| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| 靶点 |
Radioprotectin-1 is a powerful agonist of LPA2 with an EC50 of 5 pM and acts as a complete agonist of the human ortholog of LPA2 [1]. Radioprotectin-1 (0-3 μM; 15 min) substantially decreases apoptosis generated by gamma radiation and the radiomimetic medication doxorubicin in cells expressing LPA2 endogenously or after transfection [1].
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| 体外研究 (In Vitro) |
Radioprotectin-1 是 LPA2 的强效激动剂，EC50 为 5 pM，并且是 LPA2 人类直系同源物的完全激动剂 [1]。 Radioprotectin-1（0-3 μM；15 分钟）可显着减少内源或转染后表达 LPA2 的细胞中由 γ 辐射和拟放射药物阿霉素产生的细胞凋亡 [1]。
Radioprotectin-1（RP-1）是LPA2 GPCR亚型的选择性激动剂，通过TGFα脱落实验测定，其对小鼠LPA2受体的EC50为25 nM，与LPA 18:1（EC50 = 32 nM）效力相当。它不激活也不抑制其他LPA受体亚型（LPA1、LPA3、LPA4、LPA5、LPA6）。[1] 在转导了人LPA2的小鼠胚胎成纤维细胞（LPA2-DKOMEF）中，RP-1（10 µM）能显著降低由15 Gy γ射线照射诱导的caspase 3/7活性（细胞凋亡），但在空载体转导的对照MEF细胞中无效。[1] 在大鼠肠上皮细胞（IEC-6）中，于放射模拟药物阿霉素（1.7 µM）处理30分钟后给予RP-1（1.0 或 3.0 µM），可将诱导的caspase 3/7活性降低约50%。[1] 在15 Gy γ照射后30分钟给予RP-1（10 µM）处理，通过流式细胞术在照射后4小时检测发现，与空载体对照MEF细胞相比，LPA2-DKOMEF细胞中γ-H2AX阳性细胞（指示DNA双链断裂）的百分比显著降低。[1] IEC-6细胞的克隆形成存活实验显示，在照射后2小时给予10 µM RP-1处理，与溶剂对照组相比，能显著提高细胞在2-10 Gy γ照射后的存活分数。[1] 对小鼠肠道类器官的定量RT-PCR分析显示，用1 µM RP-1处理24小时，增加了未照射培养物中LPA1、LPA2和LPA3受体的转录本丰度。此外，5 Gy γ射线照射特异性地增加了Ipar2（LPA2）转录本水平，并且RP-1处理在照射后30分钟内进一步增强了这种增加。[1] 在源自Lgr5-EGFP-CreER；Tdtomatoflox小鼠的小肠类器官培养物中，在5 Gy γ照射前24小时用1 µM RP-1预处理，与未处理的照射对照组相比，显著提高了照射后第5天和第6天的类器官存活率。[1] 在上述类器官培养物中使用4-羟基他莫昔芬（4-OHT）诱导Lgr5+细胞中Tdtomato表达的谱系追踪显示，用1 µM RP-1预处理在照射后第3天保留了Lgr5+肠干细胞群。在RP-1预处理的照射培养物中，平均每50 µm隐窝长度计数到11.6 ± 0.6个Tdtomato+细胞，与未照射对照组相当，而在照射的溶剂处理培养物中未检测到Tdtomato+细胞。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
小鼠 LPA2 GPCR 的高效选择性激动剂是 radioprotectin-1 [1]。皮下注射 radioprotectin-1（0.1 mg/kg、0.3 mg/kg；每 12 小时一次；持续 3 天）可降低 C57BL/6 小鼠死亡率 (GI-ARS) [1]。在 Lgr5+ 干细胞中，radioprotectin-1 特异性激活上调的 LPA2 GPCR，从而产生辐射防护和辐射缓解作用 [1]。
在造血急性放射综合征（HE-ARS）的小鼠全身照射（TBI）模型中，C57BL/6小鼠接受9.0 Gy γ射线照射（LD80/30）。在照射后26 ± 2小时开始，皮下注射Radioprotectin-1（RP-1），剂量为0.1 mg/kg或0.3 mg/kg，每12小时一次，持续3天，与溶剂对照组相比，显著改善了30天存活率。存活率分别为65%（0.1 mg/kg）和55%（0.3 mg/kg），而溶剂组为25%。[1] 在胃肠道急性放射综合征（GI-ARS）的小鼠部分身体照射（PBI）模型中（屏蔽约15%骨髓），小鼠接受16.0 Gy γ射线照射。采用相同的给药方案（照射后26 ± 2小时开始，皮下注射，每12小时一次，持续3天），RP-1在0.1 mg/kg或0.3 mg/kg剂量下显著改善了30天存活率。存活率分别为85%（0.1 mg/kg）和70%（0.3 mg/kg），而溶剂组为45%。[1] |
