| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Stearoylethanolamide binds to specific binding sites (SBS) on C6 cell membranes, distinct from CB1, CB2, or vanilloid receptors.
Binding affinity: dissociation constant Kd = 264 ± 27 pM. Maximum binding Bmax = 343 ± 11 fmol·mg protein⁻¹. [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在大鼠、小鼠和人类的大脑中，硬脂酰乙醇胺 (SEA) 和内源性大麻素花生四烯酸乙醇胺 (AEA) 的含量相似。与 AEA 不同，硬脂酰乙醇胺是一种具有促凋亡作用的内源性大麻素样物质，其受 NO 调控的方式也不同 [1]。
硬脂酰乙醇胺 (0.1–1 μM) 呈剂量依赖性地抑制 C6 细胞中的一氧化氮合酶 (NOS) 活性（在 0.1、0.5 和 1 μM 浓度下分别抑制至对照组的 70±7%、55±5% 和 35±4%），但不影响腺苷酸环化酶 (AC) 活性。 CB1受体拮抗剂SR141716（10 μM）或百日咳毒素（PTX，5 μg/ml）均不能阻止NOS抑制，但香草醛受体拮抗剂辣椒素（Caps，10 μM）可部分（约50%）阻止NOS抑制。相反，2-花生四烯酸甘油酯（2-AG，1 μM）可增强NOS活性（至对照组的250±25%）并抑制腺苷酸环化酶（AC）（至对照组的30±3%）；SR141716（0.1 μM）或PTX可拮抗这些作用，而Caps则无此作用。 [1] 硬脂酰乙醇胺 (2.5 μM) 单独使用并不能降低福斯克林诱导的 C6 细胞中 cAMP 水平，而 AEA (2.5 μM) 则可将 cAMP 水平从 10±1 pmol/10⁶ 个细胞降低至 6.0±0.5 pmol/10⁶ 个细胞。SEA (2.5 μM) 与 AEA 共同孵育可进一步将 cAMP 水平降低至 3.0±0.3 pmol/10⁶ 个细胞。[1] 硬脂酰乙醇胺 (0.1–1 μM) 以剂量和时间依赖的方式诱导 C6 细胞凋亡：48 小时后，凋亡小体数量分别比对照组增加了 2.0±0.2 倍 (0.1 μM)、3.2±0.3 倍 (0.5 μM) 和 4.4±0.5 倍 (1 μM)。 CB1受体激动剂HU-210 (1 μM) 使SEA (0.1 μM) 诱导的细胞凋亡增加近一倍（至3.8±0.4倍），而NOS抑制剂L-NAME (500 μM) 可阻断这一作用。过氧亚硝酸盐供体SIN-1 (1 mM) 也使SEA诱导的细胞凋亡增加一倍（至3.8±0.4倍）。Caps (10 μM) 使SEA诱导的细胞凋亡减少约50%（至1.5±0.1倍）。脂氧合酶抑制剂ETYA (10 μM) 和环氧合酶抑制剂吲哚美辛 (10 μM) 完全阻断了SEA诱导的细胞凋亡，而MAP激酶抑制剂PD98059 (10 μM) 和磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂渥曼青霉素 (10 μM) 则无此作用。 [1] 硬脂酰乙醇胺 (0.1–1 μM) 在 6 小时后引起剂量依赖性的线粒体解偶联（通过 JC-1 荧光测定）：与对照组相比，0.1 μM 组为 2.3±0.3 倍，0.5 μM 组为 4.5±0.5 倍，1 μM 组为 6.3±0.6 倍。它还引起细胞内钙离子浓度（Fluo-3 AM）的快速升高（6 分钟内）：与对照组相比，0.1 μM 组为 2.4±0.3 倍，0.5 μM 组为 2.6±0.3 倍，1 μM 组为 3.0±0.3 倍。HU-210 (1 μM) 或 SIN-1 (1 mM) 进一步增强了这些效应，而 L-NAME (500 μM) 或 Caps (10 μM) 可部分拮抗这些效应。[1] |
| 酶活实验 |
[³H]SEA 结合实验：将 C6 细胞膜（200×10⁶ 个细胞/实验）与 [³H]SEA（0–1000 pM）在 37°C 下于 0.5 ml 终体积中孵育 30 分钟，然后快速通过玻璃纤维滤膜过滤。在 1 μM 未标记 SEA 存在下测定非特异性结合。采用非线性回归分析结合数据，计算 Kd 和 Bmax。置换实验使用 500 pM [³H]SEA 和 1 μM 的各种测试化合物。[1]
