| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Cx43 (connexin 43) – no IC50, Ki, EC50, or DC50 values are reported in these two papers. The cellular target molecule for Rotigaptide is unknown; however, it prevents dephosphorylation of Ser297 and Ser368 on Cx43 during ischaemia. [2][3]
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在培养的新生儿心室肌细胞中，罗加肽（100 nM；24 小时）对环己酰亚胺介导的 Cx43 蛋白水平降低有积极影响[1]。罗替加肽（100 nM；24 小时）本身对 INS-1 细胞的凋亡没有影响。当IL-1β浓度高于15 pg/ml时，在胰岛素分泌型大鼠INS-1细胞中，细胞因子暴露可显著降低细胞凋亡约10%[2]。
Rotigaptide (1-1000 nM) 处理24小时后，在培养的新生大鼠心室肌细胞中可剂量依赖性地增加Cx43蛋白的表达，在100 nM时达到最大值，增加3倍（通过使用C8093抗体的定量Western blot分析测定，并以p70内参进行标准化）。20 mM LiCl处理作为阳性对照。 [2] 使用 C6219 抗体进行免疫细胞化学染色显示，100 nM 的 Rotigaptide 显著增强了 Cx43 的免疫反应性（半定量荧光分析显示增强 9 倍），并在细胞间边界处增加了 Cx43 阳性间隙连接斑块。[2] 在环己酰亚胺 (10 μg/ml) 存在下，Cx43 蛋白水平降低至溶剂对照组的 39%；与 100 nM 的 Rotigaptide 共同处理后，Cx43 水平降低至溶剂对照组的 56%，表明 Rotigaptide 对 Cx43 表达的影响部分是由于其生物合成增加所致。 [2] Rotigaptide (50 nM, 5 h) 可使表达 Cx43-GFP 的 HeLa 细胞的 GJIC 增加 40%，在新生大鼠心肌细胞和 HL-1 心房细胞中也观察到类似结果。在表达 Cx32 或 Cx26 的 HeLa 细胞中未观察到此效应。[3] Rotigaptide 可刺激 HeLa-Cx43 细胞中的 PKC 活性，该作用可被选择性 PKC-α 抑制剂 CGP54345 阻断。[3] 在离体灌注大鼠心脏中，Rotigaptide 显著延长了缺血诱导的心搏停止时间，并在缺血 30 分钟时抑制了 Ser297 和 Ser368 的去磷酸化，该结果通过质谱（MALDI 和 LC-ESI-MS/MS）磷酸化分析在 Cx43 上测定。 [3] 在对离体豚鼠心肌细胞进行的双细胞膜片钳研究中，罗替加肽(Rotigaptide)增加了间隙连接电导，而不影响膜电导。[3] 在代谢应激（缺氧+葡萄糖剥夺）下的离体大鼠心房条带中，罗替加肽(Rotigaptide)以浓度依赖的方式预防和逆转应激诱导的心房传导减慢，呈钟形剂量反应曲线（在10-100 nM浓度下疗效最佳）。[3] 在酸中毒（pH 6.0）下的离体兔心脏中，罗替加肽(Rotigaptide)显著降低了激活-恢复间期离散度的增加，并抑制了纵向和横向的传导减慢（横向作用最为显著，降低约60%）。[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
对小鼠和大鼠静脉注射罗替加肽（300 mg/kg；单次剂量）未观察到任何毒性作用。在剂量递增研究中，大鼠（100 mg/kg）和犬（10 mg/kg）对持续静脉输注罗替加肽5-14天的反应良好。此外，未观察到与化合物相关的副作用或毒理学或组织学结果[3]。在左前降支结扎后的开胸犬中，罗替加肽（血浆浓度约为1、8和70 nM）能够高重复性地预防折返性室性心动过速（VT）的发生（生理盐水处理组约为90%；所有剂量的罗替加肽均能有效预防折返性VT）。预防作用与功能性单向传导阻滞的逆转相关。罗替加肽未能预防局灶性室性心动过速/室颤（13例患者中有11例在罗替加肽治疗后出现局灶性室性心动过速/室颤，而14例患者中有13例出现局灶性室性心动过速/室颤），提示间隙连接细胞间通讯在局灶性心律失常中作用较小。[3] 在接受1小时左旋支结扎后4小时再灌注的开胸犬模型中，罗替加肽（再灌注前10分钟给药）显著抑制了室性早搏和室性心动过速，最高剂量下最大抑制率约为95%（P<0.05）。[3] 在犬缺血/再灌注模型和大鼠慢性缺血模型中，罗替加肽（30 mg/kg/天，连续14天）显著缩小了心肌梗死后的梗死面积。 [3]在犬房颤模型中，罗替加肽（血浆浓度100 nM）在慢性二尖瓣反流诱发的心房扩张中显示出显著的抗心律失常作用（心房传导速度增加42%），并在选择性心房缺血模型中完全阻止了缺血诱发的房颤持续时间延长。在心房和心室快速起搏模型中，罗替加肽可增加心房传导速度（5-10%），但无抗心律失常作用。[3]
