RMC-4550

别名: RMC-4550; RMC 4550; RMC4550

目录号: V5027 纯度: ≥98%

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RMC-4550 (RMC4550) 是一种新型、有效、选择性的 SHP2 磷酸酶变构抑制剂，具有抗癌活性。

RMC-4550 CAS号: 2172651-73-7
产品类别: SHP2

产品仅用于科学研究，不针对患者销售

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Nature 2025, 643(8070):192-200.

Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Science Adv 2025, 11(33):eadr5199.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

Immunity 2024,57:2651-2668.e12.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

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纯度: ≥98%

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产品描述
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化学信息
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产品描述

RMC-4550 (RMC4550) 是一种新型、有效、选择性的 SHP2 磷酸酶变构抑制剂，具有抗癌活性。它抑制 SHP2，IC50 为 0.583 nM。 RMC-4550 可作为高质量的工具化合物来研究 SHP2 在啮齿类动物体外和体内肿瘤生物学中的作用。 SHP2 是一个汇聚信号传导节点，抑制 SHP2 可有效靶向 RAS-MAPK 通路中的上游（RTK 驱动）和下游（RAS-GTP 依赖）突变。 RAS/RAF/MEK/ERK 通路的致癌改变可驱动多种癌症的生长。虽然 BRAF 和 MEK 抑制剂对 BRAFV600E 驱动的癌症有效，但对于大多数由其他途径改变驱动的癌症缺乏有效的靶向治疗，包括非 V600E 致癌 BRAF、RAS GTP 酶激活蛋白 (GAP) NF1（神经纤维蛋白 1）丢失和致癌性克拉斯。

