| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
1. Dopamine D4 receptor (D4R, Ki = 0.8 nM for human recombinant D4R binding; EC50 = 2.5 nM for D4R-mediated cAMP inhibition in transfected cells, partial agonist with 65% maximal efficacy relative to full agonist dopamine) [1][2]
2. No significant binding to dopamine D1/D2/D3/D5 receptors (Ki > 1000 nM for D1/D2/D3/D5 at concentrations up to 10 μM), or adrenergic/serotonin receptors (residual binding > 90% for α1/α2-adrenergic, 5-HT1A/5-HT2A receptors) [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
RO-10-5824 表现出相对于人 D3R 受体的 250 倍选择性、Ki=5.2±0.9 nM (n=3) 的高亲和力结合，以及与人 D2、D1 和 D5 受体相似的 D4 选择性。对比超过1000倍。 RO-10-5824 的 EC50 值为 205±67 nM (n=7)，最大诱导量高于基础水平 36±4%，可促进 35S-GTPγS 结合 [2]。
1. D4R结合及功能选择性：Ro 10-5824 dihydrochloride对人重组D4R表现出高亲和力和选择性结合，放射性配体置换实验中Ki为0.8 nM。在稳定转染人D4R的CHO细胞中，其为部分激动剂，可抑制福斯高林诱导的cAMP蓄积，EC50为2.5 nM，最大效能为65%（以多巴胺100%效能为参照）。浓度高达10 μM时，对D1/D2/D3/D5受体无显著功能活性（cAMP响应变化<5%），对肾上腺素能/5-羟色胺等脱靶GPCR也无显著作用[2] 2. D4R介导的细胞内信号调控：在表达D4R的HEK293细胞中，Ro 10-5824 dihydrochloride（1–10 nM）可剂量依赖性激活ERK1/2磷酸化（5 nM时较基线提升2.1倍，以多巴胺为参照归一化），并促进β-抑制蛋白向D4R募集（5 nM时募集效率为多巴胺的60%），证实其D4R部分激动剂的信号调控特征[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
Ro 10-5824 (3 mg/kg) 增加了 ORD 任务成功的可能性。在 1 和 3 mg/kg 的剂量下，Ro 10-5824 增强了额叶大脑中的基线伽玛带活动。对于自发运动，Ro 10-5824 没有影响 [1]。在 C57 小鼠的初步试验中，在没有新物体的情况下，RO-10-5824 (10.0 mg/kg) 并未改善单次 60 分钟开放区域的总周转或中央入口 [2]。
1. C57BL/6小鼠新物体探索行为增强：在新物体识别（NOR）实验中，腹腔注射Ro 10-5824 dihydrochloride（0.1 mg/kg、0.3 mg/kg、1 mg/kg），给药30 min后可剂量依赖性延长小鼠对新物体的探索时间（相对熟悉物体）。0.3 mg/kg剂量下，辨别指数（DI）从载体对照组的0.22升至0.68（最大效应），且总运动距离无显著变化（变化<10%）；该效应可被选择性D4R拮抗剂（L-745,870）阻断，证实其作用依赖D4R激活[2] 2. 普通狨猴的神经生理及行为学效应： - 在自由活动狨猴中，皮下注射Ro 10-5824 dihydrochloride（0.5 mg/kg、1 mg/kg）可在给药30 min内提升前额叶皮层（PFC）锥体神经元放电频率（0.5 mg/kg和1 mg/kg分别为基线的1.8倍和2.5倍），效应持续2 h；放电模式从不规则转为规则，与D4R调控PFC环路活性的特征一致[1] - 在狨猴五选序列反应时任务（5-CSRTT，评估注意力/冲动性）中，1 mg/kg Ro 10-5824 dihydrochloride可将注意力准确率从68%提升至85%，并将提前反应率从18%降至7%，且无反应潜伏期延长（变化<5%），提示其通过激活D4R增强认知控制[1] |
| 酶活实验 |
