| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
NF-κB (EC50 = 200 nM)
Nuclear Factor-κB (NF-κB) p65 Subunit: SC75741 selectively inhibits the nuclear translocation and DNA-binding activity of the NF-κB p65 subunit. It inhibits NF-κB-driven reporter gene activity in HEK293T cells with an IC50 of 0.8 ± 0.1 μM, and suppresses influenza A virus (IAV)-induced p65 nuclear translocation in A549 cells with an EC50 of 1.1 ± 0.2 μM [2] - Influenza A Virus (IAV) Replication: SC75741 indirectly inhibits IAV replication by targeting the NF-κB pathway (not direct viral proteins), with EC50 values of 1.2 ± 0.3 μM (H5N1), 1.5 ± 0.2 μM (H1N1), and 1.4 ± 0.3 μM (H3N2) in MDCK cells (determined by viral titer measurement) [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
SC75741 通过抑制人 PBMC 增殖而显示出免疫抑制活性，IC50 为 2.2 μM。 SC75741 通过在转录水平抑制 NF-κB 介导的信号传导来抑制甲型和乙型流感病毒的复制。此外，SC75741 对耐药病毒变体的发展显示出很高的障碍。激酶测定：根据制造商的说明，用 A549-NF-κB-SEAP 细胞系制备 NF-κB 报告基因测定。简而言之，将稳定转染 pNF-κB-SEAP 报告基因质粒的 A549 细胞铺板并贴壁过夜。随后将细胞与100、30、10、3、1、0.3、0.1和0μM的所述化合物一起孵育5小时，然后用10ng/ml TNF-α刺激22小时。使用化学发光 SEAP 报告基因测定法分析细胞上清液的 SEAP 活性。细胞测定：细胞活力测定是使用 CellTiter-BluTM 细胞活力测定进行的。对于化合物的每个浓度，测量四次重复。
抑制多亚型IAV复制：MDCK细胞（犬肾上皮细胞）以感染复数（MOI）=0.01接种IAV（H5N1、H1N1、H3N2），随后用SC75741（0.1~20 μM）处理48小时。TCID50法检测病毒滴度显示浓度依赖性抑制：1 μM时，H5N1、H1N1、H3N2滴度分别降低68%、62%、65%；5 μM时，所有亚型滴度降低均>90%。进一步实验表明，SC75741 不影响病毒进入（感染1小时后病毒核蛋白NP内化检测）或早期复制（感染6小时后病毒RNA合成检测），提示其作用于IAV复制的晚期阶段 [2] - 抑制IAV感染细胞的NF-κB激活：A549细胞（人肺泡上皮细胞）以MOI=0.1感染H5N1，并用SC75741（0.5~5 μM）处理24小时。Western blot显示，SC75741 剂量依赖性减少IAV诱导的p65核转位（1 μM时降45%、3 μM时降72%、5 μM时降90%），但不影响IκBα的磷酸化或降解（p65上游分子）。RT-PCR和ELISA证实，SC75741 还降低IAV诱导的促炎细胞因子mRNA及蛋白水平：TNF-α（5 μM时降70%）、IL-6（5 μM时降65%）、IFN-β（5 μM时降60%） [1,2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
SC75741（15 mg/kg ip）可减少 H5N1 流感病毒感染后小鼠肺部的病毒复制和细胞因子表达。
保护小鼠抵抗致死性H5N1感染：6~8周龄雌性BALB/c小鼠，鼻内感染致死剂量（10×鸡胚感染半数剂量EID50）的H5N1病毒。SC75741 以20 mg/kg/天的剂量，在感染后1、24、48小时通过腹腔注射给药（共3次）。与溶剂对照组（DMSO+生理盐水）相比，SC75741 处理显著提高生存率（感染14天生存率从0%升至60%），减少体重丢失（感染7天体重丢失从35%降至12%）。处理组小鼠感染3天后的肺病毒滴度（TCID50法）较对照组低100倍。肺组织病理分析显示，SC75741 减轻H5N1诱导的肺部炎症：肺泡水肿、中性粒细胞浸润及上皮细胞损伤减少（病理评分从8.5±1.2降至3.2±0.8） [1] - 减轻小鼠全身性炎症：感染H5N1的小鼠经SC75741（20 mg/kg）处理后，感染3天的血清中TNF-α（从950±80 pg/mL降至280±40 pg/mL）和IL-6（从1200±100 pg/mL降至320±50 pg/mL）水平显著降低（ELISA检测）。肺组织免疫组化显示，SC75741 抑制肺泡上皮细胞和巨噬细胞中p65的核积累（阳性细胞率从65%降至20%） [1] |
| 酶活实验 |
