| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| 靶点 |
Mitochondria (binds to inner mitochondrial membranes, inhibiting oxidative phosphorylation). [3]
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| 体外研究 (In Vitro) |
1. 配制罗丹明 6G 工作液 1.1 配制储备液。配制 5 mM 储备液的方法是：将 1 mg 罗丹明 6G 用 525 μL 无水 DMSO 稀释。1.2 配制工作液。配制 1-20 μM 罗丹明 6G 工作液时，可使用 PBS 稀释储备液或热的无血清细胞培养基。注意：请根据实际情况调整罗丹明 6G 工作液的浓度。2. 用细胞染色悬浮细胞 2.1 离心细胞，加入 PBS，洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度为 1×10⁶/mL。2.2 加入 1 mL 罗丹明 6G 工作液，室温静置 30 至 60 分钟。 2.3 以 400 g 离心 3 至 4 分钟后，移除上清液。2.4 加入 PBS 后，用 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。2.5 将细胞重悬于 1 mL PBS 或无血清培养基中，并使用流式细胞仪或荧光显微镜进行观察。3. 贴壁细胞染色 3.1 使用无菌盖玻片培养贴壁细胞。3.2 将盖玻片从培养基中取出后，吸出多余的培养基。3.3 用 100 μL 染料工作液完全覆盖细胞，轻轻摇晃，孵育 5 至 30 分钟。 3.4 吸出染料工作液，用培养基冲洗两到三次，每次五分钟，然后使用流式细胞仪或荧光显微镜进行监测。
罗丹明-6G在浓度为10⁻¹² M至10⁻² M范围内，以时间和剂量依赖的方式抑制多种肿瘤细胞系（B16-F10小鼠黑色素瘤细胞、MCF-7乳腺癌细胞、HCT-116结肠癌细胞、ACHN肾癌细胞、SW-620结肠癌细胞和原代小鼠黑色素瘤细胞）的活力和增殖。经处理的肿瘤细胞中³H-胸苷掺入（增殖的指标）的抑制率高达90%。[1] 在10⁻⁶ M的固定浓度下，罗丹明-6G处理5天后，各种恶性细胞的存活率仅为15%至17%。在B16-F10小鼠黑色素瘤细胞中观察到最显著的抑制作用。[1] 用10⁻⁶ M罗丹明-6G处理72小时后，显微镜检查肿瘤细胞系（B16-F10、ACHN、HCT）发现大量细胞破碎，单层细胞无法融合，细胞数量显著减少，并可见坏死、自噬和/或凋亡细胞。[1] 相比之下，相同浓度的罗丹明-6G（10⁻⁶ M）对正常对照细胞培养物（人外周血单核细胞、人脐静脉内皮细胞、大鼠肾上皮细胞、小鼠肾系膜细胞和肾胚胎细胞）的影响可以忽略不计，处理5天后，90%至95%的细胞未受影响。正常细胞增殖抑制率几乎不超过15-17%。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
与未接受治疗的对照组相比，接受罗丹明 6G 治疗的黑色素瘤移植小鼠表现出更优的临床指标、更长的生存期以及更低的肿瘤生长和转移数量。每周两次、每次 10⁻⁶ M 的罗丹明 6G 治疗方案效果最为显著[2]。罗丹明 6G 进入循环系统后可识别白细胞。滚动和黏附的白细胞数量以及这些细胞的总体通量可用于追踪白细胞与内皮细胞相互作用的变化[3]。在移植了 B16-F10 黑色素瘤的 C57Bl 小鼠中，每周两次皮下注射罗丹明 6G（10⁻⁶ M、10⁻⁷ M 或 10⁻⁸ M）可显著抑制肿瘤生长。在实验终点（最后一只未治疗的对照动物死亡）时，接受 10⁻⁶ M 或 10⁻⁷ M 罗丹明-6G 治疗的小鼠肿瘤体积约为 200 ± 8 mm³，而未治疗的对照组小鼠肿瘤体积约为 320 ± 10 mm³ (p < 0.001)。[1]
接受罗丹明-6G（10⁻⁶ M，每周两次）治疗的小鼠在植入后第 31 天存活率为 40%，而所有未治疗的对照组小鼠均在 3 周内死亡。[1] 接受罗丹明-6G（10⁻⁶ M，每周两次）治疗的小鼠表现出临床指标的改善，包括毛发外观改善、活动能力正常以及食欲、口渴、排尿和排便恢复正常，与健康对照组非常相似。 [1]罗丹明-6G治疗显著减少了转移扩散。每周两次接受10⁻⁶ M罗丹明-6G治疗的动物未出现可见的腹腔内转移，而未治疗的对照组则在肺、肝、肾和十二指肠出现广泛的转移。[1]预防性治疗（在肿瘤植入前7天开始）每周两次使用10⁻⁶ M罗丹明-6G，与在肿瘤植入时或之后开始治疗相比，可最显著地抑制肿瘤生长。[1] |
| 细胞实验 |
