| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Serum- and glucocorticoid-regulated kinase 1 (SGK1).
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| 体外研究 (In Vitro) |
SGK1-IN-2 (14h) 是一种选择性血清和糖皮质激素调节激酶 1 (SGK1) 抑制剂，在 10 uM ATP 浓度下，其 IC50 值为 5 nM。该化合物旨在选择性地抑制 SGK1，而非其他密切相关的激酶，例如 AKT、PKC 和 p70S6K，尽管其完整的选择性谱尚未明确列出。SGK1-IN-2 通过与 SGK1 的 ATP 结合口袋结合，阻止下游底物的磷酸化和激活。这些底物包括 N-myc 下游调控基因 1 (NDRG1) 和泛素连接酶 NEDD4-2，它们调控离子通道和转运蛋白。体外实验表明，SGK1-IN-2 对 SGK1 的抑制作用可降低多种癌细胞系的活力和增殖能力，包括乳腺癌、前列腺癌和结肠癌细胞系。它还能在特定情况下促进细胞凋亡。该化合物是解析SGK1信号通路对细胞生理学具体作用的宝贵工具。
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| 体内研究 (In Vivo) |
SGK1-IN-2 的体内疗效已在癌症和代谢疾病的临床前模型中得到评估。在表达高水平 SGK1 的人类肿瘤（例如三阴性乳腺癌 (TNBC)）的小鼠异种移植模型中，口服 SGK1-IN-2 可显著抑制肿瘤生长。这种抑制作用与肿瘤组织中 NDRG1（SGK1 活性的生物标志物）磷酸化水平的降低相关，证实了其靶向作用。在代谢综合征模型中，SGK1-IN-2 治疗已被证明可以改善胰岛素敏感性并降低血压。这些研究支持 SGK1 是癌症和代谢疾病的有效靶点这一观点。然而，该化合物仍处于临床前研究阶段，尚未进入临床试验。
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| 酶活实验 |
SGK1-IN-2 的体外抑制活性通常采用放射性或荧光激酶活性测定法进行测定。对于放射性测定法，将重组活性 SGK1 激酶与特定的肽底物（例如，源自 NDRG1 的生物素化肽）和固定浓度的 ATP（例如，10 uM，其中含有 γ-33P-ATP）在反应缓冲液（例如，50 mM HEPES，pH 7.5，10 mM MgCl2，1 mM EGTA，0.01% Brij-35，2 mM DTT）中孵育。向反应体系中加入不同浓度的 SGK1-IN-2（通常范围为 0.01 nM 至 10 uM）。加入 SGK1 酶启动反应，并在 30℃ 下孵育 30-60 分钟。然后加入高浓度EDTA溶液（例如100 mM）终止反应。取一定量的反应混合物转移至链霉亲和素包被的滤板。洗涤滤板以去除未结合的放射性标记ATP后，使用微孔板闪烁计数器测量肽底物中33P的含量。通过将数据拟合到四参数逻辑曲线来计算IC50值。对于基于荧光的检测方法，采用类似的方法，但使用标记的肽底物和检测系统，例如时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）检测。
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| 细胞实验 |
为了评估SGK1-IN-2的细胞活性，我们使用了高表达SGK1的癌细胞系（例如MCF-7乳腺癌细胞或PC-3前列腺癌细胞）。将细胞以每孔20万至50万个细胞的密度接种于6孔板中，并在完全培养基中于37℃培养过夜。第二天，更换新鲜培养基，加入不同浓度的SGK1-IN-2（通常为0.1 nM至10 μM）或溶剂（DMSO，终浓度≤0.1%）。细胞培养2-6小时用于生物标志物分析，或培养24-72小时用于增殖/凋亡检测。对于生物标志物分析，处理后收集细胞，并用含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物的RIPA裂解缓冲液裂解细胞。使用 BCA 法定量蛋白质浓度。取等量蛋白质（例如 20-30 μg）进行 SDS-PAGE 电泳分离，然后转移至 PVDF 膜。随后，用针对磷酸化 NDRG1 (p-NDRG1, Thr346)、总 NDRG1、磷酸化 SGK1 (p-SGK1, Ser422)、总 SGK1 以及内参（如 β-肌动蛋白或 GAPDH）的特异性抗体进行免疫印迹。使用 HRP 标记的二抗和化学发光底物检测信号。使用图像分析软件定量条带强度。通常将使 p-NDRG1 水平降低 50% 的浓度称为 EC50。对于细胞增殖实验，将细胞用 SGK1-IN-2 处理 72 小时，并使用 MTT 或 CellTiter-Glo 法检测细胞活力。
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| 动物实验 |
SGK1-IN-2 的体内疗效在小鼠异种移植模型中进行评估。典型的实验中，将 5 × 10⁶ 个表达 SGK1 的癌细胞（例如 MCF-7 或 PC-3 细胞）悬浮于 100 μL 的 PBS 和 Matrigel 1:1 混合液中，皮下注射到 6-8 周龄的雌性无胸腺裸鼠侧腹部。当肿瘤体积达到约 150 mm³ 时，将小鼠随机分为治疗组（每组 n=8-10）。SGK1-IN-2 配制于合适的载体中，例如 10% DMSO、40% PEG300、5% Tween 80 和 45% 生理盐水，或 0.5% 甲基纤维素。该化合物随后以灌胃方式每日一次 (qd) 或两次 (bid) 给药，剂量范围为 10 至 100 mg/kg，持续 3-4 周。对照组仅接受赋形剂。每 2-3 天使用数字游标卡尺测量肿瘤体积，并记录体重作为毒性的一般指标。研究结束时，处死小鼠，切除肿瘤并称重。可收集肿瘤组织进行进一步分析，例如通过蛋白质印迹法评估 p-NDRG1 水平或通过免疫组织化学法评估 Ki-67 和裂解型 caspase-3。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
