| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Diacylglycerol lipase (DAGL), the enzyme responsible for the synthesis of the endocannabinoid 2-arachidonoylglycerol (2-AG). [3]
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| 体外研究 (In Vitro) |
胆碱酯酶的抑制可能是 RHC 80267 增强乙酰胆碱作用的原因：（1）RHC 80267 不会改变对卡巴胆碱的反应，卡巴胆碱是乙酰胆碱的氨甲酰衍生物，它与乙酰胆碱的区别仅在于它对胆碱酯酶水解具有抵抗性；（2）胆碱酯酶抑制剂新斯的明模拟了 RHC 80267 的作用，当新斯的明达到最大有效浓度时，RHC 80267 不会产生额外的作用。分析 RHC 80267 对脑匀浆中胆碱酯酶活性的影响发现，在相同的浓度范围（即 1–10 μM）内，RHC 80267 可促进乙酰胆碱舒张，同时抑制该酶的活性 [2]。在用 RHC80267 (40 μM) 预孵育的内皮完整的离体人肺动脉 (hPA) 中，血管收缩剂 U46619（一种血栓素 A₂ 类似物）的浓度-反应曲线 (CRC) 向左移动了 2.5 倍，表明收缩反应增强。在去除内皮的 hPA 中未观察到这种效应。 [3] 在用 RHC80267 (40 μM) 预孵育的内皮完整的离体大鼠肺动脉 (rPA) 中，U46619 的浓度-反应曲线 (CRC) 左移了 2.0 倍，并且与对照组相比，U46619 的最大收缩反应 (Rmax) 显著增加约 20%。在去除内皮的 rPA 中未观察到此效应。[3] 在用 RHC80267 (40 μM) 预孵育的内皮完整的离体 rPA 中，血管紧张素 II (ANG II) 的浓度-反应曲线 (CRC) 左移了 3.2 倍，并且与对照组相比，ANG II 的最大收缩反应 (Rmax) 显著增强约 30%。在去除内皮的rPA中未观察到这种调节作用。[3]
用RHC80267（40 μM）预孵育不会改变U46619在去除内皮的hPA和rPA中的血管收缩作用，也不会改变ANG II在去除内皮的rPA中的作用。[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在人和大鼠的肺动脉（分别简称hPA和rPA）中，血管紧张素II（ANG II）诱导的收缩作用可被RHC 80267（40 μM）以内皮依赖的方式增强[3]。U46619是血栓素A2类似物。
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| 酶活实验 |
体外胆碱酯酶活性测定：采用改良的Ellman法测定胆碱酯酶活性。将大鼠脑匀浆（50 mg组织/mL 0.05 M磷酸盐缓冲液，pH 7.2）在含有0.25 mM DTNB（二硫代硝基苯甲酸酯，Ellman试剂）的0.05 M磷酸盐缓冲液（pH 7.2）中，于37℃预孵育10分钟，孵育组分别加入或不加入不同浓度的RHC-80267或新斯的明。然后加入乙酰硫代胆碱（0.3 mM），用分光光度计在412 nm处监测吸光度的变化。通过比较在无抑制剂（对照组）和有抑制剂存在下测得的每分钟吸光度变化值（Δ吸光度/分钟），确定胆碱酯酶活性的抑制率。[2]
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| 细胞实验 |
洗涤人血小板的制备：用柠檬酸盐收集新鲜人全血，制备富血小板血浆。通过离心制备洗涤血小板悬液，并将其重悬于无钙Krebs-Ringer碳酸氢盐缓冲液（pH 7.4）中，浓度为3-5 × 10⁸个血小板/ml。[4]
血小板聚集和分泌测定：使用血小板聚集仪或光聚集仪测定富血小板血浆或洗涤血小板的聚集情况。向搅拌的样品中加入激动剂（ADP、肾上腺素、胶原蛋白、花生四烯酸、前列腺素H₂）。在37℃预孵育2分钟前，加入RHC-80267（溶于DMSO）或溶剂对照。通过光透射监测聚集情况，同时在光聚集仪中测定ATP释放。 [4] [³H]花生四烯酸释放和代谢测定：将洗涤后的血小板（3 × 10⁸/ml）用 2 μCi/ml [³H]花生四烯酸在 30°C 下标记 25 分钟，然后洗涤并重悬。将标记的血小板与 250 μM RHC-80267 或 DMSO 在 37°C 下预孵育 5 分钟，然后用 25 μg/ml 胶原蛋白刺激。在不同时间点取样，并用冷甲醇淬灭反应。用氯仿提取脂质，并通过薄层色谱法分离。切取对应于花生四烯酸、其代谢物（TxB₂、12-HETE、HHT）、二酰甘油和单酰甘油的薄层，并计数其放射性。将磷脂在 SG-81 滤纸上分离，以确定每类磷脂的放射性。 [4] U-46619逆转实验：采用与上述相同的实验方案，但将U-46619（5.7 μM）与胶原蛋白同时加入到预先用或不用250 μM RHC-80267孵育的血小板中。2分钟后取样进行脂质提取和分析。[4] |
| 动物实验 |
肠系膜动脉收缩/舒张实验方案：** 雄性Wistar-Kyoto (WKY)大鼠（14周龄，320-350 g）用乙醚麻醉后断头处死。取出并清洗肠系膜上动脉。将动脉段（约2 mm长）置于线式肌动描记仪中，在含10 μM吲哚美辛、95% O₂-5% CO₂混合气体的生理盐水中进行等长张力记录。平衡后，将血管张力设置为相当于100 mmHg压力下血管直径0.9倍处的张力。使用1 μM乙酰胆碱检测内皮完整性。实验前，将动脉预先用RHC-80267（0.1-10 μM）处理或不处理30分钟。随后，分别用 100 mM KCl 溶液（用于测试 NO 依赖性舒张，并加入 1 μM 酚妥拉明）或 0.5 μM 去甲肾上腺素（用于测试 EDHF 型舒张或克罗卡林引起的舒张，并加入 100 μM L-NOArg）诱发收缩。收缩达到平台期后，通过累积加入舒张剂（乙酰胆碱、卡巴胆碱、SNAP 或克罗卡林）诱发舒张。[2]