树脂毒素结合实验：通过快速过滤实验评估 100 pM [³H]树脂毒素与 C6 细胞的结合。在 1 μM 未标记激动剂存在下测定非特异性结合。 [1] 一氧化氮合酶 (NOS) 活性测定：将 C6 细胞（5×10⁶/组）与 SEA 或 2-AG 在 37°C 下孵育 15 分钟，然后洗涤、匀浆，并与 [³H]精氨酸孵育。测定产物 [³H]瓜氨酸的生成量。NOS 活性以每分钟每毫克蛋白释放的瓜氨酸皮摩尔数表示。对于 PTX 处理，在加入化合物前，将细胞与 5 μg/ml PTX 在 37°C 下预孵育 3 小时。[1] 腺苷酸环化酶 (AC) 活性测定：使用 cAMP 酶免疫测定法测定细胞提取物中的 cAMP 含量来确定 AC 活性。将细胞（5×10⁶/组）与 1 μM 福斯克林和待测化合物处理 15 分钟，然后匀浆，并定量 cAMP 水平。AC 活性以每分钟每毫克蛋白释放的 cAMP 皮摩尔数表示。 [1] SEA 摄取 (SMT) 测定：将 C6 细胞（2×10⁶/组）与 300 nM [³H]SEA 在 37°C 或 4°C 下孵育不同时间，然后用含 1% BSA 的 PBS 缓冲液洗涤。提取脂质并测定放射性。从 37°C 下的摄取量中减去 4°C 下的摄取量（非载体介导），得到载体介导的转运。动力学分析中，将细胞与 0–1000 nM [³H]SEA 孵育 15 分钟。通过非线性回归计算表观 Km 和 Vmax。Q10 计算为 30°C 与 20°C 下摄取量的比值。抑制剂研究中，将化合物直接加入测定缓冲液中。对于 CCCP，在加入 [³H]SEA 之前，将细胞与 50 μM CCCP 在 37°C 下预孵育 15 分钟。 [1] FAAH 水解测定：将 C6 细胞提取物与 [³H]SEA 在 pH 9.0、37°C 下孵育 15 分钟。终止反应后，通过反相高效液相色谱法 (HPLC) 测定释放的 [³H]硬脂酸。FAAH 活性以每分钟每毫克蛋白质释放的硬脂酸皮摩尔数 (pmol) 表示。表观 Km 和 Vmax 通过非线性回归计算。抑制剂研究中，化合物直接加入测定缓冲液中。使用不同底物浓度研究了 SEA 和 AEA 之间的竞争性抑制。同时还测试了 pH 5.0 下的水解情况。[1] |
| 细胞实验 |
细胞培养和凋亡检测：将大鼠C6胶质瘤细胞培养于含10%胎牛血清的Ham's F-12培养基中，置于37℃、5% CO₂培养箱中培养。化合物处理48小时后，以200g离心5分钟收集悬浮细胞和脱落细胞。采用台盼蓝染色排除法评估细胞活力。使用细胞死亡检测ELISA试剂盒定量检测细胞凋亡，该试剂盒可检测细胞质中组蛋白相关DNA片段。通过流式细胞术，以碘化丙啶（50 μg/ml）染色定量凋亡小体，验证上述结果（对照组细胞每100个细胞中凋亡小体数量<4.0±1.0个）。 [1]
线粒体解偶联测定：用化合物处理C6细胞，然后在37°C下与20 μM JC-1探针孵育20分钟，洗涤后，通过流式细胞术（530/570 nm处的FL1/FL2散点图）分析形态正常的细胞。[1] 细胞内钙测定：洗涤C6细胞，在37°C避光条件下与10 μM Fluo-3 AM孵育40分钟，然后重悬于无血清培养基中。在530 nm处记录荧光（带宽30 nm），细胞计数约为1000个/秒；每10秒记录3000个事件的平均荧光值。 [1] SEA 和 AEA 摄取比较：采用与 [³H]SEA 类似的方法测定 C6 细胞对 [³H]AEA (200 nM) 的摄取，并测试 SEA (浓度高达 1 μM) 对 AEA 摄取的影响。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
摄取动力学（SMT）：C6细胞对硬脂酰乙醇胺的摄取具有温度依赖性（Q₁₀ ≈ 1.5）、时间依赖性（t₁/₂ ≈ 5 min）和饱和性。表观Km = 398 ± 58 nM，Vmax = 82 ± 5 pmol·min⁻¹·mg蛋白⁻¹。从37°C的摄取值中减去4°C的摄取值，以确定载体介导的转运。CCCP（50 μM）不影响SMT活性，表明其不依赖于能量。NO供体（SNP、SNAP）和过氧亚硝酸盐供体SIN-1显著抑制SMT，但AEA转运体抑制剂（VDM11、N-4-羟基苯基花生四烯酸酰胺）、过量的AEA或2-AG（浓度高达1 μM）或Caps（10 μM）均不抑制SMT。 [1]
水解（FAAH）动力学：C6 细胞水解 [³H]SEA 符合米氏动力学：表观 Km = 6 ± 1 μM，Vmax = 300 ± 23 pmol·min⁻¹·mg 蛋白⁻¹。在 pH 5.0 时，水解几乎检测不到。SEA 的催化效率 (Vmax/Km) 比 AEA 低约 8 倍。FAAH 抑制剂（PMSF，花生四烯酸三氟甲基酮，10 μM）完全抑制了 SEA 的水解，过量的 AEA 或 2-AG (10 μM) 也具有同样的效果。NO 供体或 SIN-1 对 FAAH 活性没有影响。AEA 竞争性抑制 SEA 的水解 (Ki = 7 ± 1 μM)，SEA 竞争性抑制 AEA 的水解 (Ki = 5 ± 1 μM)。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