增殖/存活率测定（³H-胸苷掺入法）：将细胞以每孔 2 × 10⁶ 个细胞的密度接种于 6 孔板中，培养 24 小时。然后，将细胞暴露于不同浓度的罗丹明-6G（10⁻¹² M 至 10⁻² M）中，并同时加入 25 μCi/mL 的³H-胸苷进行脉冲标记。48 小时后，用 PBS 洗涤细胞以去除过量的放射性物质，将细胞转移至含有闪烁液的样品瓶中，并在 β 计数器中测量放射性。结果以每毫克细胞蛋白的平均计数（CPM）表示，细胞蛋白含量通过 Bradford 法测定。[1]
时间进程实验：用固定浓度的 10⁻⁶ M 罗丹明-6G 处理恶性细胞和正常细胞，并同时加入³H-胸苷进行脉冲标记。按照上述相同步骤，分别在 24 小时、48 小时、72 小时和 120 小时（5 天）收集细胞并计数，以评估细胞随时间的增殖情况。[1] 形态学分析：在罗丹明 6G 处理后，使用显微镜观察并拍摄细胞培养物，以评估单层细胞汇合度、细胞计数以及细胞死亡迹象（坏死、凋亡）。[1] |
| 动物实验 |
本研究使用3月龄雄性C57Bl小鼠（25 ± 5 g）。将B16-F10黑色素瘤细胞（1.5 × 10⁶ 个细胞，溶于0.2 mL PBS）皮下植入小鼠体内。[1]
为进行剂量探索，荷瘤小鼠每周一次皮下注射罗丹明6G（0.3 mL推注），浓度范围为10⁻¹⁰ M至10⁻² M。根据实验结果，选择10⁻⁶ M、10⁻⁷ M和10⁻⁸ M的浓度进行后续研究。 [1] 为了优化给药频率，荷瘤小鼠每周接受一次或两次皮下注射罗丹明-6G（0.3 mL推注），浓度分别为10⁻⁶ M、10⁻⁷ M或10⁻⁸ M。[1] 为了优化给药时间，荷瘤小鼠每周接受两次皮下注射10⁻⁶ M罗丹明-6G，分别在肿瘤细胞植入前7天、植入时、植入后7天或植入后14天开始。[1] 罗丹明-6G注射液的溶剂为PBS（pH 7.4），以0.3 mL推注。对照组动物接受不含罗丹明-6G的PBS注射。 [1] 每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积，并使用半椭球体公式计算：V = π/6 × L × W × H，其中 L = 长度，W = 宽度，H = 高度。[1] 每周对动物进行临床状态（外观、精神状态、食欲、口渴、排尿、排便）、体重和肿瘤发展情况的评估。记录生存情况，并在实验终点处死动物以评估腹部转移情况。[1] 使用3月龄雄性C57Bl小鼠（25 ± 5 g）。将B16-F10黑色素瘤细胞（1.5 × 10⁶ 个细胞溶于0.2 mL PBS）皮下植入小鼠体内。 [1] 为了进行剂量探索，荷瘤小鼠每周一次皮下注射罗丹明-6G（0.3 mL推注），浓度范围为10⁻¹⁰ M至10⁻² M。根据结果，选择10⁻⁶ M、10⁻⁷ M和10⁻⁸ M的浓度进行后续研究。[1] 为了优化给药频率，荷瘤小鼠每周一次或两次皮下注射罗丹明-6G（0.3 mL推注），浓度分别为10⁻⁶ M、10⁻⁷ M或10⁻⁸ M。 [1] 为了优化给药时间，荷瘤小鼠每周两次皮下注射10⁻⁶ M罗丹明-6G，分别在肿瘤细胞植入前7天、植入时、植入后7天或植入后14天开始注射。[1] 罗丹明-6G注射液为PBS（pH 7.4），以0.3 mL推注。对照组动物注射不含罗丹明-6G的PBS。[1] 每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积，并使用半椭球体公式V = π/6 × L × W × H计算肿瘤体积，其中L为长度，W为宽度，H为高度。[1] 每周对动物进行临床状态（外观、精神状态、食欲、口渴、排尿、排便）、体重和肿瘤发展情况的评估。记录动物的存活情况，并在实验终点处处死动物以评估腹部转移情况。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收、分布和排泄
罗丹明6G具有很高的血浆蛋白结合率。据报道，在以1 mg/min的速度向犬（品系、年龄和性别未明确）静脉输注染料后，罗丹明6G和罗丹明B均可通过胰液在体内排泄，随后经促胰液素或胆囊收缩素刺激胰酶分泌。然而，排泄率尚未见报道。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外实验表明，浓度为 10⁻⁶ M 的罗丹明-6G 对正常对照细胞培养物无毒性，处理 5 天后，90-95% 的细胞存活。[1]
体内实验表明，健康（无肿瘤）小鼠皮下注射浓度分别为 10⁻⁸ M、10⁻⁷ M 和 10⁻⁶ M 的罗丹明-6G 后，未出现不良反应，且与未处理的健康对照组无差异。[1] 接受更高浓度罗丹明-6G（≥ 10⁻⁵ M）的健康小鼠表现出剂量依赖性的不良反应。接受最高剂量（每周两次，每次 10⁻³ M 和 10⁻² M）的动物在实验的前 3 周内（共 5 周）出现毒性反应。[1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
Ci 碱性红 1 是一种亮蓝粉色晶体或红紫色粉末。(NTP, 1992)
