Taraxasterol

别名: 蒲公英甾醇;蒲公英;蒲公英甾醇对照品;蒲公英甾醇(标准品)
目录号: V34024 纯度: ≥98%
蒲公英甾醇是从蒲公英中提取的五环三萜类化合物。
Taraxasterol CAS号: 1059-14-9
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
蒲公英甾醇是从蒙古蒲公英中提取的一种五环三萜类化合物。蒲公英甾醇具有代谢和抗炎作用。
蒲公英甾醇是从中药蒲公英中分离得到的一种五环三萜类化合物。据报道,它具有抗炎和免疫调节特性。[1]
蒲公英甾醇是从蒲公英属植物中分离得到的一种五环三萜类化合物。先前的研究表明,它在体外和体内均具有抗炎作用,包括对脂多糖(LPS)诱导的内毒素休克、卵清蛋白诱导的过敏性哮喘、佐剂诱导的关节炎和酒精性肝损伤的保护作用。[2]
蒲公英甾醇是从蒲公英中分离得到的,具有已知的抗炎和抗氧化作用。据报道,蒲公英甾醇能够抑制 RAW264.7 细胞中 LPS 诱导的炎症介质,并能保护肺部免受急性损伤和香烟烟雾(CS)诱导的炎症。[3] 蒲公英甾醇是从蒲公英(Taraxacum officinale)中分离得到的一种五环三萜类化合物,具有强大的抗炎特性,但在此研究之前,尚未有研究探讨其对 LPS 诱导的急性肺损伤的影响。[4]
生物活性&实验参考方法
靶点
Taraxasterol inhibits the nuclear factor‑kappa B (NF‑κB) signaling pathway by preventing LPS‑induced NF‑κB translocation from the cytoplasm to the nucleus. [1]
Taraxasterol down‑regulates the expressions of toll‑like receptor 2 (TLR2), TLR4, and NF‑κB p65, and decreases the expression ratio of Bax/Bcl‑2 in hepatic tissues. [2]
Taraxasterol activates liver X receptor α (LXRα) and suppresses LPS‑induced NF‑κB activation. It also inhibits iNOS, COX‑2, VCAM‑1, and ICAM‑1 expression. [3]
Taraxasterol inhibits the phosphorylation of IκB‑α, p65 NF‑κB, p46‑p54 JNK, p42‑p44 ERK, and p38, thereby blocking NF‑κB and MAPK signaling pathways. [4]
体外研究 (In Vitro)
在LPS诱导的RAW 264.7小鼠巨噬细胞中,蒲公英甾醇(2.5、5或12.5 µg/ml)预处理1小时可剂量依赖性地抑制一氧化氮(NO)(p<0.05或0.01)、前列腺素E2(PGE2)(5和12.5 µg/ml时p<0.01)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)(p<0.05或0.01)的产生。免疫细胞化学分析表明,蒲公英甾醇可阻止LPS诱导的NF-κB p65从细胞质向细胞核的转位。 [1]在LPS刺激的RAW 264.7细胞中,浓度为2.5、5和12.5 µg/ml的蒲公英甾醇(Taraxasterol)均无细胞毒性作用(MTT法)。它呈剂量依赖性地降低NO和PGE2的产生,并降低TNF-α、IL-1β和IL-6的水平。[1]在LPS刺激的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中,浓度高达15 µg/ml的蒲公英甾醇(Taraxasterol)(5、10和15 µg/ml)无细胞毒性(18 µg/ml会降低细胞活力)。它呈浓度依赖性地降低TNF-α、IL-8、PGE2和NO的产生。 Western blot结果显示,蒲公英甾醇可降低iNOS、COX-2、VCAM-1、ICAM-1和NF-κB的活化,并增加LXRα的表达。蒲公英甾醇对TNF-α、IL-8、PGE2和NO的抑制作用可被LXRα抑制剂香叶基香叶基二磷酸(GGPP,20 µM)逆转。[3]
体内研究 (In Vivo)
在Con A诱导的小鼠急性肝损伤模型中,蒲公英甾醇(每日一次,口服剂量分别为10、5和2.5 mg/kg,连续7天)呈剂量依赖性地降低肝脏指数(10 mg/kg组显著,p<0.01)、血清ALT和AST水平(10和5 mg/kg组p<0.01或p<0.05)、肝脏MDA水平,并增加肝脏GSH和SOD的生成。此外,蒲公英甾醇还抑制血清TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-γ和IL-4的释放。组织学分析显示炎症细胞浸润和坏死减少,TUNEL染色显示肝细胞凋亡减少。Western blot结果显示肝脏TLR2、TLR4和NF-κB p65表达下调,Bax/Bcl-2比值降低。 [2]在LPS诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠模型中,蒲公英甾醇(在鼻内LPS给药前1小时腹腔注射,剂量分别为2.5、5和10 mg/kg)呈剂量依赖性地降低了肺湿/干比、髓过氧化物酶(MPO)活性、支气管肺泡灌洗液(BALF)中的总细胞数、中性粒细胞数和巨噬细胞数,并降低了BALF和血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、NO、COX-2和PGE2的水平。组织病理学显示肺损伤减轻。蛋白质印迹分析显示IκB-α、p65 NF-κB、p38、JNK和ERK的磷酸化受到抑制。在一项生存研究中,蒲公英甾醇(在 LPS 20 mg/kg 腹腔注射前 1 小时腹腔注射 2.5、5、10 mg/kg)在 7 天内分别提供了 26%、58% 和 78% 的保护率(p<0.05 或 p<0.01)。[4]
细胞实验
采用 MTT 法测定细胞活力。将 RAW 264.7 细胞(4×10⁵ 个细胞/ml)接种于 96 孔板中,用蒲公英甾醇(0-12.5 µg/ml)处理 2 小时,然后用 LPS(1 µg/ml)刺激 18 小时。加入 MTT(50 µl)孵育 4 小时后,弃去 MTT,用 DMSO(100 µl/孔)裂解细胞。在 570 nm 波长处测定光密度值。[1]采用 Griess 反应测定 NO 生成。将 RAW 264.7 细胞(4×10⁵ 个细胞/ml)接种于 24 孔板中,用蒲公英甾醇(2.5、5、12.5 µg/ml)预处理 1 小时,然后用 LPS(1 µg/ml)刺激 24 小时。将上清液与等体积的格里斯试剂混合,室温孵育15分钟,并在540 nm处读取吸光度。亚硝酸盐浓度根据亚硝酸钠标准曲线确定。[1]
采用ELISA法测定PGE2和细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)。对于PGE2和NO,细胞按上述方法处理(LPS处理24小时)。对于细胞因子,细胞先用蒲公英甾醇预处理1小时,然后用LPS刺激6小时;收集上清液并按照试剂盒说明书进行检测。 [1]
NF-κB的免疫细胞化学分析:将RAW 264.7细胞接种于24孔板的玻璃盖玻片上,用蒲公英甾醇(2.5、5、12.5 µg/ml)预处理1小时,然后用LPS(1 µg/ml)刺激1小时。细胞用4%甲醛固定30分钟,用3% Triton X-100透化10分钟,用5% BSA/PBS封闭30分钟,然后与兔抗NF-κB/p65多克隆抗体孵育,随后进行Cy3标记的抗兔IgG和DAPI染色。荧光信号通过荧光显微镜进行分析。[1]
对于HUVECs,细胞活力通过MTT法测定。将96孔板中的细胞与蒲公英甾醇孵育1小时,然后用LPS刺激18小时,再加入MTT孵育3小时,最后加入DMSO(150 µl/孔)溶解甲臜。[3]
TNF-α和IL-8的ELISA检测:HUVECs预先用蒲公英甾醇处理1小时,然后用LPS处理24小时;收集上清液,并用ELISA试剂盒进行分析。[3]
HUVECs中NO的测定:采用与上述相同的处理方法,然后用Griess试剂测定上清液中的亚硝酸盐水平。[3]
HUVECs的Western blot分析:用含有蛋白酶抑制剂混合物的RIPA缓冲液提取全细胞蛋白;将 40 µg 蛋白质在 12% SDS-PAGE 上分离,转移到 PVDF 膜上,与针对 VCAM-1、ICAM-1、iNOS、COX-2、NF-κB、LXRα 的一抗孵育,然后与 HRP 标记的二抗孵育,并用化学发光检测试剂盒进行显色。[3]
动物实验
对于Con A诱导的急性肝损伤:将雄性ICR小鼠(18-22 g)随机分为6组(每组n=10)。蒲公英甾醇以10、5或2.5 mg/kg的剂量溶于0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)中,每日一次,连续7天。以联苯酯(200 mg/kg)作为阳性对照。正常组和Con A组给予等体积的0.5% CMC-Na。在第7天,末次给药1小时后,除正常组外,所有小鼠均经尾静脉注射单剂量Con A(18 mg/kg)。8小时后,从眼眶后静脉丛采集血液,通过颈椎脱臼处死小鼠,并收集肝组织。[2]
对于LPS诱导的急性肺损伤和存活率:雄性BALB/c小鼠(18-20 g)。为观察小鼠存活情况,腹腔注射LPS(20 mg/kg)。在LPS刺激前1小时,腹腔注射蒲公英甾醇(2.5、5、10 mg/kg,溶于PBS)。每12小时监测一次小鼠存活情况,持续7天。为研究急性肺损伤(ALI),将小鼠随机分为7组:对照组、单独注射蒲公英甾醇(10 mg/kg)组、LPS组、蒲公英甾醇(2.5、5、10 mg/kg)+LPS组和地塞米松(0.5 mg/kg)+LPS组。在鼻内滴注LPS(10 µg,溶于50 µl PBS)前1小时,腹腔注射50 µl蒲公英甾醇(溶于PBS)。对照组小鼠仅注射PBS。7小时后,通过气管插管收集支气管肺泡灌洗液(BALF),并加入PBS(共1.3 ml)。取出肺组织进行湿重/干重比、髓过氧化物酶 (MPO) 活性测定、组织学分析和蛋白质印迹分析。在另一项实验中,于脂多糖 (LPS) 灌注 1 小时后腹腔注射蒲公英甾醇,以评估其治疗效果。[4]
参考文献