肠系膜动脉收缩/舒张方案：雄性 Wistar-Kyoto (WKY) 大鼠（14 周龄，320-350 g）用乙醚麻醉后断头处死。取出并清洗肠系膜上动脉。将约 2 mm 长的血管段安装在线式肌动描记仪上，在通入 95% O₂-5% CO₂ 混合气体的生理盐水中记录等长张力，该生理盐水中含有 10 μM 吲哚美辛。平衡后，将血管张力设置为相当于 100 mmHg 压力下血管直径 0.9 倍处的张力。使用 1 μM 乙酰胆碱检测内皮完整性。实验中，动脉预先用或不用 RHC-80267（0.1-10 μM）孵育 30 分钟。然后，用 100 mM KCl 溶液（用于检测 NO 依赖性舒张，并加入 1 μM 酚妥拉明）或 0.5 μM 去甲肾上腺素（用于检测 EDHF 型舒张或对克罗卡林的舒张，并加入 100 μM L-NOArg）诱发收缩。当收缩达到平台期后，通过累积添加松弛剂（乙酰胆碱、卡巴胆碱、SNAP 或克罗卡林）来诱发舒张。[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
N-[6-[[(环己基亚氨基)氧甲基]氨基]己基]氨基甲酸酯（环己基亚氨基）酯是一种氨基甲酸酯，也是一种有机氮化合物。
RHC80267（O,O'-[1,6-己基双(亚氨基羰基)]二肟环己酮）在本研究中用作药理学工具，以抑制二酰甘油脂肪酶 (DAGL)，该酶负责合成 2-AG。其应用旨在阐明内源性 2-AG 在调节血管收缩中的作用。本研究使用 RHC80267 的结果支持以下假设：U46619 和血管紧张素 II (ANG II) 通过 DAGL 刺激内皮依赖性 2-AG 的快速合成，而 2-AG 随后作为一种负反馈机制减弱血管收缩。实验中，使用浓度为 40 μM 的 RHC80267，并在构建血管收缩剂浓度-反应曲线之前，将组织与该药物预孵育 30 分钟。RHC80267 溶解于 DMSO 中（0.1% v/v）。[3] |
| 分子式 |
C20H34N4O4
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|---|---|
| 分子量 |
394.52
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| 精确质量 |
394.257
|
| CAS号 |
83654-05-1
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| PubChem CID |
5063
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.571
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| LogP |
3.12
|
| tPSA |
101.38
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
11
|
| 重原子数目 |
28
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| 分子复杂度/Complexity |
484
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
RXSVYGIGWRDVQC-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H34N4O4/c25-19(27-23-17-11-5-3-6-12-17)21-15-9-1-2-10-16-22-20(26)28-24-18-13-7-4-8-14-18/h1-16H2,(H,21,25)(H,22,26)
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| 化学名 |
(cyclohexylideneamino) N-[6-[(cyclohexylideneamino)oxycarbonylamino]hexyl]carbamate
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| 别名 |
RHC80267 RHC-80267 RHC 80267
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~25 mg/mL (~63.37 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5347 mL | 12.6736 mL | 25.3473 mL | |
| 5 mM | 0.5069 mL | 2.5347 mL | 5.0695 mL | |
| 10 mM | 0.2535 mL | 1.2674 mL | 2.5347 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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