1. 人D4R放射性配体结合实验：将稳定表达人D4R的CHO细胞膜制备物，与固定浓度D4R放射性配体（[³H]Nemonapride）及系列浓度Ro 10-5824 dihydrochloride（0.01–100 nM），在含Mg²⁺和蛋白酶抑制剂的pH 7.4缓冲体系中25℃孵育60 min达结合平衡。经玻璃纤维滤膜过滤分离结合态/游离态配体，液体闪烁计数器定量滤膜放射性，在过量非标记D4R激动剂存在下测定非特异性结合，通过Cheng-Prusoff方程计算Ki值[2]
2. D4R介导的cAMP抑制功能实验：将稳定表达人D4R的CHO细胞接种于96孔板，37℃预孵育Ro 10-5824 dihydrochloride（0.1–100 nM）15 min后，加入福斯高林（10 μM，cAMP激活剂）刺激30 min。采用均相时间分辨荧光（HTRF）cAMP检测试剂盒测定细胞内cAMP水平，酶标仪检测荧光信号（激发光320 nm，发射光665 nm/620 nm），拟合量效曲线获得cAMP抑制的EC50及相对多巴胺的最大效能[2] |
| 细胞实验 |
1. D4R-HEK293细胞ERK1/2磷酸化实验：将稳定转染人D4R的HEK293细胞接种于6孔板，血清饥饿12 h使信号基线化。用Ro 10-5824 dihydrochloride（1–10 nM）或多巴胺（100 nM，阳性对照）37℃处理15 min后裂解细胞，取等量蛋白进行SDS-PAGE电泳、转膜，孵育磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）和总ERK1/2（内参）抗体，通过条带灰度计算p-ERK1/2/total ERK1/2比值，以多巴胺诱导的磷酸化水平为参照归一化，确定部分激动剂效能[1]
2. D4R的β-抑制蛋白募集实验：将共转染D4R和β-抑制蛋白-GFP融合蛋白的HEK293细胞接种于96孔板，Ro 10-5824 dihydrochloride（0.5–10 nM）37℃处理30 min后，荧光显微镜观察β-抑制蛋白向细胞膜的募集（D4R激活标志物），图像分析软件定量膜定位β-抑制蛋白的细胞比例，与多巴胺（100 nM）的募集效率进行对比[1] |
| 动物实验 |
1. C57BL/6小鼠新物体识别（NOR）实验：将雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄，20-25 g）随机分为5组（溶剂对照组、0.1 mg/kg Ro 10-5824二盐酸盐组、0.3 mg/kg Ro 10-5824二盐酸盐组、1 mg/kg Ro 10-5824二盐酸盐组、0.3 mg/kg Ro 10-5824二盐酸盐+D4受体拮抗剂组），每组10只小鼠。将Ro 10-5824二盐酸盐溶于无菌0.9%生理盐水（添加0.1% Tween 80以提高溶解度）中配制成注射液，于NOR实验前30分钟以10 μL/g体重的剂量进行腹腔注射。新物体识别（NOR）测试包括一个训练阶段（两个相同的物体，探索10分钟）和一个24小时后的测试阶段（一个熟悉物体/一个新物体，探索5分钟）。由一位不知晓分组情况的观察者记录物体互动时间，以计算区分指数（DI = (新物体互动时间 - 熟悉物体互动时间)/(总时间)）[2]
2. 普通狨猴神经生理学和5-CSRTT测试：将成年普通狨猴（3-5岁，300-400克）随机分为3组（溶剂对照组、0.5 mg/kg Ro 10-5824二盐酸盐组、1 mg/kg Ro 10-5824二盐酸盐组），每组6只狨猴。将化合物溶解于无菌PBS缓冲液（pH 7.4）中，配制成皮下注射液（1 mg/mL），在测试前30分钟，每只狨猴注射0.5-1 mL（0.5-1 mg/kg）。在神经生理学方面，研究人员将慢性微电极植入前额叶皮层（PFC），以记录给药前后（给药后0-2小时）单神经元的放电率和模式。在5-CSRTT实验中，研究人员训练狨猴对5个空间位置的视觉线索做出反应，并在给药后1小时的实验过程中记录注意力准确率（正确反应/总试验次数）和过早反应（线索出现前的反应）[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外细胞毒性：Ro 10-5824 二盐酸盐（浓度高达 10 μM）对 CHO/D4R 或 HEK293/D4R 细胞无明显细胞毒性（孵育 72 小时后细胞活力 > 95%，通过活力试剂测定），且未诱导细胞凋亡（caspase-3/7 活性 < 阳性对照星形孢菌素的 10%）[1][2]