|
| 细胞实验 |
Western Blot 分析[1]
细胞类型： 新生儿心肌细胞 测试浓度： 100 nM 孵育时间： 24 小时 实验结果： 部分阻止新生儿心肌细胞中 Cx43 蛋白表达的丧失。 细胞凋亡分析[2] 细胞类型： Cx43 缺陷型 INS-1 细胞 测试浓度： 100 nM 孵育时间： 24 小时 实验结果： 细胞因子诱导的细胞凋亡得到改善，线粒体功能得到改善。 新生大鼠心室肌细胞培养：取 Sprague-Dawley 新生大鼠心脏，用胰蛋白酶和胶原酶消化，以 65,000-125,000 个细胞/cm² 的密度接种于胶原蛋白包被的培养板上，并在添加了 Earle 氏盐、谷氨酰胺、青霉素/链霉素、维生素 B12、10% 马血清和 5% 胎牛血清的 MEM 培养基中培养。小牛血清。第5天，细胞接受Rotigaptide（1-1000 nM）或20 mM LiCl处理24小时。为抑制蛋白质合成，使用溶于17 mM乙醇的10 μg/ml环己酰亚胺，并分别加入或不加入100 nM Rotigaptide。Western blot：细胞用RIPA缓冲液裂解，通过DC蛋白测定法测定蛋白含量，样品变性后进行10% NuPAGE凝胶电泳，转移至硝酸纤维素膜，用酪蛋白缓冲液封闭，与抗Cx43抗体C8093（1:40,000）、生物素标记的二抗和链霉亲和素-HRP孵育；用SuperSignal Femto化学发光检测；Cx43条带以p70内参进行标准化。免疫荧光：细胞用4%多聚甲醛固定，0.1% Triton透化，10%正常山羊血清封闭，与兔抗Cx43 C6219（1:400）和Alexa568标记的二抗孵育，在荧光显微镜下成像；荧光强度进行半定量分析。[2] 双细胞膜片钳：分离豚鼠心肌细胞，用于测量Rotigaptide处理前后间隙连接电导和膜电导。[3] 染料转移实验：将荧光染料显微注射到表达Cx43-GFP、Cx32-GFP或Cx26的大鼠新生心肌细胞、HL-1细胞和HeLa细胞中；Rotigaptide（50 nM，5 h）仅增加表达Cx43细胞的染料转移。 [3] 质谱磷酸化分析：从离体灌注的大鼠心脏中纯化Cx43，这些心脏在有或无Rotigaptide处理的情况下经历了全身缺血；使用MALDI和LC-ESI-MS/MS鉴定磷酸化位点；鉴定出13个丝氨酸磷酸化位点；Rotigaptide抑制了缺血期间Ser297和Ser368的去磷酸化。[3] PKC活性测定：用Rotigaptide或AAP10处理HeLa-Cx43细胞；测定PKC活性，并评估PKC-α抑制剂CGP54345的阻断作用。[3] 离体大鼠心房条：在有或无Rotigaptide（浓度范围1 nM至1 μM）的情况下，对心房进行代谢应激（缺氧+葡萄糖剥夺）；测量传导速度；对预防和逆转传导减慢均进行了评估。[3] |
| 动物实验 |
在动物模型中，罗替加肽通过静脉推注或持续静脉输注给药。剂量和给药途径因物种和模型而异：在犬室性心动过速（VT）模型中，使用的剂量可使血浆浓度达到约1、8和70 nM；在再灌注研究中，罗替加肽在再灌注前10分钟给药；在梗死面积研究中，剂量范围从1 ng/kg推注+10 ng/kg/hr输注到1000 ng/kg推注+10 ng/kg/hr静脉输注。[3]
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
动物静脉注射药代动力学：在小鼠、大鼠和犬中，罗替加肽 具有中等的全身清除率 (CLT)，为 0.226 至 0.981 L/hr/kg；稳态分布容积 (Vdss) 较低，为 0.175 至 0.306 L/kg；表观半衰期 (t1/2) 较短，为 0.29 至 0.9 小时。在大鼠中：CLT 约为 121 ml/min/kg，Vd 约为 90 ml/kg，t1/2 约为 16 分钟。在犬中：CLT 约为 42 ml/min/kg，Vd 约为 37 ml/kg，t1/2 约为 4.3 分钟。暴露量随剂量增加呈剂量比例增加。约 93% 的六肽以完整肽的形式经尿液排出；在肝微粒体或肝细胞中未观察到代谢物。不抑制细胞色素P450同工酶。[3]
