| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
3-Hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase (HMG-CoA reductase) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
SR-12813 对脂肪酸的产生没有影响，但它会抑制氚化水与胆固醇的结合，IC50 为 1.2 μM。此外，SR-12813 还可以降低细胞 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶 A (HMG-CoA) 还原酶的活性，IC50 为 0.85 μM[1]。因为它们都能阻止胆固醇的产生，所以 25-HC 和 SR-12813 是致命选择的绝佳候选者。在 8 µM 至 16 µM 剂量范围内，SR-12813 可杀死 HeLa 细胞。虽然突变体 SL-5 在这种情况下仍存活，但 SR-12813 会杀死野生型细胞和感染 Ad-Cre (SL-5+Cre) 的突变细胞。在野生型 HeLa 细胞和 SL-5 突变细胞中，SR-12813 或 25-HC 刺激 95-KDa 全长 HMG-CoA 还原酶的分解 [1]。
在Hep G2细胞中，SR-12813抑制氚水掺入胆固醇，IC₅₀为1.2 µM。它也抑制[¹⁴C]乙酸掺入胆固醇，IC₅₀为0.6 µM。该药物对氚水掺入脂肪酸没有影响，对[³H]甲羟戊酸内酯掺入胆固醇、角鲨烯或法尼醇也没有影响。[1] SR-12813抑制Hep G2细胞中的HMG-CoA还原酶活性，表观IC₅₀为0.85 µM。抑制迅速，半衰期为10分钟。在5 µM浓度下达到约80%的最大抑制。[1] SR-12813在浓度高达0.5 mM时，不直接抑制人HMG-CoA还原酶克隆催化亚基的活性，在10 µM时也不抑制Hep G2细胞提取物中的HMG-CoA还原酶活性。[1] 过夜孵育后，SR-12813增加了Hep G2细胞中HMG-CoA还原酶和低密度脂蛋白受体mRNA水平。[1] 免疫印迹分析显示，SR-12813迅速降低了HMG-CoA还原酶蛋白的量。通过[³⁵S]甲硫氨酸脉冲追踪实验确定的HMG-CoA还原酶降解半衰期，从对照细胞的90分钟缩短至SR-12813存在下的20分钟。[1] 过夜孵育后，SR-12813增加了Hep G2细胞中LDL受体介导的¹²⁵I-LDL结合和降解。[1] 用高浓度的洛伐他汀预处理，并未阻止SR-12813加速HMG-CoA还原酶降解，表明其作用不依赖于甲羟戊酸衍生的调节因子。[1] SR-12813对HMG-CoA还原酶活性的抑制并非由于酶磷酸化增加所致，因为在测量总活性时该效应仍然存在。[1] |
| 酶活实验 |
测定Hep G2细胞中HMG-CoA还原酶活性。细胞在含5%脂蛋白缺失血清的培养基中预孵育过夜。将SR-12813或溶剂加入细胞。孵育后，用含Brij 96去垢剂的裂解缓冲液裂解细胞。通过测量[¹⁴C]HMG-CoA向[¹⁴C]甲羟戊酸的转化来确定细胞裂解物中的HMG-CoA还原酶活性。反应在氟离子存在下进行以测量“表达”活性，或在无氟离子下测量“总”活性。放射性产物通过薄层色谱分离并定量。[1]
使用人HMG-CoA还原酶的克隆催化亚基进行了直接酶抑制实验。将酶与不同浓度的SR-12813、底物和辅因子一起孵育，测量HMG-CoA向甲羟戊酸的转化。[1] |
| 细胞实验 |
氚水掺入实验：将Hep G2细胞培养至80%汇合，用SR-12813预孵育1小时。然后加入³H₂O，再孵育1小时。提取脂质，通过薄层色谱分离后测定放射性掺入胆固醇和脂肪酸组分的量。[1]
乙酸掺入实验：Hep G2细胞在含或不含SR-12813的5% LPDS培养基中预孵育16小时。然后加入[¹⁴C]乙酸孵育1.5小时。提取脂质，通过TLC分离胆固醇并测量放射性。[1] 甲羟戊酸掺入实验：在加入[³H]甲羟戊酸内酯前20分钟，用SR-12813处理Hep G2细胞。孵育2小时后，提取非皂化脂质并通过TLC分析，测量标记物掺入胆固醇的情况。[1] HMG-CoA还原酶蛋白免疫印迹：用SR-12813处理Hep G2细胞不同时间。用含蛋白酶抑制剂和去垢剂的裂解缓冲液裂解细胞。测定蛋白浓度，等量蛋白通过SDS-PAGE分离。将蛋白转移至膜上，封闭后，用兔抗人HMG-CoA还原酶催化亚基抗体孵育，再用辣根过氧化物酶标记的二抗孵育。使用增强化学发光法检测。通过光密度测定法量化条带强度。[1] HMG-CoA还原酶降解脉冲追踪实验：Hep G2细胞在无甲硫氨酸培养基中预孵育，然后用[³⁵S]甲硫氨酸脉冲标记1小时。随后将培养基更换为含过量未标记甲硫氨酸的培养基，并加入SR-12813或溶剂。在不同追踪时间点收集细胞。使用特异性抗体从细胞裂解液中免疫沉淀HMG-CoA还原酶。通过SDS-PAGE和荧光自显影分析免疫沉淀物。通过光密度测定法量化HMG-CoA还原酶条带的放射性以确定降解速率。[1] LDL受体活性测定：Hep G2细胞与SR-12813在5% LPDS培养基中过夜孵育。然后将培养基更换为含¹²⁵I-LDL的培养基。孵育2.5小时后，测量细胞表面结合和降解的¹²⁵I-LDL。在含过量未标记LDL的平行孔中评估非特异性结合/降解。[1] mRNA分析：用SR-12813处理Hep G2细胞21小时。分离mRNA，通过琼脂糖-甲醛凝胶电泳分离，并转移至尼龙膜。用³²P标记的HMG-CoA还原酶和LDL受体cDNA探针杂交。通过光密度测定法分析放射自显影图。[1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
SR12813 is an organic phosphonate that is the tetraethyl ester of [2-(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenyl)ethene-1,1-diyl]bis(phosphonic acid). It has a role as a pregnane X receptor agonist. It is a member of phenols and an organic phosphonate.