SGK1-IN-2 的药代动力学 (PK) 特性已在大鼠中进行了评估。口服给药（10 mg/kg）后，该化合物迅速吸收，在 1-2 小时内达到血浆峰浓度 (Cmax) (Tmax)。其口服生物利用度中等。血浆消除半衰期 (t1/2) 中等，通常为 2-4 小时，支持每日两次 (BID) 的给药方案。分布容积 (Vd) 大于体液总量，表明该化合物广泛分布于组织中。清除率 (CL) 中等。这些药代动力学特性使其适用于体内疗效研究。其他物种（例如犬）的详细药代动力学参数尚不广泛报道。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于SGK1-IN-2仍处于早期发现阶段，其临床前毒性数据有限。体外实验中，该化合物已在多种正常人细胞系（例如成纤维细胞、肝细胞）中进行了细胞毒性测试，结果显示其毒性较低至中等，且在癌细胞和正常细胞之间存在治疗窗口。在小鼠异种移植研究中，该化合物在有效剂量下总体耐受性良好。在这些短期（3-4周）研究中，未观察到明显的体重减轻或明显的毒性症状。然而，要推进临床试验，需要进行全面的毒理学研究，包括在两种动物中进行遗传毒性和重复给药毒性研究。SGK1抑制剂的靶向毒性预计涉及电解质失衡（由于其在离子通道调节中的作用）以及可能的免疫调节。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Sgk1-IN-2 是一种有机分子实体。
SGK1-IN-2 是一种研究级化学探针，尚未获准用于任何治疗用途。它是一种研究 SGK1 在多种疾病模型（包括癌症、高血压和自身免疫性疾病）中作用的重要工具。通过提供一种选择性抑制 SGK1 的方法，该探针使研究人员能够验证 SGK1 抑制的效果，并将其与密切相关的 AKT 信号通路区分开来。PI3K/AKT/SGK1 通路在多种癌症中经常过度激活，因此，靶向 SGK1 作为一种治疗策略越来越受到关注，尤其是在对 AKT 抑制剂耐药的肿瘤中。该化合物的结构和活性数据归其研发团队所有。在细胞培养中，其常用浓度为 1-10 μM；在体内研究中，其常用剂量为 10-50 mg/kg。 |
| 分子式 |
C17H12CL2N6O2S
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|---|---|
| 分子量 |
435.2872
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| 精确质量 |
434.011
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| CAS号 |
1426214-64-3
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| PubChem CID |
71537261
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
2.9
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| tPSA |
135
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
28
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| 分子复杂度/Complexity |
642
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
ClC1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1S(N([H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])C1C([H])=NC2=C(N([H])[H])N([H])N=C2N=1)(=O)=O)Cl
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| InChi Key |
RTERCHJCWXQPSS-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H12Cl2N6O2S/c18-10-3-6-12(19)14(7-10)28(26,27)25-11-4-1-9(2-5-11)13-8-21-15-16(20)23-24-17(15)22-13/h1-8,25H,(H3,20,22,23,24)
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| 化学名 |
N-[4-(3-amino-2H-pyrazolo[3,4-b]pyrazin-6-yl)phenyl]-2,5-dichlorobenzenesulfonamide
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| 别名 |
SGK1IN2; SGK-1 IN 2
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~62.5 mg/mL (~143.58 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.78 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2973 mL | 11.4866 mL | 22.9732 mL | |
| 5 mM | 0.4595 mL | 2.2973 mL | 4.5946 mL | |
| 10 mM | 0.2297 mL | 1.1487 mL | 2.2973 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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