| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The target of Saikosaponin B1 is the Hedgehog signaling pathway, with key regulatory proteins including Smoothened (Smo) and Glioma-associated oncogene 1 (Gli1) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
1. 抗增殖活性:柴胡皂苷B1可抑制髓母细胞瘤细胞系(Daoy、UW228-3)的增殖。在5 μM和10 μM浓度下,其能显著降低Daoy细胞活力,抑制效果呈浓度依赖性 [1]
2. Hedgehog信号通路调控:Western blot检测显示,柴胡皂苷B1(5 μM、10 μM)可下调Daoy细胞中Smo和Gli1的蛋白表达水平,同时上调Hedgehog通路负调控因子Patched 1(Ptch1)的表达[1] 3. 诱导凋亡:流式细胞术(Annexin V-FITC/PI双染)结果显示,柴胡皂苷B1(10 μM)处理后,Daoy细胞的凋亡率较对照组显著升高[1] 4. 克隆形成抑制:柴胡皂苷B1(2.5 μM、5 μM、10 μM)可剂量依赖性地减少Daoy细胞形成的克隆数量和大小[1] 5. 实时定量PCR(qPCR):柴胡皂苷B1(5 μM、10 μM)处理可降低Daoy细胞中Gli1和Smo的mRNA表达水平,与Western blot结果一致[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
1. 抑制肿瘤生长:在髓母细胞瘤同种异体移植小鼠模型(C57BL/6小鼠接种Daoy细胞)中,柴胡皂苷B1以10 mg/kg和20 mg/kg剂量腹腔注射,每日1次,连续21天。其中20 mg/kg剂量可显著降低肿瘤体积(较溶剂对照组减少约45%)和肿瘤重量(较溶剂对照组减少约50%)[1]
2. 延长生存期:柴胡皂苷B1(20 mg/kg)处理组小鼠的中位生存期(38天)显著长于溶剂对照组(25天)[1] 3. 体内通路调控:对治疗后小鼠肿瘤组织的免疫组化染色显示,柴胡皂苷B1(20 mg/kg)可降低Gli1和增殖标志物Ki-67的表达,同时增加TUNEL阳性凋亡细胞数量[1] 4. 安全性监测:在治疗期间,柴胡皂苷B1(10 mg/kg、20 mg/kg)未导致小鼠体重显著变化,也未对主要器官(肝、肾)造成明显病理损伤[1] |
| 细胞实验 |
1. 细胞活力检测:将髓母细胞瘤细胞(Daoy、UW228-3)以5×10³个/孔的密度接种于96孔板,培养过夜。加入1 μM、2.5 μM、5 μM、10 μM、20 μM浓度的柴胡皂苷B1,孵育48小时后,使用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测450 nm处吸光度,计算相对于溶剂对照组的细胞活力[1]
2. Western blot检测:Daoy细胞经柴胡皂苷B1(5 μM、10 μM)处理24小时后,提取细胞总蛋白,采用BCA法测定蛋白浓度。将等量蛋白(每泳道30 μg)通过SDS-PAGE分离,转移至PVDF膜,用5%脱脂牛奶封闭。膜与抗Smo、Gli1、Ptch1和β-肌动蛋白(内参)一抗在4°C孵育过夜,再与二抗室温孵育1小时。使用增强化学发光(ECL)试剂盒显影蛋白条带,并用ImageJ软件定量条带强度[1] 3. 凋亡检测:Daoy细胞经柴胡皂苷B1(10 μM)处理24小时后,收集细胞,用PBS洗涤,按试剂盒说明加入Annexin V-FITC和PI染色。通过流式细胞仪检测凋亡细胞,并用流式分析软件计算凋亡率[1] 4. 克隆形成实验:将Daoy细胞以200个/孔的密度接种于6孔板,培养过夜。加入2.5 μM、5 μM、10 μM浓度的柴胡皂苷B1,培养14天。用4%多聚甲醛固定克隆,0.1%结晶紫染色,计数含50个以上细胞的克隆,计算克隆形成效率[1] 5. qPCR检测:Daoy细胞经柴胡皂苷B1(5 μM、10 μM)处理24小时后,用TRIzol试剂提取总RNA,通过分光光度计测定RNA纯度和浓度。以1 μg总RNA为模板,用逆转录试剂盒合成互补DNA(cDNA)。使用SYBR Green Master Mix和针对Gli1、Smo及GAPDH(内参)的特异性引物进行qPCR,反应条件为:95°C 30秒,随后40个循环(95°C 5秒、60°C 30秒)。采用2^(-ΔΔCt)法计算相对mRNA表达水平[1] |
| 动物实验 |
1. 肿瘤同种异体移植模型建立:采用6-8周龄的C57BL/6雌性小鼠。将Daoy细胞(每只小鼠5×10⁶个细胞)重悬于100 μL PBS与Matrigel(1:1比例)混合液中,皮下注射至小鼠右侧腹部。监测肿瘤生长直至肿瘤体积达到约100 mm³,此时将小鼠随机分为三组(每组n=6):载体对照组、柴胡皂苷B1 10 mg/kg组和柴胡皂苷B1 20 mg/kg组[1]
2. 药物配制及给药:将柴胡皂苷B1溶于二甲基亚砜(DMSO)配制成储备液,然后用生理盐水稀释至最终浓度(DMSO最终浓度≤1%)。药物每日腹腔注射一次,连续21天;溶剂对照组注射等体积的DMSO-生理盐水[1] 3. 数据收集和样本处理:每3天使用游标卡尺测量肿瘤体积,并使用公式:体积 = (长度 × 宽度²)/2 计算肿瘤体积。每周记录小鼠体重以监测其总体健康状况。治疗结束后,处死小鼠,切取肿瘤组织并称重。一部分肿瘤组织用4%多聚甲醛固定,用于免疫组织化学染色,剩余组织储存于-80℃,以备后续分析[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
柴胡皂苷B1已在柴胡、司氏柴胡及其他有相关数据的生物体中被报道。
1. 柴胡皂苷B1是一种从柴胡属植物(例如柴胡)中分离得到的三萜皂苷[1] 2. 髓母细胞瘤是儿童最常见的恶性脑肿瘤,Hedgehog信号通路的异常激活与髓母细胞瘤的发生发展密切相关。本研究证实,柴胡皂苷B1通过抑制Hedgehog信号通路发挥抗髓母细胞瘤作用,为髓母细胞瘤的治疗提供了一种潜在的候选药物[1] |
| 分子式 |
C42H68O13