罗丹明 6G 是罗丹明 6G(1+)，一种有机氯盐和黄原酸染料。它用作荧光染料。 罗丹明 6G 是一种荧光有机染料，它与线粒体内膜结合，减少完整且具有代谢活性的线粒体数量，并抑制线粒体氧化磷酸化。这会破坏呼吸链，导致细胞死亡。[1] 低浓度罗丹明 6G 选择性抗肿瘤活性的机制被认为是基于瓦博格效应，即与正常细胞相比，恶性细胞每个细胞的线粒体数量减少，并且能量代谢发生改变（更多地依赖糖酵解）。有研究假设，破坏少量线粒体对于能量匮乏的肿瘤细胞至关重要，但对于线粒体储备较高的正常细胞则并非如此。[1] |
| 分子式 |
C28H31CLN2O3
|
|---|---|
| 分子量 |
479.0103
|
| 精确质量 |
478.202
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| CAS号 |
989-38-8
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| 相关CAS号 |
13161-28-9 (perchlorate);63022-06-0 (molbdosilicate);63022-07-1 (molybdophosphate);63022-08-2 (tungstophosphate);65366-87-2 (molybdate)
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| PubChem CID |
13806
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| 外观&性状 |
Light brown to red-brown solid powder
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| 密度 |
1.15g/cm3
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| 沸点 |
<200ºC
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| 熔点 |
290 °C
|
| 闪点 |
318.6ºC
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| 折射率 |
1.593
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| LogP |
7.225
|
| tPSA |
63.83
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
823
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
VYXSBFYARXAAKO-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C28H30N2O3.ClH/c1-6-29-23-15-25-21(13-17(23)4)27(19-11-9-10-12-20(19)28(31)32-8-3)22-14-18(5)24(30-7-2)16-26(22)33-25;/h9-16,29H,6-8H2,1-5H3;1H
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| 化学名 |
[9-(2-ethoxycarbonylphenyl)-6-(ethylamino)-2,7-dimethylxanthen-3-ylidene]-ethylazanium;chloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~25 mg/mL (~52.19 mM)
H2O : ~10 mg/mL (~20.88 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.22 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.22 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 4 mg/mL (8.35 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C). 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0876 mL | 10.4382 mL | 20.8764 mL | |
| 5 mM | 0.4175 mL | 2.0876 mL | 4.1753 mL | |
| 10 mM | 0.2088 mL | 1.0438 mL | 2.0876 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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