RF9

别名: RF-9 RF9 RF 9

目录号: V7579 纯度: ≥98%

COA 产品数据产品说明书 SDS

RF9 是一种有效且特异性的神经肽 FF 受体阻断剂（拮抗剂），对 hNPFF1R 和 hNPFF2R 的 Kis 分别为 58 和 7 nM。

RF9 CAS号: 876310-60-0
产品类别: New1

产品仅用于科学研究，不针对患者销售

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Nature 2025, 643(8070):192-200.

Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Science Adv 2025, 11(33):eadr5199.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

Immunity 2024,57:2651-2668.e12.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

产品描述
生物活性&实验参考方法
化学信息
溶解度数据
计算器
生物数据图片

产品描述

RF9 是一种强效且特异性的神经肽 FF 受体阻滞剂（拮抗剂），对 hNPFF1R 和 hNPFF2R 的 Ki 值分别为 58 nM 和 7 nM。
RF9 是一种强效且选择性的神经肽 FF (NPFF) 受体拮抗剂。研究表明，RF9 可完全阻断海洛因诱导的大鼠痛觉过敏，剂量依赖性地阻断芬太尼或吗啡诱导的痛觉过敏，增强阿片类药物的镇痛作用，并抑制吗啡耐受性的发展。[2]

生物活性&实验参考方法

靶点	NPFF1 receptor antagonist (IC50 = 0.41 μM, against 1 μM NPFF-induced inhibition of forskolin-stimulated cAMP accumulation in HEK-293 cells expressing NPFF1 receptor) [2] NPFF2 receptor antagonist (IC50 = 0.41 μM, against 1 μM NPFF-induced inhibition of forskolin-stimulated cAMP accumulation in HEK-293 cells expressing NPFF2 receptor) [2]
体外研究 (In Vitro)	在Neuro 2A细胞中，RF9（10 μM）预处理完全抑制了NPFF诱导的神经突发育[2]。体外实验表明，RF9呈剂量依赖性地逆转了1 μM NPFF对稳定表达NPFF1受体的HEK-293细胞中福斯克林刺激的cAMP积累的抑制作用，IC50值为0.41 (0.24-0.69) μM。[2]在稳定表达NPFF2受体的HEK-293细胞中，RF9也逆转了1 μM NPFF对福斯克林刺激的cAMP积累的作用，IC50值为0.41 (0.24-0.69) μM。 [2] 在内源性表达 NPFF2 受体的 Neuro 2A 细胞中，用 1 μM NPFF 处理可显著诱导神经突生长（24.05 ± 1.19% 的细胞具有神经突），而用 10 μM RF9 预处理可完全阻断这种效应（12.86 ± 0.77% 的细胞具有神经突，P < 0.001）。在相同剂量下，单独使用 RF9 不会改变神经突生长（12.41 ± 0.53% 的细胞具有神经突）。[2]
体内研究 (In Vivo)	当RF9（0.1 mg/kg，皮下注射）与海洛因同时给药时，可避免海洛因引起的迟发性痛觉过敏和耐受性[1]。单独输注RF9（10 μg）后，平均动脉压（MAP）和心率未发生显著变化。另一方面，当RF9与NPFF联合给药时，NPFF引起的心率和MAP升高被显著抑制[1]。在小鼠甩尾试验中，单独脑室内（icv）注射RF9（10 nmol）并未改变甩尾潜伏期。 [2]在角叉菜胶诱导的炎症性疼痛模型中，脊髓内预先注射RF9（10 nmol）显著拮抗了NPFF2激动剂dNPA以及支链肽模拟物EKR和RKE诱导的抗痛觉过敏作用（P < 0.001），但对吗啡诱导的抗痛觉过敏作用无影响。[2]在镇痛耐受性研究中，在吗啡（4 nmol，脑室内注射）给药前5分钟，每日一次，连续8天，脑室内注射RF9（20 nmol）显著逆转了从第6天到第8天吗啡镇痛耐受性的发展（P < 0.001）。然而，在测试期间，RF9并未改变EKR（20 nmol，脑室内注射）或RKE（20 nmol，脑室内注射）的镇痛作用。[2]