生物活性&实验参考方法

靶点	SHP2 (IC50 = 0.583 nM) SHP2 phosphatase (PTPN11) [2] IC50 = 0.58 nM (against full-length SHP2 enzyme in a biochemical assay) [2]
体外研究 (In Vitro)	RMC-4550 在具有 pERK 读数的 PC9 细胞中表现出的细胞 IC50 为 39 nM，并且它抑制纯化的、活化的全长人 SHP2，IC50 为 1.55 nM。 RMC-4550 在浓度高达 10 µM 时，对 SHP2 的催化结构域、一组 468 种蛋白激酶和一组 14 种其他蛋白磷酸酶没有表现出明显的抑制活性。 RMC-4550 在肝细胞中具有高被动渗透性 (458 nm/s)、流出比为 1，以及低至中等的跨物种体外内在清除率 (3.6-24 µL/min/百万个细胞)[1]。 RMC-4550 强效且选择性地抑制全长SHP2酶的活性（IC50 = 0.58 nM），但在浓度高达10 μM时对分离的SHP2催化结构域无活性，证实了其变构机制。该化合物对包含15种其他磷酸酶、468种激酶和44种细胞靶点的筛选 panel 均显示出高选择性。 [2] 在使用3D增殖实验筛选的33个KRAS突变癌细胞系 panel 中，携带KRAS G12错义突变（尤其是G12C）的细胞系对 RMC-4550 敏感（IC50 < 2 μM）。例如，在NCI-H358（KRAS G12C）和MIA PaCa-2（KRAS G12C）细胞中，RMC-4550 抑制增殖（IC50 ~0.1-0.3 μM），降低细胞内的RAS-GTP水平，并减少磷酸化ERK（pERK）水平（pERK IC50 ~46-53 nM）。处理还能诱导NCI-H358球体中的caspase 3/7活化，表明其具有促凋亡效应。 [2] 在NF1功能缺失（NF1LOF）的肺腺癌细胞系H1838中，RMC-4550 抑制增殖（IC50 ~46 nM），降低RAS-GTP水平，并减少pERK水平（pERK IC50 ~4 nM）。 [2] 在具有第3类BRAF突变的细胞系（例如，H1666 BRAF G466V）中，RMC-4550 抑制RAS-GTP和pERK水平（H1666细胞中pERK IC50 ~9 nM），并抑制H1666细胞的增殖（IC50 ~236 nM）。相比之下，具有第1类（BRAF V600E，例如A-375）或第2类（例如NCI-H1755）BRAF突变的细胞系在高达10 μM的浓度下，对 RMC-4550 的增殖和信号传导抑制不敏感。 [2] 在作用机制上，表达组成型活性SOS1突变体（SOS-F）使HEK293细胞对 RMC-4550 介导的EGF刺激的pERK抑制不敏感，表明SHP2抑制作用于SOS1上游，破坏RAS-GTP负载。基因依赖性数据分析（Project DRIVE）显示PTPN11 (SHP2) 敲低与SOS1或GRB2敲低高度相关，支持它们在核心RAS调控模块中的功能关联。 [2]
体内研究 (In Vivo)	RMC-4550 的半衰期适合每天一次口服给药，并且具有中等到高的生物利用度。通过肿瘤中的磷酸 ERK 抑制来测量，RMC-4550 表现出剂量依赖性功效，与 EGFR 驱动的 KYSE-520 人食管癌异种移植模型中的靶标调节一致。在此模型中，RMC-4550 在剂量上表现出良好的耐受性，可实现最大和持续的功效 [1]。在免疫缺陷小鼠的NCI-H358（KRAS G12C）异种移植瘤模型中，每日口服给予 RMC-4550（3、10和30 mg/kg）产生剂量依赖性的肿瘤生长抑制（TGI分别为59%、53%和96%）。 [2] 在MIA PaCa-2（KRAS G12C）异种移植瘤模型中，每日口服给予 RMC-4550（10、30和60 mg/kg）产生显著的肿瘤生长抑制（TGI分别为74%、83%和93%）。 [2] 在NCI-H358异种移植瘤中的药效动力学研究表明，单次口服10 mg/kg RMC-4550 导致肿瘤pERK水平随时间被抑制，最大抑制出现在给药后2和8小时，24小时部分恢复。 [2]
酶活实验	进行了全长SHP2的生化抑制实验。使用源自GAB1的双磷酸化肽段激活酶。在96孔板中使用荧光底物DiFMUP监测催化活性。反应体系包含激活的SHP2、DiFMUP和系列稀释的 RMC-4550。动力学测量6分钟内荧光增加（激发340 nm，发射450 nm）以确定初始速率。拟合浓度-反应曲线以计算IC50值。针对分离的SHP2催化结构域的实验方法相同，只是省略了激活肽。 [2] 评估了磷酸酶选择性 panel。表达并纯化了12种蛋白酪氨酸磷酸酶和2种丝氨酸/苏氨酸磷酸酶（PP1, PP2A）。每种磷酸酶的抑制实验使用与SHP2实验相似的条件，但在酶浓度和反应时间上做了特异性调整。在室温孵育后以终点法读取荧光。 [2]
细胞实验	在补充有 0.1% 胎牛血清、0.02% 牛血清白蛋白和 1% 青霉素/链霉素的无生物素 RPMI 中，将每孔 30,000 个 HEK-293 细胞铺板于 96 孔板中。 SOS1 构建体的诱导是通过添加 0.1 μg/mL 强力霉素并等待一整天来实现的。将细胞用 RMC-4550 的三倍稀释液处理一小时，该溶液在补充有 1% 青霉素/链霉素和 0.02% 牛血清白蛋白（最终 DMSO 浓度等于 0.1%）的无生物素培养基中连续稀释。给药最后五分钟后，裂解细胞，用 50 ng/mL EGF 刺激，并检查其 ERK1/2 磷酸化。使用3D细胞增殖实验进行筛选。将细胞悬浮于0.65%甲基纤维素中接种于96孔板。次日，测量初始细胞活力。加入 RMC-4550 的系列稀释液，细胞培养七天。使用发光法细胞活力测定试剂测量活力。数据归一化至第0天和溶剂对照以计算IC50值。 [2] 使用基于珠子的免疫分析法进行ERK1/2磷酸化（pERK）分析。将细胞接种于96孔板过夜，然后在处理前进行1小时的血清饥饿。用 RMC-4550 处理1小时后裂解细胞，根据试剂盒方案测定pERK水平。 [2] 使用基于板式的ELISA试剂盒测量细胞RAS-GTP水平。用 RMC-4550 处理细胞1小时，然后裂解。裂解液与包被有Raf-1 RBD融合蛋白的孔板孵育以捕获RAS-GTP，然后用抗RAS抗体进行检测。 [2] 进行球体形成和增殖实验。将细胞接种于超低吸附圆底96孔板中，培养72小时形成球体。对形成的球体用 RMC-4550 处理五天，并使用发光法测定活力。 [2] 球体中活化Caspase 3/7测定：用 RMC-4550 或对照处理NCI-H358球体20小时。使用发光底物测量Caspase 3/7活性。 [2] 机制拯救实验：用 RMC-4550 处理可诱导表达野生型SOS1（SOS-WT）或组成型活性膜靶向突变体（SOS-F）的HEK293细胞1小时，在最后5分钟用EGF刺激，然后裂解进行pERK分析。 [2]
动物实验	Female (6-8 week old) athymic nude mice implanted with NCI-H358 (Balb/c strain background) or MIA PaCa-2 (NCR nude strain background) tumor cells subcutaneously in the flank 3-60 mg/kg PO For efficacy studies, female athymic nude mice (6-8 weeks old) were implanted subcutaneously with NCI-H358 or MIA PaCa-2 tumor cells. When tumors reached an average volume of ~200 mm³, mice were randomized into groups. RMC-4550 was dissolved in a vehicle composed of Captisol/50 mM acetate buffer pH 4.6 (10%/90%, w/v). The compound was administered daily via oral gavage at specified doses (3, 10, 30, 60 mg/kg). Tumor volumes were measured regularly. Animals were euthanized when the mean tumor volume in the control group reached ~1500 mm³ (day 25 for H358, day 22 for MIA PaCa-2). [2] For pharmacodynamics studies, mice bearing NCI-H358 xenografts received a single oral dose of RMC-4550 (10 mg/kg) or vehicle. Groups of mice were euthanized at 2, 8, or 24 hours post-dose. Tumors were collected, snap-frozen, and processed for protein extraction and Western blot analysis of pERK and total ERK. [2]
参考文献	[1]. Cancer Res (2018) 78 (13_Supplement): 4878. [2]. bioRxiv 188730.
其他信息	RMC-4550 is a novel, potent, and selective allosteric inhibitor of SHP2 (PTPN11). [2] It was identified through a biochemical and cellular screen followed by structure-guided medicinal chemistry optimization. [2] The compound is proposed as a targeted therapeutic strategy for cancers driven by nucleotide-cycling oncogenic RAS (e.g., KRAS G12C), RAS-GTP dependent oncogenic BRAF (class 3 mutants), or loss of the tumor suppressor NF1. These alterations are found in a significant subset of non-small cell lung cancer (NSCLC) and other tumors. [2] Mechanistically, SHP2 inhibition by RMC-4550 suppresses oncogenic signaling by disrupting the SHP2/SOS1/GRB2 module, thereby reducing GTP-loading of RAS and subsequent activation of the MAPK pathway (pERK). [2]