| 酶活实验 |
使用转化生长因子α（TGFα）脱落实验测量所有六种小鼠LPA GPCR亚型的受体激活。简要流程如下：将HEK293细胞瞬时转染编码单个LPA受体的质粒、碱性磷酸酶偶联的TGFα（AP-TGFα）以及适当的嵌合Gα蛋白。将转染的细胞铺板，使其贴壁，然后用系列稀释的Radioprotectin-1（RP-1）或LPA（18:1）刺激一小时。然后将条件培养基转移到新板中，将细胞板和培养基板都与对硝基苯磷酸盐（p-NPP）底物一起孵育。通过测量405 nm处的吸光度，对释放到培养基中的碱性磷酸酶活性（反映受体激活）进行量化。通过从受体转染细胞的响应中减去模拟转染细胞的响应来计算受体特异性激活。对于LPA4、LPA5和LPA6转染，加入了LPA1/3双重拮抗剂以阻断内源性表达受体的干扰。[1]
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| 细胞实验 |
细胞活力测定 [1]
细胞类型： MEF 细胞、IEC-6 细胞 测试浓度： 0 μM、0.1 μM、0.3 μM、1.0 μM ，3 μM 孵育时间： 15 分钟 实验结果： 通过伽马射线辐射和拟放射化疗获得阿霉素。 辐射/药物诱导的细胞凋亡实验： 将小鼠胚胎成纤维细胞（MEF；LPA2-DKOMEF或空载体-DKOMEF）或大鼠肠上皮细胞（IEC-6）铺板并进行血清饥饿。对于辐射诱导，细胞暴露于15 Gy γ射线。对于药物诱导，细胞用1.7 µM阿霉素处理。在指定时间点（例如，处理后30分钟或1小时）添加Radioprotectin-1（RP-1）或溶剂。分别在6小时后（对于MEF）或24小时后（对于IEC-6）使用Caspase-Glo 3/7检测法（通过测量caspase-3/7活性产生的发光）定量细胞凋亡。[1] γ-H2AX免疫荧光和流式细胞术分析： 将LPA2-DKOMEF和空载体-DKOMEF细胞铺板，血清饥饿，并在暴露于15 Gy γ射线前用RP-1（10 µM）、LPA（10 µM）或溶剂预处理15分钟。照射后更换为含有化合物的新鲜培养基。照射后4小时，将细胞胰蛋白酶消化、固定、透化，并用荧光标记的抗磷酸化组蛋白H2AX（Ser139，γ-H2AX）抗体染色。通过流式细胞术分析γ-H2AX高阳性细胞的百分比。[1] 克隆形成存活实验： 将IEC-6细胞以低密度铺板并进行血清饥饿。第二天，培养物暴露于2-10 Gy γ射线。照射后2小时，更换为含有10 µM RP-1或溶剂的新鲜无血清培养基。每日补充处理培养基。孵育3天后，用甲醇固定细胞，结晶紫染色，并人工计数菌落（定义为>50个细胞的群体）。相对于未照射对照的铺板效率计算存活分数。[1] 类器官培养与存活分析： 从小鼠分离小肠隐窝，包埋于基质胶中，并在专用培养基中培养形成肠类器官。培养6天后，用1 µM RP-1、1 µM LPA或溶剂预处理类器官24小时。然后更换培养基，培养物暴露于5 Gy γ射线。培养物用常规培养基更换维持，每天计数存活（完整、透亮）的类器官数量，持续至照射后6天。存活率表示为相对于照射当天数量的百分比。[1] 类器官中的谱系追踪： 类器官源自Lgr5-EGFP-CreER；Tdtomatoflox转基因小鼠。按照标准的预处理和照射方案后，在照射后第2天或第3天向培养基中添加4-羟基他莫昔芬（4-OHT，1 µM），以诱导Cre介导的重组和在Lgr5+细胞及其后代中永久性表达Tdtomato。在添加4-OHT后24小时（照射后第3天或第4天）固定类器官，对GFP进行免疫染色（以识别Lgr5+细胞），并用Hoechst复染。使用共聚焦显微镜对类器官成像。从每个生物学重复的多个隐窝中人工计数隐窝底部50 µm区域内的Tdtomato+细胞。[1] LPA受体转录本的定量RT-PCR： 培养肠道类器官，用1 µM RP-1或溶剂预处理24小时，然后暴露于5 Gy γ射线或假照射。照射后30分钟，使用微量RNA提取试剂盒从类器官中分离总RNA。合成cDNA，并使用针对小鼠Lpar1、Lpar2、Lpar3和Gapdh（管家基因）的TaqMan基因表达检测法进行定量PCR。使用2^(-ΔΔCt)法计算相对基因表达量。[1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 8-10周龄C57BL/6雌性小鼠，接受全身照射（TBI）[1]
剂量： 0.1 mg/kg，0.3 mg/kg 给药途径： 皮下注射；每12小时一次；持续3天 实验结果： 在HE-ARS和GI-ARS模型中，C57BL/6小鼠的死亡率降低。 造血系统急性逆转录病毒综合征（HE-ARS）模型：8-10周龄雌性C57BL/6小鼠适应环境后，接受来自Cs-137源的9.0 Gy γ射线全身照射（TBI），剂量率约为0.82 Gy/min。照射后 26 ± 2 小时开始，小鼠接受皮下注射放射保护素-1 (RP-1)，剂量为 0.1 mg/kg 或 0.3 mg/kg，或注射赋形剂（0.1% 乙醇，2% 丙二醇的 PBS 溶液）。每 12 小时注射一次，共注射 3 天。从第 4 天开始，小鼠被提供凝胶食物包，并可自由摄取经灭菌处理的饲料和水。每天两次监测动物的健康状况和存活情况，持续 30 天。[1] 胃肠道急性放射综合征 (GI-ARS) 模型：将 8 至 10 周龄的雌性 C57BL/6 小鼠麻醉后，置于有机玻璃约束器中，用铅屏蔽其膝盖以下的腿部，保留约 15% 的骨髓。随后，他们接受了16.0 Gy γ射线的部分身体照射（PBI）。药物治疗方案（RP-1，剂量为0.1或0.3 mg/kg，或赋形剂，皮下注射，每12小时一次，持续3天，从照射后26±2小时开始）、支持治疗和生存监测均与HE-ARS模型相同。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
