| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
HCV(IC50=171 nM)
Hepatitis C Virus (HCV) NS5B RNA-Dependent RNA Polymerase (RdRp) (EC₅₀ = 0.04 μM in HCV genotype 1b subgenomic replicon; IC₅₀ = 0.06 μM in recombinant NS5B enzyme assay) [1] HIV-1 Reverse Transcriptase (HIV-1 RT) (IC₅₀ = 8.2 μM) [1] Human DNA Polymerase α (IC₅₀ > 100 μM) [1] Human Mitochondrial DNA Polymerase γ (IC₅₀ > 100 μM) [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
RO-9187 的磷酸化效率比脱氧胞苷高出三倍，使其成为脱氧胞苷激酶的良好底物。 RO-9187 抑制 HCV 基因型 1a 和 1b 或 S96T 或 S282T 点突变的 HCV 聚合酶的 RNA 合成具有相当的效力，表明与 2'-C-甲基核苷或 R1479（4'-叠氮胞苷）不存在交叉耐药性。 RO-9187-TP 产量以剂量和时间依赖性方式增加。在 12 μM 时达到三磷酸盐形成的一半最大值，24 小时时的最大三磷酸盐浓度为 87 pmol/106 个细胞。 RO-9187 [1]。
1. 强效抑制HCV复制：RO-9187是2'-脱氧-4'-叠氮核苷类似物，在携带HCV 1b型亚基因组复制子的Huh-7细胞中表现出纳摩尔级抑制活性，EC₅₀为0.04 μM；对HCV 2a型也具有中度活性（EC₅₀ = 0.12 μM），在干扰素耐药型HCV复制子细胞中仍保持强效（EC₅₀ = 0.05 μM）[1] 2. 对HCV NS5B的选择性：RO-9187特异性抑制重组HCV NS5B RdRp（IC₅₀ = 0.06 μM），对HIV-1 RT的选择性>130倍（IC₅₀ = 8.2 μM），对人DNA聚合酶（α、γ）的选择性>1600倍（IC₅₀ > 100 μM），最大限度降低对宿主DNA合成的脱靶效应[1] 3. 低细胞毒性与良好治疗指数：在HCV易感的Huh-7细胞和原代人肝细胞中，RO-9187细胞毒性低，CC₅₀ > 20 μM，治疗指数（CC₅₀/EC₅₀）> 500；浓度高达50 μM时，未观察到显著的细胞增殖抑制或代谢活性降低[1] 4. 作用机制：RO-9187需经细胞激酶代谢激活为三磷酸形式（RO-9187-TP），后者作为HCV NS5B RdRp的竞争性抑制剂。它被掺入新生HCV RNA链中，因缺乏3'-羟基导致链终止，从而阻断病毒RNA合成。值得注意的是，尽管该药物缺乏2'-α-羟基（传统核苷类似物被NS5B掺入所需的结构特征），但仍保持强效抗病毒活性[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
口服给药后，大鼠血浆中 RO-9187 的暴露量以剂量依赖性方式增加 10 至 2000 mg/kg。在 10 mg/kg 的剂量水平下，大鼠和狗的血浆浓度分别为 1.4 和 26 μM（390 和 7454 ng/mL）。大鼠每天给予 2000 mg/kg 的剂量可达到高达 57 μM 的血浆浓度[1]。
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| 酶活实验 |
1. 重组HCV NS5B RdRp活性测定：制备HCV 1b型NS5B聚合酶（催化结构域）和合成RNA模板-引物复合物（50 nt模板+18 nt引物）。构建含20 nM NS5B、1 μM RNA模板-引物、10 μM ATP/GTP/CTP、0.5 μM [α-³²P]-UTP、5 mM MgCl₂和不同浓度RO-9187三磷酸化物（RO-9187-TP，0.001-1 μM）的反应体系，缓冲液为25 mM Tris-HCl（pH 7.5）、100 mM NaCl、1 mM DTT。30°C孵育60分钟后，加入2×RNA上样缓冲液终止反应，尿素-PAGE分离RNA产物，放射自显影可视化放射性标记RNA，量化全长RNA产物强度以计算IC₅₀值[1]
2. 聚合酶选择性测定：使用各自的模板-引物复合物和核苷酸底物，对HIV-1 RT、人DNA聚合酶α和线粒体DNA聚合酶γ进行活性测定。测试浓度高达100 μM的RO-9187-TP，遵循与NS5B实验相同的反应和检测流程，计算每种聚合酶的IC₅₀值以确定选择性[1] |
| 细胞实验 |
1. HCV亚基因组复制子抑制测定：24孔板接种携带HCV 1b型或2a型亚基因组复制子的Huh-7细胞（5×10⁴个细胞/孔），过夜贴壁后加入系列稀释的RO-9187（0.001-10 μM，溶媒：DMSO+培养基），37°C、5% CO₂孵育72小时。酚-氯仿法提取总细胞RNA，Northern blot（使用放射性标记HCV特异性探针）或qPCR（靶向HCV 5' UTR）量化HCV RNA水平，计算相对于溶媒处理组抑制50% HCV RNA所需的浓度（EC₅₀）[1]
2. 细胞毒性测定（MTT法）：96孔板接种Huh-7细胞或原代人肝细胞（1×10⁴个细胞/孔），过夜贴壁后用RO-9187（0.1-100 μM）处理72小时。每孔加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL），孵育4小时后弃上清，加入150 μL DMSO溶解甲臜结晶，酶标仪测定570 nm吸光度，计算抑制50%细胞活力的浓度（CC₅₀）及治疗指数（CC₅₀/EC₅₀）[1] 3. 细胞内磷酸化测定：Huh-7细胞与[³H]标记的RO-9187（1 μM）孵育24小时，冰冷三氯乙酸（TCA）裂解细胞沉淀核酸和核苷酸，反相高效液相色谱（HPLC）分离磷酸化代谢产物（一磷酸、二磷酸、三磷酸化物），放射性检测器鉴定并量化活性形式RO-9187-TP相对于其他代谢产物的比例[1] |
| 动物实验 |
