Tenacissoside I

别名: Tenacissoside I; 191729-44-9; [(1S,3R,6R,7S,8S,9S,10S,11S,14S,16S)-6-acetyl-8-acetyloxy-14-[(2R,4R,5R,6R)-5-[(2S,3R,4R,5R,6R)-3,5-dihydroxy-4-methoxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-4-methoxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-7,11-dimethyl-2-oxapentacyclo[8.8.0.01,3.03,7.011,16]octadecan-9-yl] benzoate; Pregnan-20-one, 12-(acetyloxy)-11-(benzoyloxy)-3-[[2,6-dideoxy-4-O-(6-deoxy-3-O-methyl-beta-D-allopyranosyl)-3-O-methyl-beta-D-arabino-hexopyranosyl]oxy]-8,14-epoxy-, (3beta,5alpha,11alpha,12beta,14beta,17alpha)-; 通关藤苷I;通关藤皂苷I; 通关藤苷H;通关藤苷I(标准品);TENACISSOSIDE I 通关藤苷I
目录号: V32043 纯度: ≥98%
Tenacissoside I 是一种来自 Marsdenia tenacissima 的 C21 类固醇,在 M. tenacissima 中的浓度较高。
Tenacissoside I CAS号: 191729-44-9
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
Tenacissoside I 是一种来自 Marsdenia tenacissima 的 C21 类固醇,在 M. tenacissima 中的浓度较高。
生物活性&实验参考方法
靶点
Natural product
体外研究 (In Vitro)
龙须草是一种广泛应用于中医的抗癌草药,已被证明具有抗癌活性。然而,对其代谢特征的研究很少。Tenacigenin B是M.tengissima中C-21类固醇的主要甾体骨架。在M.tengissima中检测到相对较高水平的Tenacissoside H和Tenacissoide I。因此,我们通过超高效液相色谱和高分辨率质谱联用研究了它们在人肝微粒体中的代谢特征。通过精确的质量测量和MS/MS裂解行为初步鉴定了14种代谢物。发现羟基化反应是Tenacissoside H和TenacissosideI在人肝微粒体中的主要代谢途径,而Tenacigenin B的代谢途径涉及脱氢反应。这是首次在人肝微粒体中探索来自M.tengissima的C-21类固醇的代谢特征,这对后续的药代动力学和相互作用研究具有重要意义。体内或体外的生物转化可能会影响化合物的结构并改变其活性。鉴定它们的裂解行为和代谢产物为进一步了解M.tengissima的抗肿瘤活性提供了有价值的新信息[1]。
1. 肝微粒体代谢孵育实验:将Tenacissoside I(10 μM)与HLM/RLM在含NADPH再生缓冲液(为细胞色素P450酶提供辅因子)的反应体系中37℃孵育0、15、30、60、90、120 min,加入冰甲醇(1:1,v/v)终止反应并沉淀蛋白,离心后取上清液进行UHPLC-ESI-Orbitrap MS/MS分析。结果显示,糖链水解为主要体外代谢途径(占总代谢量的62%),氧化代谢占28%[1]
2. 肠道菌群代谢实验:Tenacissoside I(20 μM)与大鼠肠道菌群匀浆在厌氧条件下37℃孵育0-48 h,甲醇终止反应后取上清液分析代谢产物。肠道菌群中其主要代谢途径为二糖链的完全水解生成通关藤苷元B,24 h转化率为75%,48 h转化率达88%[1]
体内研究 (In Vivo)
开发了一种特异、灵敏和准确的LC-MS/MS分析方法,用于同时测定大鼠血浆中的两种甾体糖苷,即藤甲苷H和藤甲苷I。使用安捷伦ZORBAX SB-C18柱和由甲醇-水-甲酸(70:30:0.1,v/v/v)组成的等度流动相系统,流速为0.3 mL/min。通过选定的反应监测模式扫描在正电离电喷雾质谱仪上进行分析。选择乙腈一步蛋白质沉淀法从血浆中提取分析物。蛇床子苷H和蛇床子皂苷I的定量下限为0.9 ng/mL。日内和日间精密度分别为2.03-11.56和3.76-11.62%,在所有质量控制水平下的准确度均<110.28%。将经验证的方法应用于大鼠经口灌胃龙须草提取物后的药代动力学研究[2]。
