| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The primary target of TFLLR-NH2 is the Protease-Activated Receptor 1 (PAR1), which is also known as the thrombin receptor. PAR1 is a member of the PAR family of GPCRs and is activated by the coagulation protease thrombin. Thrombin cleaves the receptor's N-terminal extracellular domain, exposing a new N-terminus that acts as a tethered ligand, binding to the receptor's second extracellular loop to activate it. TFLLR-NH2 is a synthetic peptide that replicates this tethered ligand sequence and acts as a direct agonist at PAR1, with an EC50 of 1.9 μM. This peptide is highly selective for PAR1 over other PAR subtypes. Activation of PAR1 by TFLLR-NH2 leads to the dissociation of G proteins, typically Gαq, Gαi, and Gα12/13, which in turn activate various downstream signaling pathways, including phospholipase C (PLC), the mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway, and the Rho pathway. This leads to a wide range of cellular responses depending on the cell type, such as platelet aggregation, endothelial cell activation, and smooth muscle cell proliferation.
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| 体外研究 (In Vitro) |
PAR1激动剂可引起浓度依赖性的细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和神经元比例的增加。在10 μM TF-NH2刺激下，50-80%的已鉴定神经元表现出[Ca2+]i显著高于基础值（峰值196.5±20.4 nM，n=25）[1]。在TFLLR-NH2激活的血小板上清液中培养的SW620细胞中，E-钙黏蛋白表达上调，波形蛋白表达下调。在体外血小板培养系统的上清液中，发现TFLLR-NH2分泌的TGF-β1呈剂量依赖性增加[2]。
TFLLR-NH2(TFA)的主要体外活性是其对PAR1受体的强效激动作用。其活性由EC50值1.9 μM定量定义。在功能分析中，该肽可刺激PAR1介导的信号通路。例如，在表达PAR1的细胞中，TFLLR-NH2可诱导细胞内钙动员，这是Gαq偶联受体激活的经典指标。它还能刺激下游激酶（如ERK1/2）的磷酸化。该肽的效力通常可通过浓度-反应曲线来验证，其中激动剂浓度的增加会导致生物反应呈S形曲线增加。其对PAR1的选择性优于PAR2、PAR3和PAR4，这一关键特性使其成为研究PAR1生理功能且无脱靶效应的宝贵工具。除了其激动作用外，其高纯度（≥99%）也确保了实验结果的可靠性和可重复性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
将TF-NH2注射到大鼠爪中，可引起显著且持久的水肿。辣椒素和NK1R拮抗剂诱导的感觉神经消融可在1小时内使水肿减少44%，并在5小时内使水肿完全消退。在野生型小鼠中，TF-NH2可使膀胱、食管、胃、肠和胰腺中的伊文思蓝外渗增加2至8倍，但在PAR1−/−小鼠中未观察到此现象。NK1R拮抗剂可完全消除胃、食管和膀胱中的外渗[1]。在没有阿帕明的情况下，TFp-NH2在3-50 μM浓度下可引起显著的收缩，在0.3-50 μM浓度下可引起显著的舒张。当0.1 μM阿帕明抑制TFp-NH2诱导的舒张时，TFp-NH2诱导的收缩的浓度-反应曲线显著左移[3]。
与体外实验相比，TFLLR-NH2的体内研究较少，但该肽可用于研究PAR1的生理和病理生理作用。全身或局部给药后，TFLLR-NH2可激活多种组织中的PAR1。这可导致血管通透性增加、炎症反应调节和疼痛敏化等效应。该肽可用于血栓、炎症和癌症的动物模型，以研究PAR1信号通路在这些疾病过程中的作用。例如，可将其注射到啮齿动物的爪中以诱导炎症和疼痛，或静脉注射以研究其对血小板聚集和血栓形成的影响。由于蛋白水解降解，该肽在体内的半衰期较短，因此在实验设计中需要仔细考虑。其作用通常是快速且短暂的，反映了 GPCR 信号传导的性质。 |
| 酶活实验 |
体外酶或受体结合试验旨在定量分析TFLLR-NH2与PAR1受体的相互作用。放射性配体结合试验可使用过表达PAR1的细胞膜制备物进行。在这些试验中，将固定浓度的放射性标记PAR1拮抗剂（例如[³H]-haTRAP）与递增浓度的未标记TFLLR-NH2孵育。分离结合的放射性配体和游离配体后，测量结合的放射性配体的量。可以计算出TFLLR-NH2取代50%特异性结合的浓度（IC50），该值可衡量其对受体的亲和力。然而，由于TFLLR-NH2是一种激动剂，其在结合试验中测定的亲和力可能受受体构象状态的影响。通常优选功能性试验来表征其活性。
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| 细胞实验 |
体外细胞实验是表征TFLLR-NH2活性的主要方法。一种常用的检测方法是测量表达PAR1的细胞内钙动员。将细胞加载荧光钙指示剂（例如Fluo-4 AM），然后用不同浓度的TFLLR-NH2刺激细胞。使用荧光酶标仪测量荧光强度的增加。由此得到的浓度-反应曲线可得出EC50值，这是衡量化合物效力的标准指标（例如1.9 μM）。另一种功能性检测方法是测量MAPK通路激活情况，例如通过基于细胞的ELISA或Western blotting定量ERK1/2的磷酸化水平。在一个典型的实验中，将细胞进行血清饥饿处理，然后用TFLLR-NH2处理短时间（例如5-15分钟），并分析细胞裂解液中的磷酸化ERK水平。这些检测方法稳健可靠，可重复性高，能够直接测量化合物的生物活性，因此对于研究 PAR1 药理学至关重要。
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| 动物实验 |