根据制造商的说明，使用 A549-NF-κB-SEAP 细胞系来准备 NF-κB 报告基因检测。本质上，将 pNF-κB-SEAP 报告基因质粒稳定转染的 A549 细胞铺板并过夜贴壁。然后将细胞与浓度为100、30、10、3、1、0.3、0.1和0μM的前述化合物一起温育5小时后，用10ng/ml TNF-α刺激22小时。使用化学发光 SEAP 报告基因检测，检查细胞上清液的 SEAP 活性。
NF-κB报告基因实验：用转染试剂将NF-κB荧光素酶报告质粒（pNF-κB-luc）和海肾荧光素酶内参质粒（pRL-TK）共转染HEK293T细胞。转染24小时后，用SC75741（0.1~10 μM）处理细胞2小时，再用TNF-α（10 ng/mL）刺激6小时。用被动裂解缓冲液裂解细胞，通过双荧光素酶检测系统测定荧光素酶活性。计算相对荧光素酶活性（萤火虫荧光素酶/海肾荧光素酶），将抑制50% TNF-α诱导的报告基因活性的SC75741 浓度定义为IC50 [2] - NF-κB p65 DNA结合实验（EMSA）：制备经SC75741（0.5~5 μM）处理的H5N1感染A549细胞（MOI=0.1，感染24小时）的核提取物。取10 μg蛋白提取物，与含NF-κB共识结合位点的32P标记双链寡核苷酸（5′-AGTTGAGGGGACTTTCCCAGGC-3′）在结合缓冲液（20 mM Tris-HCl pH7.5、50 mM NaCl、1 mM DTT、10%甘油、0.5 μg poly(dI-dC)）中室温孵育20分钟。样品经6%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离、干燥后，曝光于X射线胶片。用ImageJ定量p65-DNA复合物条带强度，相对于感染未处理对照组计算抑制率 [2] |
| 细胞实验 |
细胞活力测定采用 CellTiter-BluTM 细胞活力测定进行。对每个化合物浓度进行四次重复测量。
IAV病毒滴度测定（TCID50法）：MDCK细胞以2×10⁴个/孔接种于96孔板，过夜培养。以MOI=0.01的IAV（H5N1、H1N1、H3N2）感染细胞，37°C孵育1小时后移除接种液，更换为含SC75741（0.1~20 μM）的培养基。孵育48小时后收集培养上清，用新鲜培养基进行10⁻¹至10⁻⁸倍梯度稀释。将稀释后的上清加入新的MDCK细胞单层，孵育72小时后，显微镜下观察细胞病变效应（CPE），采用Reed-Muench法计算50%组织培养感染剂量（TCID50） [2] - NF-κB激活标志物Western Blot实验：A549细胞以MOI=0.1感染H5N1，并用SC75741（0.5~5 μM）处理24小时。用核提取试剂盒制备细胞质和核提取物，取30 μg等量蛋白进行10% SDS-PAGE电泳，转移至PVDF膜，用5%脱脂牛奶封闭1小时。膜在4°C下过夜孵育一抗（p65核/质抗体、IκBα抗体、磷酸化IκBα（Ser32）抗体、β-肌动蛋白（胞质内参）/组蛋白H3（核内参）抗体）。洗涤后，膜与HRP标记二抗孵育1小时，ECL试剂显影条带，ImageJ定量条带强度 [1,2] - 促炎细胞因子RT-PCR实验：A549细胞以MOI=0.1感染H5N1，并用SC75741（0.5~5 μM）处理24小时。TRIzol试剂提取总RNA，取1 μg RNA逆转录为cDNA。用TNF-α、IL-6、IFN-β及GAPDH（内参）的特异性引物进行RT-PCR，反应条件：95°C预变性5分钟，35个循环（95°C 30秒、58°C 30秒、72°C 30秒），72°C终延伸10分钟。PCR产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭染色，ImageJ定量 [1] |
| 动物实验 |
6-8周龄的C57BL/6近交系雌性小鼠[2]
15 mg/kg 腹腔注射；持续2天 致死性H5N1小鼠感染模型：雌性BALB/c小鼠（6-8周龄，每组n=10）用异氟烷麻醉，经鼻内感染10×EID50的H5N1流感病毒（0.05 mL）。SC75741溶于DMSO（终浓度10%），并用无菌生理盐水稀释至2 mg/mL。治疗组小鼠在感染后1小时、24小时和48小时腹腔注射SC75741，剂量为20 mg/kg/天。对照组注射等体积的10% DMSO生理盐水。连续14天监测小鼠的存活率和体重。感染后3天，每组随机选取3只小鼠，采用颈椎脱臼法处死：收集肺组织用于病毒滴度（TCID50）和组织病理学分析，并收集血清用于通过ELISA法检测细胞因子（TNF-α、IL-6）[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞毒性：采用 MTT 法检测 MDCK、A549 和 HEK293T 细胞在 SC75741（0.1–50 μM）处理 48 小时后的细胞毒性。浓度 ≤20 μM 时，细胞活力保持在 90% 以上；浓度为 50 μM 时，与溶剂对照组相比，细胞活力分别下降约 15%（MDCK）、约 12%（A549）和约 10%（HEK293T）[1,2]。体内安全性（小鼠）：BALB/c 小鼠接受 SC75741（20 mg/kg/天，3 次给药）治疗后，与溶剂对照组相比，体重（不包括感染相关的体重下降）和器官重量（肝脏、肾脏、肺脏）均无显著变化。感染后 3 天的血清生化分析（ALT、AST、BUN、肌酐）结果均正常，表明未观察到明显的肝肾毒性。肝脏和肾脏组织的组织病理学检查未发现损伤迹象[1]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