SR-12813 is chemically named tetra-ethyl 2-(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxy-phenyl)ethenyl-1,1-bisphosphonate. [1] It is a bisphosphonate compound. [1] The primary mechanism of action identified in this study is the enhancement of HMG-CoA reductase protein degradation, leading to inhibition of cholesterol synthesis. This subsequently triggers a compensatory increase in HMG-CoA reductase and LDL receptor gene expression. The increased LDL receptor activity is proposed to contribute to its plasma cholesterol-lowering effect in vivo. [1] The action of SR-12813 is independent of mevalonate-derived metabolites and does not involve direct inhibition of HMG-CoA reductase enzyme activity or its regulation via phosphorylation. [1] Preliminary experiments suggested that SR-12813-mediated HMG-CoA reductase degradation might involve non-lysosomal, calcium-dependent proteases (calpains), as it was attenuated by the calpain inhibitor N-acetyl-Leu-Leu-norleucinal. [1] |
| 分子式 |
C24H42O7P2
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|---|---|
| 分子量 |
504.53368
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| 精确质量 |
504.241
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| CAS号 |
126411-39-0
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| PubChem CID |
446313
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.117g/cm3
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| 沸点 |
552.6ºC at 760mmHg
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| 闪点 |
288ºC
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| 蒸汽压 |
8.02E-13mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.504
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| LogP |
7.817
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| tPSA |
110.91
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
13
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| 重原子数目 |
33
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| 分子复杂度/Complexity |
660
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
YQLJDECYQDRSBI-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H42O7P2/c1-11-28-32(26,29-12-2)21(33(27,30-13-3)31-14-4)17-18-15-19(23(5,6)7)22(25)20(16-18)24(8,9)10/h15-
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| 化学名 |
4-[2,2-bis(diethoxyphosphoryl)ethenyl]-2,6-ditert-butylphenol
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| 别名 |
GW 485801; GW-485801; GW485801; SR 12813; SR-12813; SR12813
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 50 mg/mL (~99.10 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.96 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.96 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9820 mL | 9.9102 mL | 19.8204 mL | |
| 5 mM | 0.3964 mL | 1.9820 mL | 3.9641 mL | |
| 10 mM | 0.1982 mL | 0.9910 mL | 1.9820 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
24,25-Epoxycholesterol
(Z)-Ganoderenic acid K
Fluvastatin lactone
Ganoderic acid SZ
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COA
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