[1]. Effects of taraxasterol on inflammatory responses in lipopolysaccharide-induced RAW 264.7 macrophages. J Ethnopharmacol. 2012 May 7;141(1):206-11.

[2]. Sang R, Yu Y, Ge B, Xu L, Wang Z, Zhang X. Taraxasterol from Taraxacum prevents concanavalin A-induced acute hepatic injury in mice via modulating TLRs/NF-κB and Bax/Bc1-2 signalling pathways. Artif Cells Nanomed Biotechnol. 2019;47(1):3929-3937.

[3]. Anti-inflammatory effects of taraxasterol on LPS-stimulated human umbilical vein endothelial cells. Inflammation, 2018, 41: 1755-1761.

[4]. Protective effect of taraxasterol on acute lung injury induced by lipopolysaccharide in mice. International Immunopharmacology, 2014, 19(2): 342-350.

其他信息
据报道,蒲公英素存在于日本海鞘(Balanophora japonica)、巴勒斯坦海鞘(Cota palaestina)以及其他具有相关数据的生物体中。另见:蒲公英甾醇(注:已移至此处)。
蒲公英甾醇通过阻断NF-κB通路抑制LPS诱导的巨噬细胞炎症反应,提示其具有作为炎症介导疾病治疗药物的潜力。[1]
蒲公英甾醇通过抑制TLRs/NF-κB炎症信号通路并促进Bax/Bcl-2抗凋亡信号通路,预防Con A诱导的急性肝损伤,支持其在免疫介导的肝损伤治疗中的潜在应用。 [2]蒲公英甾醇通过激活LXRα抑制HUVECs中的血管炎症,进而抑制LPS诱导的NF-κB激活,可能是一种潜在的心血管疾病抗炎药物。[3]蒲公英甾醇通过抑制NF-κB和MAPK激活,降低促炎细胞因子的表达,从而保护小鼠免受LPS诱导的急性肺损伤,可能是一种潜在的预防和治疗急性肺损伤的药物。[4]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C30H50O
分子量
426.7174
精确质量
426.386
CAS号
1059-14-9
PubChem CID
610148
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.0±0.1 g/cm3
沸点
488.2±14.0 °C at 760 mmHg
熔点
221-222°
闪点
217.0±12.4 °C
蒸汽压
0.0±2.8 mmHg at 25°C
折射率
1.534
LogP
11.06
tPSA
20.23
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
1
可旋转键数目(RBC)
0
重原子数目
31
分子复杂度/Complexity
766
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
XWMMEBCFHUKHEX-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C30H50O/c1-19-11-14-27(5)17-18-29(7)21(25(27)20(19)2)9-10-23-28(6)15-13-24(31)26(3,4)22(28)12-16-30(23,29)8/h20-25,31H,1,9-18H2,2-8H3
化学名
4,4,6a,6b,8a,12,14b-heptamethyl-11-methylidene-1,2,3,4a,5,6,6a,7,8,9,10,12,12a,13,14,14a-hexadecahydropicen-3-ol
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
Ethanol : ~5.5 mg/mL (~12.89 mM )
DMSO : ~1 mg/mL (~2.34 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.55 mg/mL (1.29 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,将 100 μL 5.5 mg/mL 澄清乙醇储备液加入到 400 μL PEG300 中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 0.55 mg/mL (1.29 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 5.5 mg/mL 澄清 EtOH 储备液添加到 900 μL 玉米油中并充分混合。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.3435 mL 11.7173 mL 23.4346 mL
5 mM 0.4687 mL 2.3435 mL 4.6869 mL
10 mM 0.2343 mL 1.1717 mL 2.3435 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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