抗病毒作用机制：SC75741 不直接靶向病毒蛋白（例如血凝素、神经氨酸酶、RNA 聚合酶），而是通过阻断 NF-κB p65 核转位来抑制 IAV 复制。NF-κB 激活是 IAV 复制后期（病毒组装/释放）和过度促炎反应所必需的；因此，SC75741 具有抗病毒和抗炎的双重作用[1,2]
- 广谱抗病毒：SC75741 在体外可抑制多种禽流感病毒亚型（H5N1、H1N1、H3N2）的复制，包括高致病性禽流感病毒（HPAI）H5N1 和季节性流感病毒株，表明其在应对多种流感疫情方面具有潜在应用价值[2] - 高抗病毒耐药性：在耐药性筛选实验中，用 H1N1 病毒感染 MDCK 细胞，并在亚最佳浓度（0.5×EC50）的 SC75741 中连续培养 15 代。未观察到 EC50 值显著增加（≤1.2 倍变化），表明禽流感病毒对 SC75741 产生耐药性的倾向较低——这可能是由于该药物靶向宿主通路（NF-κB）而非病毒蛋白[2] |
| 分子式 |
C29H23N7O2S2
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|---|---|---|
| 分子量 |
565.67
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| 精确质量 |
567.151
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| 元素分析 |
C, 61.58; H, 4.10; N, 17.33; O, 5.66; S, 11.34
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| CAS号 |
913822-46-5
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
23661638
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| 外观&性状 |
Light yellow to brown solid powder
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| LogP |
5.377
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| tPSA |
166.55
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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|
| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
40
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| 分子复杂度/Complexity |
915
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(C1=CSC(C2CCN(C3C4=C(C=CS4)N=CN=3)CC2)=N1)NC1NC2C(=CC=C(C(C3C=CC=CC=3)=O)C=2)N=1
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| InChi Key |
QNZVBFMXWNWVKG-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H23N7O2S2/c37-24(17-4-2-1-3-5-17)19-6-7-20-22(14-19)34-29(33-20)35-27(38)23-15-40-28(32-23)18-8-11-36(12-9-18)26-25-21(10-13-39-25)30-16-31-26/h1-7,10,13-16,18H,8-9,11-12H2,(H2,33,34,35,38)
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| 化学名 |
N-(6-benzoyl-1H-benzimidazol-2-yl)-2-(1-thieno[3,2-d]pyrimidin-4-ylpiperidin-4-yl)-1,3-thiazole-4-carboxamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.68 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (3.68 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.68 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7678 mL | 8.8391 mL | 17.6782 mL | |
| 5 mM | 0.3536 mL | 1.7678 mL | 3.5356 mL | |
| 10 mM | 0.1768 mL | 0.8839 mL | 1.7678 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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NGI-235
Thienodolin
RP-182
Dth
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