| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IKK-2 (IC50 = 11.2 μM); CDK2/A (IC50 = 61 μM); AUR2 (IC50 = 71 μM); PRAK (IC50 = 75 μM); MSK (IC50 = 123 μM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：SC-514 类似地抑制天然 IKK 复合物或重组人 IKK-1/IKK-2 异二聚体和 IKK-2 同二聚体。 SC-514 抑制 IL-1β 诱导的类风湿关节炎衍生滑膜成纤维细胞 (RASF) 中 NF-κB 依赖性 IL-6、IL-8 和 COX-2 基因的转录，IC50 分别为 20、20 和 8 μM。 100 μM SC-514 可阻断 IκBα 的磷酸化和降解，并降低 IL-1β 处理的 RASF 中 p65 转位至细胞核的水平 SC-514 不会抑制 IKK 复合物的磷酸化和激活。 SC-514 会延迟但不能完全阻断 IκBα 磷酸化和降解。 SC-514处理细胞显示p65进入细胞核的输入稍微减慢、减少，并且p65从细胞核的输出更快。 SC-514 类似地抑制 IκBα 或 p65 的磷酸化。激酶测定：使用 NEMO 抗体 (3-10 μg) 从 IL-1β 处理的 RASF 细胞裂解物 (0.5-2 mg) 中免疫沉淀 IKK 复合物，然后添加 Protein A-琼脂糖珠。通过离心沉淀抗体复合物，用 1 mL 冷的全细胞裂解缓冲液洗涤 3 次，然后用激酶缓冲液（25 mM HEPES、pH 7.6、2 mM MgCl2、2 mM MnCl2、10 mM NaF、5 mM DTT）洗涤 2 次和 1 mM 苯甲基磺酰氟）。在含有 10 μM 生物素化 IκBα 肽作为底物和 1 μM [γ-33P]ATP (2500 Ci/mmol) 的反应中分析 100-200 μg 免疫沉淀 IKK 的激酶活性。室温孵育 30 分钟后，取出 25 μL 反应混合物并添加至 SAM 96 生物素捕获板。连续清洗步骤后，将板风干，并向每个孔中添加 25 μL 闪烁液。使用 Top-Count NXT 细胞测定法测量 [γ-33P]ATP 的掺入：SC-514 抑制所有形式的重组人 IKK-2，IC50 值在 3–12μM 范围内。它还抑制天然 IKK 复合物。 SC-514 特异性结合 IKK-2 的 ATP 结合位点，并与 ATP 发挥可逆的竞争性抑制作用。然而，SC-514 对 IκB 位点表现出非竞争性抑制作用。作为 IKK-2 的抑制剂，SC-514 可阻断 IκBα 的磷酸化和降解，并降低 IL-1β 处理的 RASF 中 p65 转入细胞核的水平。此外，SC-514 对 NF-κB 诱导基因（包括 IL-6、IL-8 和 COX-2）的转录显示出剂量依赖性抑制作用。此外，SC-514 在急性炎症模型中可有效减少 LPS 诱导的 TNFα 产生。据报道，SC-514 还可以通过减弱 RANKL 诱导的 NF-κB 激活来抑制 BMM 细胞中的破骨细胞生成。
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| 体内研究 (In Vivo) |
SC-514 在急性炎症模型（即 LPS 诱导的血清 TNF-α 产生）中有效。 SC-514（50 mg/kg，腹腔注射）可抑制体内 TNF-α 的产生约 70%。
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| 酶活实验 |
使用 NEMO 抗体 (3-10 μg) 和 Protein A-琼脂糖珠，从 IL-1β 处理的 RASF 细胞裂解物 (0.5-2 mg) 中免疫沉淀 IKK 复合物。将抗体复合物离心，然后在激酶缓冲液（25 mM HEPES、pH 7.6、2 mM MgCl2、2 mM MnCl2、10 mM NaF、5 mM DTT 和 1 mM 苯甲基磺酰氟）中洗涤两次，然后在冷全液中洗涤 3 次。细胞裂解缓冲液。在以 10 mM 生物素化 IB 肽作为底物和 1 mM [γ-33P]ATP (2500 Ci/mmol) 的反应中，使用 100–200 g 免疫沉淀 IKK 来测量激酶活性。在以 10 μM 生物素化 IB 肽为底物和 1 μM [γ-33P]ATP (2500 Ci/mmol) 的反应中评估 100–200 μg 免疫沉淀 IKK 的激酶活性。然后在室温下孵育 30 分钟后，将 25 μL 反应混合物填充到 SAM 96 生物素捕获板中。每个洗涤步骤之后，将板风干，然后每个孔接受 25 μL 闪烁液。 Top-Count NXT[1] 用于测量 [γ-33P]ATP 掺入。
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| 细胞实验 |
黑色素瘤细胞系 (1×104) 铺板于 60 mm 培养皿中，未经处理或用 SC-514 (50 µM) 和/或福莫司汀预处理，用于结晶紫染色测定。福尔马林固定和结晶紫染色后，制备细胞。使用来自福尔马林固定细胞的溶解结晶紫在 595 nm (OD595) 处的光密度来计算细胞数。 MTT 还原测定是另一种测定细胞毒性的方法。
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| 动物实验 |
Rats: Adult male Wistar rats are given either SC-514 or vehicle (2% Me2SO in saline) by intraperitoneal injection (10 and 50 mg/kg) or oral gavage (50 mg/kg) after an overnight fast. One mg/kg of LPS (Escherichia coli) in saline is given intraperitoneally two hours after compound treatment. Ninety minutes later, the animals are bled, and serum TNF levels are measured using a rat-specific TNFα ELISA.
Mice: Six-week-old male nu/nu BALB/c mice are kept in separate ventilated cages. Reconstituted A375 or G361 (5×106) cells are inoculated subcutaneously into the backs of naked mice, where they are allowed to grow for 7 days. After that, mice are divided into 4 groups at random (n=6) and given intraperitoneal injections of a 200 µL solution containing 30% PEG/5% Tween-80 as the vehicle control, 25 mg/kg SC-514, or 25 mg/kg Fotemustine, once daily for 13–15 days. Every three days, the tumor volume and body weight are measured. Using a caliper, tumor volumes are measured and calculated. Mice are killed at the conclusion of the experiment, and tumor xenografts are gathered. For a Western blot analysis, tumor tissues are kept at -80°C. |
| 参考文献 |
| 分子式 |
C9H8N2OS2
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| 分子量 |
224.3
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| 精确质量 |
224.296
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| 元素分析 |
C, 48.19; H, 3.60; N, 12.49; O, 7.13; S, 28.59
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| CAS号 |
354812-17-2
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| 相关CAS号 |
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| SMILES |
C1=CSC=C1C2=CC(=C(S2)C(=O)N)N
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| InChi Key |
BMUACLADCKCNKZ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C9H8N2OS2/c10-6-3-7(5-1-2-13-4-5)14-8(6)9(11)12/h1-4H,10H2,(H2,11,12)
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| 化学名 |
3-amino-5-thiophen-3-ylthiophene-2-carboxamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外) |
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| 溶解度 (体内) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.15 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.15 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.15 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 2% DMSO+30% PEG 300+2% Tween 80+ddH2O: 4mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.4583 mL | 22.2916 mL | 44.5831 mL | |
| 5 mM | 0.8917 mL | 4.4583 mL | 8.9166 mL | |
| 10 mM | 0.4458 mL | 2.2292 mL | 4.4583 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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Resolvin D1-d5 (RvD1-d5)
6-keto Prostaglandin F1α
Cerebroside D
Keap1-Nrf2-IN-7
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