：0.3、1、3和10 mg/kg。
给药途径：口服；单次给药。 实验结果：R-268712在雄性WKY/Hos大鼠（n=4）中的药代动力学/PK参数1.19[2]。口服（0.3 mg/kg）口服（1 mg/kg）口服（3 mg/kg）口服（10 mg/kg）AUC0-24（μg·h/mL）0.075 0.28 1.6 8.2。动物/疾病模型：雄性Col1a1-Luc Tg大鼠（10至14周龄；UUO模型；n=5-6）[2]。 剂量： 1、3、10 mg/kg 给药途径： 口服（po，即灌胃），每日一次，连续3天。 实验结果： 肾脏荧光素酶活性呈剂量依赖性抑制。 动物/疾病模型： 雄性WKY/Hos大鼠（4周龄；Thy1肾炎模型；n=7）[2]。 剂量： 0.3、1 mg/kg 给药途径： 口服，每日一次，连续33天。 实验结果： 第21天蛋白尿显著降低（抑制作用持续至第28天），血清肌酐水平（1 mg/kg剂量）也显著降低。 1 mg/kg 剂量下，该药物可显著抑制肾小球硬化达 28%，并减少羟脯氨酸含量的增加。1 mg/kg 剂量可抑制系膜实质细胞的活化和足细胞的损伤。 博来霉素诱导的 KI 小鼠肺纤维化模型（短期疗效）：** 将雄性 Col1a1-IRES-Luc KI 小鼠经气管内滴注博来霉素 (BLM) 以诱导肺纤维化。R-268712 悬浮于 0.5% 甲基纤维素 400 中，每日一次口服不同剂量（例如 30 mg/kg），给药体积为 10 mL/kg 体重。给药从 BLM 注射当天开始，持续至解剖前一天。对照组和溶剂组接受等体积的 0.5% 甲基纤维素溶液。在博来霉素（BLM）灌注后第7天测量肺组织中的荧光素酶活性[1]。 * **C57BL/6小鼠博来霉素诱导肺纤维化模型（长期疗效）：** 将雄性C57BL/6小鼠气管内灌注博来霉素。R-268712悬浮于0.5%甲基纤维素溶液中，每日一次口服给药，剂量分别为30和100 mg/kg（10 mL/kg），持续21天。在博来霉素灌注后第21天测量肺组织中的羟脯氨酸含量[1]。 KI小鼠博来霉素诱导肺纤维化模型（短期疗效）：将雄性Col1a1-IRES-Luc KI小鼠气管内灌注博来霉素（BLM）以诱导肺纤维化。将R-268712悬浮于0.5%甲基纤维素400溶液中，每日一次口服给药，剂量分别为30 mg/kg和100 mg/kg（10 mL/kg体重）。给药从博来霉素（BLM）注射当天开始，持续至解剖前一天。对照组和溶剂组接受等体积的0.5%甲基纤维素溶液。在BLM灌注后第7天测量肺组织中的荧光素酶活性[1]。 C57BL/6小鼠BLM诱导肺纤维化模型（长期疗效）：雄性C57BL/6小鼠经气管内灌注BLM。将R-268712悬浮于0.5%甲基纤维素溶液中，每日一次口服给药，剂量分别为30 mg/kg和100 mg/kg（10 mL/kg），持续21天。在博来霉素灌注后第21天测量肺组织中的羟脯氨酸含量[1]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
R-268712 被描述为一种口服有效的 ALK-5 抑制剂 [1]。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
初步研究表明，口服10 mg/kg剂量的R-268712可抑制半肾切除抗Thy1肾小球肾炎模型的体重增加。因此，为了避免TGF-β多效性作用可能引起的副作用，本研究选择0.3 mg/kg和1 mg/kg剂量进行疗效评估[2]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
R-268712 是一种强效且口服有效的 ALK-5 抑制剂，它是在早期 ALK-5 抑制剂 SB-431542 的基础上优化开发的。其主要作用机制是通过阻断 Smad3 的磷酸化来抑制 TGF-β 信号通路。在肺纤维化模型中，R-268712 通过抑制肌成纤维细胞的转分化和随后的胶原蛋白生成，展现出强大的抗纤维化功效。该化合物的活性已通过一种新型的 Col1a1-IRES-Luc KI 小鼠模型得到有效评估，该模型可通过测量荧光素酶活性（作为 I 型胶原蛋白表达的替代指标）来快速（7 天）评估抗纤维化效果 [1]。
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| 分子式 |
C20H18FN5O
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|---|---|
| 分子量 |
363.39
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| 精确质量 |
363.149
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| CAS号 |
879487-87-3
|
| PubChem CID |
11703284
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
576.8±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
302.7±30.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.7 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.675
|
| LogP |
2.79
|
| tPSA |
79.6
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
27
|
| 分子复杂度/Complexity |
483
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
JQGOCCALXFSRHZ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H18FN5O/c1-13-3-2-4-19(24-13)20-17(11-22-25-20)14-5-6-18(21)16(9-14)15-10-23-26(12-15)7-8-27/h2-6,9-12,27H,7-8H2,1H3,(H,22,25)
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| 化学名 |
2-[4-[2-fluoro-5-[5-(6-methylpyridin-2-yl)-1H-pyrazol-4-yl]phenyl]pyrazol-1-yl]ethanol
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| 别名 |
R-268712 R268712 R 268712
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~125 mg/mL (~343.98 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.72 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.72 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.72 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7519 mL | 13.7593 mL | 27.5186 mL | |
| 5 mM | 0.5504 mL | 2.7519 mL | 5.5037 mL | |
| 10 mM | 0.2752 mL | 1.3759 mL | 2.7519 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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