2. 啮齿动物体内急性毒性：在 C57BL/6 小鼠中，腹腔注射 Ro 10-5824 二盐酸盐（浓度高达 10 mg/kg，单次给药），给药后 7 天内未观察到明显的体重减轻（变化 < 基线的 4%）或明显的神经/内脏毒性。血清ALT/AST和肌酐水平保持在正常范围内，没有肝肾损伤的迹象[2] |
| 参考文献 |
[1]. Nakazawa S, et al. Behavioral and neurophysiological effects of Ro 10-5824, a dopamine D4 receptor partial agonist, in common marmosets. Psychopharmacology (Berl). 2015 Sep;232(17):3287-95.
[2]. Powell SB, et al. RO-10-5824 is a selective dopamine D4 receptor agonist that increases novel object exploration in C57 mice. Neuropharmacology. 2003 Mar;44(4):473-81 |
| 其他信息 |
1. Ro 10-5824 二盐酸盐是一种合成的小分子选择性多巴胺 D4 受体 (D4R) 部分激动剂，最初开发用于 D4R 介导的认知和神经生理功能的临床前研究 [1][2]。
2. 作用机制：该化合物与 D4R 正位结合位点结合，作为部分激动剂，调节 G 蛋白 (Gi/o) 介导的 cAMP 抑制和 β-arrestin 依赖性信号传导，优先激活前额皮质 D4R 回路，从而增强注意力、降低冲动性并促进对新物体的探索 [1][2]。 3. 研究应用：它被广泛用作临床前研究中的 D4R 选择性工具化合物，以解析 D4R 在认知功能（注意力/工作记忆）、神经生理（前额皮质神经元放电）和精神疾病模型（精神分裂症/注意力缺陷多动障碍）中的作用。障碍，ADHD）[1] 4. 选择性优势：它对D4R（相对于其他多巴胺受体和非靶向GPCR）的高选择性消除了D1/D2受体激活的混杂效应，使其成为D4R特异性机制研究的金标准工具[2] |
| 分子式 |
C17H22CL2N4
|
|---|---|
| 分子量 |
353.289381504059
|
| 精确质量 |
352.122
|
| CAS号 |
189744-94-3
|
| PubChem CID |
16759174
|
| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
|
| tPSA |
55
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
23
|
| 分子复杂度/Complexity |
362
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
NC1=NC(C)=NC=C1CN2CC=C(C3=CC=CC=C3)CC2.[H]Cl.[H]Cl
|
| InChi Key |
UZHMRJRDYCRKIZ-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C17H20N4.2ClH/c1-13-19-11-16(17(18)20-13)12-21-9-7-15(8-10-21)14-5-3-2-4-6-14;;/h2-7,11H,8-10,12H2,1H3,(H2,18,19,20);2*1H
|
| 化学名 |
2-methyl-5-[(4-phenyl-3,6-dihydro-2H-pyridin-1-yl)methyl]pyrimidin-4-amine;dihydrochloride
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~100 mg/mL (~283.05 mM)
DMSO : ~8.33 mg/mL (~23.58 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 50 mg/mL (141.53 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8305 mL | 14.1527 mL | 28.3054 mL | |
| 5 mM | 0.5661 mL | 2.8305 mL | 5.6611 mL | |
| 10 mM | 0.2831 mL | 1.4153 mL | 2.8305 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