N-(十八烷酰)乙醇胺是一种N-酰基乙醇胺18:0，是十八烷酸的乙醇酰胺。它在功能上与十八烷酸相关。硬脂酰乙醇胺(SEA)是一种内源性大麻素样化合物，在大鼠、小鼠和人脑中的含量高于花生四烯酸乙醇胺(AEA)。它不与CB1或CB2受体结合（无法置换[³H]CP55,940），也不与香草醛受体VR1结合（无法置换[³H]树脂毒素）。其促凋亡活性由不同于大麻素受体和香草醛受体的特异性结合位点(SBS)介导。SEA通过抑制FAAH介导的AEA降解来增强AEA的活性（协同效应）。 SEA触发的细胞凋亡途径涉及细胞内钙离子浓度升高、脂氧合酶和环氧合酶的激活以及线粒体解偶联，但不涉及MAP激酶或PI3激酶。相反，CB1受体的激活通过增加NO的产生来增强SEA诱导的细胞凋亡，NO抑制SMT（SEA的摄取），从而延长SEA的细胞外半衰期。这种调控与AEA的调控相反，在AEA中，NO会增加AEA的摄取并降低其细胞外浓度。[1]
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| 分子式 |
C20H41NO2
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|---|---|
| 分子量 |
327.54504
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| 精确质量 |
327.313
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| CAS号 |
111-57-9
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| PubChem CID |
27902
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| 密度 |
0.9±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
486.0±28.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
98.5 °C
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| 闪点 |
247.7±24.0 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±2.8 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.464
|
| LogP |
6.88
|
| tPSA |
49.33
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
2
|
| 可旋转键数目(RBC) |
18
|
| 重原子数目 |
23
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| 分子复杂度/Complexity |
244
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
OTGQIQQTPXJQRG-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H41NO2/c1-2-3-4-5-6-7-8-9-10-11-12-13-14-15-16-17-20(23)21-18-19-22/h22H,2-19H2,1H3,(H,21,23)
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| 化学名 |
N-(2-hydroxyethyl)octadecanamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~33.33 mg/mL (~101.76 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (7.63 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.63 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.0530 mL | 15.2648 mL | 30.5297 mL | |
| 5 mM | 0.6106 mL | 3.0530 mL | 6.1059 mL | |
| 10 mM | 0.3053 mL | 1.5265 mL | 3.0530 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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