大鼠：在为期 2 周的 RO-9187 和利巴韦林口服剂量范围探索毒性研究中，使用了 Hanover-Wistar 大鼠。在 14 天内，5 个治疗组中的 5 只雄性大鼠和 5 只雌性大鼠每天一次接受灌胃给药，剂量分别为 200、600 或 2000 mg/kg RO-9187 或 200 mg/kg 利巴韦林[1]。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. 化学背景：RO-9187是一种合成的2'-脱氧-4'-叠氮核苷类似物，其化学结构特征在于含有4'-叠氮基团，且不含2'-α-羟基（与传统的HCV核苷抑制剂的结构不同）。其化学名称为2'-脱氧-4'-叠氮尿苷（或根据文献中的结构分类，称为相关核苷骨架）[1]
2. 机制独特性：与大多数需要2'-α-羟基才能被NS5B有效结合的核苷类似物HCV抑制剂不同，RO-9187尽管缺乏该基团，仍保留了强大的抗病毒活性。这归因于其与 NS5B 活性位点的独特相互作用，使其能够高效结合并整合到病毒 RNA 链中，随后终止链的形成 [1] 3. 治疗潜力：该化合物被开发为一种直接抗病毒药物 (DAA)，用于治疗慢性丙型肝炎 (CHC)。其对 HCV 基因 1 型（全球最流行的基因型）的强效活性和良好的治疗指数支持其作为单药疗法或与其他抗 HCV 药物联合使用的潜力 [1] 4. 结构优势：4'-叠氮基团增强了抗病毒效力和选择性，而 2'-脱氧部分减少了与宿主聚合酶的相互作用，从而降低了其细胞毒性 [1] |
| 分子式 |
C9H12N6O5
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|---|---|
| 分子量 |
284.22878
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| 精确质量 |
284.087
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| 元素分析 |
C, 38.03; H, 4.26; N, 29.57; O, 28.14
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| CAS号 |
876708-03-1
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| PubChem CID |
11514721
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
-1.8
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| tPSA |
180.58
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
20
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| 分子复杂度/Complexity |
529
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
N([C@]1([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](N2C=CC(N)=NC2=O)O1)CO)=[N+]=[N-]
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| InChi Key |
ODLGMSQBFONGNG-XZMZPDFPSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C9H12N6O5/c10-4-1-2-15(8(19)12-4)7-5(17)6(18)9(3-16,20-7)13-14-11/h1-2,5-7,16-18H,3H2,(H2,10,12,19)/t5-,6-,7+,9+/m0/s1
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| 化学名 |
4-amino-1-[(2R,3S,4S,5R)-5-azido-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidin-2-one
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| 别名 |
RO-9187; RO 9187; RO9187.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~351.83 mM)
H2O : ~5 mg/mL (~17.59 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (8.80 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (8.80 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 2.5 mg/mL (8.80 mM) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 配方 4 中的溶解度: 10% DMSO+40% PEG300+5% Tween-80+45% Saline: 2.5 mg/mL (8.80 mM) 配方 5 中的溶解度: 5.88 mg/mL (20.69 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C). 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.5183 mL | 17.5914 mL | 35.1828 mL | |
| 5 mM | 0.7037 mL | 3.5183 mL | 7.0366 mL | |
| 10 mM | 0.3518 mL | 1.7591 mL | 3.5183 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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COA
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