动物实验
1. 大鼠体内药代动力学研究:将雄性Sprague-Dawley大鼠(200-220 g,6-8周龄)随机分为6组(每组n=6),进行时间点取样。将Tenacissoside I以Marsdenia tenacissima提取物(经提取和纯化,确保Tenacissoside I含量固定)的形式,溶于0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)水溶液中,制成口服混悬液。采用灌胃法给药,剂量为10 μL/g体重(相当于50 mg/kg的Tenacissoside I)。分别于给药后 0.25、0.5、1、1.5、2、4、6、8、12 和 24 小时,从眼眶静脉丛采集血样(0.5 mL),离心获得血浆,并储存在 -80℃ 直至进行 LC-MS/MS 分析。为进行组织分布研究,分别于给药后 1、2、4 和 8 小时处死大鼠,并解剖、匀浆组织(小肠、肝脏、肾脏、脑、脾脏),进行代谢物检测[2]。
2. 体内代谢物谱分析研究:雄性 Sprague-Dawley 大鼠 (n=4) 单次灌胃给予 Tenacissoside I(100 mg/kg,溶于 DMSO-PEG400-生理盐水混合液中,最终 DMSO 浓度 < 0.5%)。分别于给药后 0-6、6-12、12-24 和 24-48 小时收集尿液和粪便样本;于给药后 0.5、1、2、4、6 和 8 小时收集血浆样本。所有样品在进行代谢物鉴定之前,均采用固相萃取(SPE)或液液萃取(LLE)进行预处理,然后进行UHPLC-ESI-Orbitrap MS/MS分析[1]
药代性质 (ADME/PK)
1. 体外代谢稳定性和代谢物:将Tenacissoside I与人肝微粒体(HLM)和大鼠肝微粒体(RLM)在37℃下孵育0-2小时;在HLM(半衰期=45分钟)和RLM(半衰期=38分钟)中表现出中等的代谢稳定性。在 HLM 孵育系统中共鉴定出 6 种主要代谢物,包括 3 种水解代谢物(M1-M3,由糖链裂解生成 tenacigenin B 及其单糖苷衍生物)和 3 种氧化代谢物(M4-M6,由苷元骨架在 C-23 和 C-27 位羟基化生成)[1]
2. 大鼠体内药代动力学参数:雄性 Sprague-Dawley 大鼠经口灌胃给予含有 Tenacissi I 的 Marsdenia tenacissima 提取物(相当于 50 mg/kg Tenacissi I),Tenacissoside I 的血浆峰浓度 (Cmax) 为 125.6 ng/mL,在给药后 1.5 小时达到 (Tmax = 1.5 h);血浆浓度-时间曲线下面积(AUC₀-24h)为 682.3 ng·h/mL,末端消除半衰期(t1/2)为 4.2 h。Tenacissoside I 的绝对口服生物利用度计算为 3.2%(生物利用度低,可能是由于糖链在肠道内广泛水解所致)[2]
3. 体内组织分布和代谢物:在给予 Tenacissoside I 的大鼠中,母体化合物的最高浓度在小肠中检测到(给药后 1 小时为 210.3 ng/g),其次是肝脏(给药后 2 小时为 85.7 ng/g);在血浆和脑组织中仅检测到痕量母体化合物(脑/血浆比值 < 0.05,表明其血脑屏障穿透性差)。体内主要代谢产物为tenacigenin B(苷元形式),在血浆、肝脏和尿液中均有检出,血浆中Cmax为82.4 ng/mL(Tmax = 2 h)[1]
4. 排泄特性:口服给药后24小时内,约18%的Tenacissoside I及其代谢产物经尿液排出(主要以tenacigenin B葡萄糖醛酸苷结合物的形式),65%经粪便排出(包括未代谢的母体化合物和水解代谢物)[1]
参考文献

[1]. Metabolic profiling of tenacigenin B, tenacissoside H and tenacissoside I using UHPLC-ESI-Orbitrap MS/MS. Biomed Chromatogr. 2016 Nov;30(11):1757-1765.

[2]. Simultaneous quantification of two steroidal glycosides after oral gavage of Marsdenia tenacissima extract in rats using a LC-MS/MS method. Biomed Chromatogr. 2015 Apr;29(4):633-40.