放射防护素-1 (RP-1)，化学名称为5-氯-2-(N-(4-(1,3-二氧代-1H-苯并[de]异喹啉-2(3H)-基)丁基)磺酰基)苯甲酸，是一种合成的非脂质激动剂，特异性靶向溶血磷脂酸受体2 (LPA2)。它是通过构效关系 (SAR) 研究，从磺酰基苯甲酸 (SBA) 化合物系列开发而来。[1] RP-1 的放射防护和放射缓解作用机制被认为是特异性激活 LPA2 GPCR，LPA2 在细胞（尤其是 Lgr5+ 肠道干细胞）中辐射暴露后表达上调。已知 LPA2 激活可募集抗凋亡信号复合物，并参与增强 DNA 损伤修复，这可由 γ-H2AX 灶的减少得到证实。 [1]
RP-1 在造血系统和胃肠道中均显示出保护机体免受辐射损伤的功效，使其成为缓解急性放射综合征 (ARS) 的潜在候选药物。它尤其能够保护 Lgr5+ 肠道干细胞群，而该干细胞群对于上皮再生至关重要。[1] 该研究指出，RP-1 的效力存在显著的物种差异，尽管序列同源性很高，但其对人 LPA2 同源物的亲和力（EC50 = 5 pM）远高于对鼠同源物的亲和力（EC50 = 25 nM）。这凸显了跨物种测试配体的重要性。 [1]除了辐射防护之外，该论文还指出，基于LPA2受体已知的生物学特性，RP-1等物质激活LPA2可能在其他疾病中具有治疗潜力，例如预防非甾体抗炎药引起的胃糜烂、缓解哮喘和抑制分泌性腹泻。[1] |
| 分子式 |
C23H19CLN2O6S
|
|---|---|
| 分子量 |
486.924763917923
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| 精确质量 |
486.065
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| CAS号 |
1622006-09-0
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| PubChem CID |
77461257
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| LogP |
3.7
|
| tPSA |
129
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
8
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| 重原子数目 |
33
|
| 分子复杂度/Complexity |
845
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
ClC1C=CC(=C(C(=O)O)C=1)S(NCCCCN1C(C2=CC=CC3=CC=CC(C1=O)=C23)=O)(=O)=O
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| InChi Key |
OVJUYQCJIFWMBI-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H19ClN2O6S/c24-15-9-10-19(18(13-15)23(29)30)33(31,32)25-11-1-2-12-26-21(27)16-7-3-5-14-6-4-8-17(20(14)16)22(26)28/h3-10,13,25H,1-2,11-12H2,(H,29,30)
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| 化学名 |
5-chloro-2-[4-(1,3-dioxobenzo[de]isoquinolin-2-yl)butylsulfamoyl]benzoic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~125 mg/mL (~256.72 mM)
H2O : < 0.1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0537 mL | 10.2686 mL | 20.5373 mL | |
| 5 mM | 0.4107 mL | 2.0537 mL | 4.1075 mL | |
| 10 mM | 0.2054 mL | 1.0269 mL | 2.0537 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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