人体药代动力学（I期）：健康志愿者静脉推注：CLT为133 ml/min，Vdss为21.4 L，t1/2为2.7 hr。持续静脉输注：AUCss与预测值一致，并呈剂量比例增加。61-84%的注射罗替加肽以原形经尿液排出；血浆中未检测到代谢物。[3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
临床前毒理学：单次静脉推注：在大鼠中，100 mg/kg 剂量的罗替加肽耐受性良好；在犬中，10 mg/kg 剂量的罗替加肽耐受性良好；在大鼠和小鼠中，剂量高达 300 mg/kg 时未见毒性。重复给药（5-14 天持续静脉输注）：在大鼠中，每日剂量高达 100 mg/kg，持续 14 天的耐受性良好；在犬中，每日剂量高达 10 mg/kg，持续 14 天的耐受性良好；未见化合物相关不良反应。在细菌回复突变试验、染色体畸变试验和小鼠微核试验中均未发现遗传毒性。[3]
心血管安全性：在植入遥测装置的犬中，罗替加肽（静脉推注，10 mg/kg）对动脉血压、心率或心电图（PR、QRS、QT）无影响；未见致心律失常作用。此剂量下的血浆浓度约为 47,674 ng/ml（约为犬室性心动过速模型中最低有效浓度的 77,267 倍）。对兔 Langendorff 心脏的动作电位时程 (APD) 或有效不应期 (ERP) 无影响；对豚鼠心脏的静息膜电位或动作电位幅度无影响；膜片钳研究中未观察到 hERG 通道阻滞。[3] 临床安全性（I 期）：在 I 期试验中，约 200 名健康志愿者未观察到与药物相关的不良反应或药物相互作用。单次递增剂量（0.03-30 mg 静脉输注；2-3 mg 静脉推注）、持续输注（1-20 mg/天，持续 6 天）以及与地高辛和阿替洛尔的药物相互作用研究均未显示安全性问题。[3] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Rotigaptide 是一种肽类药物。目前，Rotigaptide 正处于与心血管疾病相关的基础科学研究阶段。
Rotigaptide（Ac-D-Tyr-D-Pro-D-Hyp-Gly-D-Ala-Gly-NH₂）是一种稳定的六肽抗心律失常肽，由 AAP10 类似物经旋转反转改造而成，并引入非天然 D-氨基酸以提高其蛋白水解稳定性（体外在人血浆中的半衰期为 14 天）。该化合物具有很高的水溶性。[3] 作用机制：通过连接蛋白 43 (Cx43) 增强间隙连接细胞间通讯 (GJIC)，而不影响膜电流。它能阻止缺血诱导的 Cx43 在 Ser297 和 Ser368 位点的去磷酸化，这两个位点被认为对缺血期间 Cx43 间隙连接通道的门控至关重要。其细胞靶分子尚不明确；信号传导可能涉及G蛋白依赖性膜受体和PKC-α激活，因为AAP10介导的作用可被GDP-βS、PKC抑制剂和PKC-α特异性抑制剂阻断。[3] 疗效概况：可预防犬急性心肌缺血期间的折返性室性心动过速；预防再灌注心律失常；缩小梗死面积；预防缺血诱发的心房颤动；在慢性容量负荷过重模型中增加心房传导。对局灶性心律失常无影响。在某些模型中呈钟形剂量反应关系。[3] 临床开发：已完成约200名健康志愿者的I期临床试验，未观察到药物相关不良反应。于2005年6月启动了急性冠脉综合征患者的II期临床试验。该化合物正在开发用于预防心肌梗死患者危及生命的折返性室性心动过速/室颤。[3] |
| 分子式 |
C28H39N7O9
|
|---|---|
| 分子量 |
617.650766611099
|
| 精确质量 |
617.28
|
| CAS号 |
355151-12-1
|
| PubChem CID |
9938933
|
| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
1187.3±65.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
671.8±34.3 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.3 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.607
|
| LogP |
-3.53
|
| tPSA |
241
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
7