其他信息
据报道,在马斯登氏草(Marsdenia tenacissima)中发现了 Tenacissoside I,并有相关数据。
1. Tenacissoside I 是一种天然甾体糖苷,从马斯登氏草(一种用于抗肿瘤和抗炎治疗的传统中药)的茎和叶中分离得到,其化学结构由 Tenacigenin B(苷元)与 C-3 位上的二糖链(葡萄糖-鼠李糖)连接而成 [1][2]
2. Tenacissoside I 的口服生物利用度低,主要归因于其广泛的首过代谢:糖链在胃肠道中被肠道糖苷酶和肠道菌群酶迅速水解,生成苷元(tenacigenin B),后者在肝脏中通过氧化和结合进一步代谢 [1][2]
3.已鉴定的Tenacissoside I代谢物(尤其是tenacigenin B)被认为是体内主要的活性形式,因为母体化合物的全身暴露量较低,而且苷元比糖苷形式更容易穿透细胞膜[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C44H62O14
分子量
814.9547
精确质量
814.413
CAS号
191729-44-9
PubChem CID
91973812
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.3±0.1 g/cm3
沸点
850.8±65.0 °C at 760 mmHg
闪点
247.2±27.8 °C
蒸汽压
0.0±0.3 mmHg at 25°C
折射率
1.580
LogP
5.34
tPSA
178.04
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
14
可旋转键数目(RBC)
12
重原子数目
58
分子复杂度/Complexity
1550
定义原子立体中心数目
19
SMILES
O1[C@@]23C([H])([H])C([H])([H])[C@]4([H])C([H])([H])C([H])(C([H])([H])C([H])([H])[C@]4(C([H])([H])[H])[C@]2([H])C([H])(C([H])([C@]2(C([H])([H])[H])[C@@]([H])(C(C([H])([H])[H])=O)C([H])([H])C([H])([H])[C@]132)OC(C([H])([H])[H])=O)OC(C1C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=1[H])=O)OC1([H])C([H])([H])C([H])(C([H])(C([H])(C([H])([H])[H])O1)OC1([H])C([H])(C([H])(C([H])(C([H])(C([H])([H])[H])O1)O[H])OC([H])([H])[H])O[H])OC([H])([H])[H]
InChi Key
HXIHLBDNTFYMIC-ROIFRVDESA-N
InChi Code
InChI=1S/C44H62O14/c1-22(45)29-16-19-44-42(29,6)38(54-25(4)46)36(56-39(49)26-12-10-9-11-13-26)37-41(5)17-15-28(20-27(41)14-18-43(37,44)58-44)55-31-21-30(50-7)34(24(3)52-31)57-40-33(48)35(51-8)32(47)23(2)53-40/h9-13,23-24,27-38,40,47-48H,14-21H2,1-8H3/t23-,24-,27+,28+,29+,30-,31+,32-,33-,34-,35-,36+,37-,38-,40+,41+,42+,43+,44-/m1/s1
化学名
[(1S,3R,6R,7S,8S,9S,10S,11S,14S,16S)-6-acetyl-8-acetyloxy-14-[(2R,4R,5R,6R)-5-[(2S,3R,4R,5R,6R)-3,5-dihydroxy-4-methoxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-4-methoxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-7,11-dimethyl-2-oxapentacyclo[8.8.0.01,3.03,7.011,16]octadecan-9-yl] benzoate
别名
Tenacissoside I; 191729-44-9; [(1S,3R,6R,7S,8S,9S,10S,11S,14S,16S)-6-acetyl-8-acetyloxy-14-[(2R,4R,5R,6R)-5-[(2S,3R,4R,5R,6R)-3,5-dihydroxy-4-methoxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-4-methoxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-7,11-dimethyl-2-oxapentacyclo[8.8.0.01,3.03,7.011,16]octadecan-9-yl] benzoate; Pregnan-20-one, 12-(acetyloxy)-11-(benzoyloxy)-3-[[2,6-dideoxy-4-O-(6-deoxy-3-O-methyl-beta-D-allopyranosyl)-3-O-methyl-beta-D-arabino-hexopyranosyl]oxy]-8,14-epoxy-, (3beta,5alpha,11alpha,12beta,14beta,17alpha)-;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~100 mg/mL (~122.71 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.07 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.07 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.07 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.2271 mL 6.1353 mL 12.2707 mL
5 mM 0.2454 mL 1.2271 mL 2.4541 mL
10 mM 0.1227 mL 0.6135 mL 1.2271 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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