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|---|---|
| 分子量 |
780.9815
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| 精确质量 |
780.466
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| CAS号 |
58558-08-0
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| PubChem CID |
9875547
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
909.9±65.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
235-238ºC
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| 闪点 |
504.1±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±0.6 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.619
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| LogP |
3.59
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| tPSA |
218.99
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| 氢键供体(HBD)数目 |
9
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| 氢键受体(HBA)数目 |
13
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
55
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| 分子复杂度/Complexity |
1500
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| 定义原子立体中心数目 |
19
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| SMILES |
C[C@@H]1[C@@H]([C@@H]([C@H]([C@@H](O1)O[C@H]2CC[C@]3([C@H]([C@]2(C)CO)CC[C@@]4([C@@H]3C=CC5=C6CC(CC[C@@]6([C@H](C[C@]54C)O)CO)(C)C)C)C)O)O[C@H]7[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O7)CO)O)O)O)O
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| InChi Key |
WRYJYFCCMSVEPQ-MNIDVGFKSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C42H68O13/c1-21-29(47)34(55-35-32(50)31(49)30(48)24(18-43)53-35)33(51)36(52-21)54-28-11-12-38(4)25(39(28,5)19-44)10-13-40(6)26(38)9-8-22-23-16-37(2,3)14-15-42(23,20-45)27(46)17-41(22,40)7/h8-9,21,24-36,43-51H,10-20H2,1-7H3/t21-,24-,25-,26-,27+,28+,29+,30-,31+,32-,33-,34+,35+,36+,38+,39+,40-,41-,42-/m1/s1
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| 化学名 |
(2S,3R,4S,5S,6R)-2-[(2R,3R,4S,5S,6R)-2-[[(3S,4R,4aR,6aR,6bS,8S,8aS,14aR,14bS)-8-hydroxy-4,8a-bis(hydroxymethyl)-4,6a,6b,11,11,14b-hexamethyl-1,2,3,4a,5,6,7,8,9,10,12,14a-dodecahydropicen-3-yl]oxy]-3,5-dihydroxy-6-methyloxan-4-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~128.04 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 100 mg/mL (128.04 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 1000.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中,混合均匀。 配方 2 中的溶解度: 10 mg/mL (12.80 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 100.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 10 mg/mL (12.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.2804 mL | 6.4022 mL | 12.8044 mL | |
| 5 mM | 0.2561 mL | 1.2804 mL | 2.5609 mL | |
| 10 mM | 0.1280 mL | 0.6402 mL | 1.2804 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。