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
9
|
| 可旋转键数目(RBC) |
12
|
| 重原子数目 |
44
|
| 分子复杂度/Complexity |
1110
|
| 定义原子立体中心数目 |
5
|
| SMILES |
O[C@@H]1CN(C([C@H]2CCCN2C([C@@H](CC2C=CC(=CC=2)O)NC(C)=O)=O)=O)[C@@H](C(NCC(N[C@@H](C(NCC(N)=O)=O)C)=O)=O)C1
|
| InChi Key |
GFJRASPBQLDRRY-TWTQBQJDSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C28H39N7O9/c1-15(25(41)30-12-23(29)39)32-24(40)13-31-26(42)22-11-19(38)14-35(22)28(44)21-4-3-9-34(21)27(43)20(33-16(2)36)10-17-5-7-18(37)8-6-17/h5-8,15,19-22,37-38H,3-4,9-14H2,1-2H3,(H2,29,39)(H,30,41)(H,31,42)(H,32,40)(H,33,36)/t15-,19+,20-,21-,22-/m1/s1
|
| 化学名 |
(2R,4S)-1-[(2R)-1-[(2R)-2-acetamido-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]-N-[2-[[(2R)-1-[(2-amino-2-oxoethyl)amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]-4-hydroxypyrrolidine-2-carboxamide
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~200 mg/mL (~323.81 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (8.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 50.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (8.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 50.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (8.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6190 mL | 8.0952 mL | 16.1904 mL | |
| 5 mM | 0.3238 mL | 1.6190 mL | 3.2381 mL | |
| 10 mM | 0.1619 mL | 0.8095 mL | 1.6190 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT00901563 | COMPLETED | Drug: Rotigaptide Other: Forearm vascular study |
Heart Disease Vascular Disease |
University of Edinburgh | 2009-03 | Not Applicable |
| NCT00137332 | TERMINATED | Drug: GAP-486 (ZP-123) Drug: 0.9% Sodium Chloride, USP |
Arrhythmia | Wyeth is now a wholly owned subsidiary of Pfizer | 2005-11 | Phase 2 |
| NCT00137293 | TERMINATED | Drug: GAP-486 (ZP-123) Drug: 0.9% Sodium Chloride, USP |
Arrhythmia | Wyeth is now a wholly owned subsidiary of Pfizer | 2005-11 | Phase 2 |
|
|
|
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