酶活实验	本研究采用cAMP积累实验，在稳定表达NPFF1或NPFF2受体的HEK-293A细胞中评估了RF9对NPFF受体的体外功能活性。细胞培养于含10% FBS和0.1%抗生素的DMEM培养基中。24小时后，将细胞置于含1 mM IBMX的无血清培养基中，于37℃孵育10分钟。随后，用不同浓度的RF9和5 μM福斯克林处理细胞，并在37℃继续培养30分钟。为评估RF9的拮抗作用，测定了RF9逆转1 μM NPFF对福斯克林诱导的cAMP积累的影响的能力。细胞用0.2 M HCl裂解30分钟，然后用10 M NaOH中和。采用竞争性蛋白激酶A（PKA）结合试验测定cAMP水平。[2]
细胞实验	在Neuro 2A细胞中进行神经突生长实验。将细胞培养于含10% FBS和1%抗生素的DMEM培养基中，并接种于12孔板。24小时后，将细胞置于含1 μM NPFF、或不含10 μM RF9的无血清培养基中，于37℃孵育18小时。在相差显微镜下计数神经突长度等于或大于细胞体长度两倍的细胞。每个孔随机选取约300个细胞的区域进行计数。[2]
动物实验	动物/疾病模型：大鼠[1]。剂量： 0.1 mg/kg。给药途径：在大鼠达到基础痛觉阈值前30分钟，皮下注射0.3 mg/kg海洛因或生理盐水。实验结果：对抗迟发性海洛因诱导的痛觉过敏及相关耐受性。动物实验在雄性昆明小鼠中进行。脑室内（icv）给药时，以10 μl/min的恒定速率，将药物以4 μl的固定体积注入侧脑室，随后用1 μl生理盐水冲洗导管。对于鞘内注射（it），将25 μl微量注射器插入L5和L6椎体之间，以10 μl/min的速率将药物以5 μl的体积注入蛛网膜下腔。对于腹腔注射（ip），小鼠接受10 ml/kg的总注射量。RF9溶解于生理盐水中。在甩尾试验中，在给予激动剂前5分钟，脑室内注射（icv）RF9（10 nmol）。在角叉菜胶诱导的炎症性疼痛模型中，在给予激动剂前5分钟，鞘内注射（it）RF9（10 nmol）。在耐受性研究中，每天一次，连续 8 天，在吗啡（4 nmol，脑室内注射）、EKR（20 nmol，脑室内注射）或 RKE（20 nmol，脑室内注射）前 5 分钟给予 RF9（20 nmol，脑室内注射），并每天使用甩尾试验测量镇痛效果。[2]
参考文献	[1]. RF9, a potent and selective neuropeptide FF receptor antagonist, prevents opioid-induced tolerance associated with hyperalgesia. Proc Natl Acad Sci U S A. 2006 Jan 10;103(2):466-71. [2]. Discovery of Two Novel Branched Peptidomimetics Containing endomorphin-2 and RF9 Pharmacophores: Synthesis and Neuropharmacological Evaluation. Bioorg Med Chem. 2019 Feb 15;27(4):630-643.
其他信息	RF9 是一种由 L-精氨酸和 L-苯丙氨酸残基组成的二肽，其中精氨酸残基 α-氨基氮原子上的氢原子被 1-金刚烷羰基取代。据报道，RF9 是一种强效且选择性的神经肽 FF (NPFF) 受体拮抗剂，但最近的研究发现它也是 NPFF1R 和 kisspeptin 受体 (KISS1R) 的激动剂。它的作用机制与 Arg-Ala 类似。 RF9 (CAS#: 876310-60-0) 是一种强效且选择性的神经肽 FF (NPFF) 受体拮抗剂。据报道，它能预防阿片类药物引起的痛觉过敏和耐受性。在本研究中，RF9 被用作参考 NPFF 受体拮抗剂，以研究新型支链肽模拟物 EKR 和 RKE 的药理学特性。 RF9完全阻断了NPFF2受体介导的Neuro 2A细胞神经突生长，并逆转了吗啡耐受性的发展。这些发现证实了NPFF系统在阿片类药物介导的耐受性中的重要作用。[2]