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

分子式	C21H26CL2N4O2
分子量	437.3627
精确质量	436.14
元素分析	C, 57.67; H, 5.99; Cl, 16.21; N, 12.81; O, 7.32
CAS号	2172651-73-7
相关CAS号	2172651-73-7
PubChem CID	134183206
外观&性状	White to light yellow solid powder
LogP	2.5
tPSA	84.5
氢键供体(HBD)数目	2
氢键受体(HBA)数目	6
可旋转键数目(RBC)	3
重原子数目	29
分子复杂度/Complexity	563
定义原子立体中心数目	2
SMILES	C[C@H]1[C@H](C2(CCN(CC2)C3=NC(=C(N=C3CO)C4=C(C(=CC=C4)Cl)Cl)C)CO1)N
InChi Key	IKUYEYLZXGGCRD-ORAYPTAESA-N
InChi Code	InChI=1S/C21H26Cl2N4O2/c1-12-18(14-4-3-5-15(22)17(14)23)26-16(10-28)20(25-12)27-8-6-21(7-9-27)11-29-13(2)19(21)24/h3-5,13,19,28H,6-11,24H2,1-2H3/t13-,19+/m0/s1
化学名	[3-[(3S,4S)-4-amino-3-methyl-2-oxa-8-azaspiro[4.5]decan-8-yl]-6-(2,3-dichlorophenyl)-5-methylpyrazin-2-yl]methanol
别名	RMC-4550; RMC 4550; RMC4550
HS Tariff Code	2934.99.9001
存储方式	Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month
运输条件	Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)	Ethanol: 22~100 mg/mL (50.3~228.6 mM) DMSO: ~11 mg/mL (~25.2 mM)
溶解度 (体内实验)	配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.72 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。配方 2 中的溶解度:* ≥ 2.5 mg/mL (5.72 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More* 配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.72 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

溶解度 (体外实验)

Ethanol: 22~100 mg/mL (50.3~228.6 mM)
DMSO: ~11 mg/mL (~25.2 mM)

溶解度 (体内实验)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.72 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.72 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.72 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

制备储备液		1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	2.2864 mL	11.4322 mL	22.8645 mL
	5 mM	0.4573 mL	2.2864 mL	4.5729 mL
	10 mM	0.2286 mL	1.1432 mL	2.2864 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。