TFLLR-NH2 常用于体内动物实验，以研究其在疼痛和炎症中的作用。例如，可将该肽皮下注射到小鼠后爪，诱导机械性和热性痛觉过敏（即对疼痛的敏感性增加）。然后测量动物对疼痛刺激（例如冯·弗雷氏纤维或热板）的反应，以量化疼痛阈值。该模型可用于研究 PAR1 在疼痛信号传导中的作用。在另一种模型中，可将该肽静脉注射或腹腔注射，以研究其对血小板聚集和血栓形成的影响。可测量血栓模型中血管阻塞所需的时间。这些实验通常包括一个接受载体的对照组和一个接受 TFLLR-NH2 的治疗组。该肽通常以特定剂量（例如 1-10 mg/kg）给药，并测量生理或行为终点。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
TFLLR-NH2 的药代动力学特性具有肽类药物的特征。作为一种肽类药物，它易受血液和组织中肽酶的快速蛋白水解降解，导致其半衰期极短。预计其口服生物利用度较低，通常采用注射给药。其分布容积可能仅限于细胞外间隙。清除主要通过代谢进行。在研究环境中，这些特性对于实验设计至关重要，因为该化合物的作用通常是急性的，需要直接给药。TFA 盐形式用于提高肽的溶解度和稳定性，这对于制备用于体外和体内研究的储备液至关重要。该肽应以冻干粉末的形式储存在 -20°C 下，以保持其完整性。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于TFLLR-NH2主要是一种研究工具而非治疗药物，因此其毒理学特征尚未得到充分记录。在基于细胞的实验中，其作用是通过其药理靶点PAR1介导的，高浓度时可导致受体脱敏和潜在的细胞应激。在体内，该肽的毒性预计与其药理活性相关，潜在的副作用包括炎症、疼痛和血栓形成，这些副作用均由PAR1过度激活引起。为确保实验室安全，应遵守肽类操作的标准预防措施，包括佩戴手套和护目镜，以避免皮肤接触和吸入粉末。该化合物仅供研究使用，不得用于人体治疗或诊断。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
TFLLR-NH2 是一种广泛用于研究 PAR1 信号通路的科研工具。其选择性和高效性使其成为解析 PAR1 在各种生物系统中作用的关键化合物。该肽的序列为 Thr-Phe-Leu-Leu-Arg-NH2，源自 PAR1 的天然配体。它常与 PAR1 拮抗剂联合使用，以验证观察到的效应的特异性。TFA 盐是最常见的形式，可提高其在水性缓冲液中的溶解度。该化合物可从主要化学品供应商处获得，纯度通常为 98% 或更高。它是研究止血、炎症和癌症的研究人员的必备工具。需要注意的是，该肽仅供科研使用。
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| 分子式 |
C33H54F3N9O8
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|---|---|
| 分子量 |
761.83257818222
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| 精确质量 |
761.404
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| CAS号 |
1313730-19-6
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| 相关CAS号 |
TFLLR-NH2;197794-83-5
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| PubChem CID |
71311619
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
307
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| 氢键供体(HBD)数目 |
10
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| 氢键受体(HBA)数目 |
13
|
| 可旋转键数目(RBC) |
20
|
| 重原子数目 |
53
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| 分子复杂度/Complexity |
1110
|
| 定义原子立体中心数目 |
6
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| SMILES |
C(F)(F)(F)C(=O)O.[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@H](O)C)(C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(=O)N)CCCNC(N)=N)CC1C=CC=CC=1
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| InChi Key |
QVNWOGSDGQDGHP-MKVNCOEFSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C31H53N9O6.C2HF3O2/c1-17(2)14-22(27(43)37-21(26(33)42)12-9-13-36-31(34)35)38-28(44)23(15-18(3)4)39-29(45)24(16-20-10-7-6-8-11-20)40-30(46)25(32)19(5)41;3-2(4,5)1(6)7/h6-8,10-11,17-19,21-25,41H,9,12-16,32H2,1-5H3,(H2,33,42)(H,37,43)(H,38,44)(H,39,45)(H,40,46)(H4,34,35,36);(H,6,7)/t19-,21+,22+,23+,24+,25+;/m1./s1
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| 化学名 |
(2S)-N-[(2S)-1-[[(2S)-1-amino-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanamide;2,2,2-trifluoroacetic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~100 mg/mL (~131.26 mM)
DMSO : ~100 mg/mL (~131.26 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.28 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.28 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.28 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 33.33 mg/mL (43.75 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.3126 mL | 6.5631 mL | 13.1263 mL | |
| 5 mM | 0.2625 mL | 1.3126 mL | 2.6253 mL | |
| 10 mM | 0.1313 mL | 0.6563 mL | 1.3126 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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