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

分子式	C26H38N6O3
分子量	482.63
精确质量	482.3
CAS号	876310-60-0
相关CAS号	RF9 hydrochloride
PubChem CID	53320361
外观&性状	White to off-white solid powder
LogP	4.325
tPSA	200.49
氢键供体(HBD)数目	5
氢键受体(HBA)数目	4
可旋转键数目(RBC)	11
重原子数目	35
分子复杂度/Complexity	777
定义原子立体中心数目	2
SMILES	C1C2CC3CC1CC(C2)(C3)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC4=CC=CC=C4)C(=O)N
InChi Key	UMKHUSRDQFQHAK-RNJMTYCLSA-N
InChi Code	InChI=1S/C26H38N6O3/c27-22(33)21(12-16-5-2-1-3-6-16)31-23(34)20(7-4-8-30-25(28)29)32-24(35)26-13-17-9-18(14-26)11-19(10-17)15-26/h1-3,5-6,17-21H,4,7-15H2,(H2,27,33)(H,31,34)(H,32,35)(H4,28,29,30)/t17?,18?,19?,20-,21-,26?/m0/s1
化学名	N-[(2S)-1-[[(2S)-1-amino-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]adamantane-1-carboxamide
别名	RF-9 RF9 RF 9
HS Tariff Code	2934.99.9001
存储方式	Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意：请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。
运输条件	Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)	DMSO : ~125 mg/mL (~259.00 mM) H2O : ~16.67 mg/mL (~34.54 mM)
溶解度 (体内实验)	配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。配方 2 中的溶解度:* ≥ 2.08 mg/mL (4.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More* 配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。配方 4 中的溶解度: 10 mg/mL (20.72 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C). 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

溶解度 (体外实验)

DMSO : ~125 mg/mL (~259.00 mM)
H2O : ~16.67 mg/mL (~34.54 mM)

溶解度 (体内实验)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

配方 4 中的溶解度: 10 mg/mL (20.72 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C).

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

制备储备液		1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	2.0720 mL	10.3599 mL	20.7198 mL
	5 mM	0.4144 mL	2.0720 mL	4.1440 mL
	10 mM	0.2072 mL	1.0360 mL	2.0720 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片

Screening of RFamide derivatives on hNPFF2R. (A) hNPFF2R membranes were labeled with [125I]Tyr-NPFF, and three concentrations of RFamide derivatives were tested in competition experiments. Each concentration was tested in duplicate. Results for the reference and the six most active compounds are shown. Arrowheads indicate compounds that were selected for further characterization. (B) Structures of RF2, RF9, RF48, RF49, and BIBP3226.[1].Simonin F, et al. RF9, a potent and selective neuropeptide FF receptor antagonist, prevents opioid-induced tolerance associated with hyperalgesia. Proc Natl Acad Sci U S A. 2006 Jan 10;103(2):466-71.

In vitro characterization of compounds selected from the screening. (A) Stimulation of [35S]GTPγS binding to hNPFF2R by NPFF (▪), RF2 (▴), RF48 (▾) and RF49 (♦). (B) Stimulation of [35S]GTPγS binding to hNPFF2R by NPFF alone (▪) or NPFF in presence of 7.5 μM RF9 (▴). RF9 shifted the concentration-effect curve of NPFF to the right by ≈160-fold. Data are expressed as percentage of basal [35S]GTPγS binding and represent mean ± SE from at least two separate experiments in triplicate. (C) RF9 (black bars) reversed the inhibition of forskolin-induced cAMP by NPVF in CHO-hNPFF1R cells. RF9 alone was inactive, whereas NPVF (white bar) inhibited ≈60% of the stimulated cAMP. Error bars represent the mean ± SEM of data from three experiments performed in duplicate.[1].Simonin F, et al. RF9, a potent and selective neuropeptide FF receptor antagonist, prevents opioid-induced tolerance associated with hyperalgesia. Proc Natl Acad Sci U S A. 2006 Jan 10;103(2):466-71.

RF9 blocks blood pressure effects of NPFF. (A) Changes in MAP [expressed in mmHg (1 mmHg = 133 Pa)] in rats receiving either i.c.v. saline (♦), NPFF (▪), RF9 (×), or NPFF and RF9 applied together (▴). Time 0 indicates the injection point for i.c.v. saline or drug applications. (B) Heart rate changes that accompany MAP alterations in A. Pooled MAP and heart rate data are from five animals. *, significant difference in MAP or heart rate compared with control (P < 0.05).[1].Simonin F, et al. RF9, a potent and selective neuropeptide FF receptor antagonist, prevents opioid-induced tolerance associated with hyperalgesia. Proc Natl Acad Sci U S A. 2006 Jan 10;103(2):466-71.