| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
- Xanthine oxidase (XO): IC₅₀ = 30 μM [1].
- DPPH radical: IC₅₀ = 7.5 μM [1]. - Superoxide anion (O₂•⁻): IC₅₀ = 10 μM [1]. - Peroxyl radical (RO₂•): IC₅₀ = 30 μM [1]. - Iron ions (Fe²⁺/Fe³⁺): metal chelation [1]. - NF‑κB, ERK, p38 (involved in apoptosis regulation) [2]. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
通过引起细胞膜开放、终止亚G1期、增加细胞数量、DNA片段化和氧活性含量，托宁宁A能有效抑制HepG-2细胞的增殖[2]。
- 托宁宁A (Th A) (10 μM) 可抑制大鼠肝微粒体中NADPH诱导的脂质过氧化61%，抑制Fe²⁺/抗坏血酸诱导的脂质过氧化65% [1]。 - 在10 μM浓度下，Th A抑制NADPH依赖性脂质过氧化，而不影响细胞色素P450（苯胺羟化酶）活性[1]。 - Th A 呈剂量依赖性地清除 DPPH 自由基（IC₅₀ = 7.5 μM；25 μM 时完全清除）、超氧阴离子（IC₅₀ = 10 μM）和过氧自由基（IC₅₀ = 30 μM），ESR 测定结果为 [1]。 - 在脱氧核糖测定中，Th A (10 μM) 在 EDTA 存在下抑制脱氧核糖降解 15%，在 EDTA 不存在下抑制 77%，表明其具有较强的铁螯合能力和中等的羟自由基清除能力 [1]。 - Th A 呈剂量依赖性地抑制黄嘌呤氧化酶活性：10 μM 时抑制率为 18%，IC₅₀ = 30 μM [1]。 - Th A（25 和 100 μM）分别抑制苯胺羟化酶 (CYP) 活性 5% 和 40%；10 μM 时无抑制作用 [1]。 - Th A 处理 24 小时后抑制 HepG-2 细胞 (IC₅₀ = 32.61 ± 0.78 μg/mL) 和 LO2 正常肝细胞 (IC₅₀ = 50.91 ± 1.03 μg/mL) 的增殖 [2]。 - Th A（25–45 μg/mL，24 小时）诱导 HepG-2 细胞凋亡：45 μg/mL 时凋亡率达到 82.6%（Annexin V-FITC/PI 双染）[2]。 - Th A 以剂量依赖的方式诱导亚 G1 期细胞比例：12.5 μg/mL 时为 1.7%，25 μg/mL 时为 3.0%，35 μg/mL 时为 13.3%（24 小时）；同时增加 G0/G1 期细胞比例 [2]。 - Th A（45 μg/mL，24 小时）使细胞内 ROS 水平较对照组（DCFH-DA 探针）升高约 250% [2]。 - Th A（25–45 μg/mL，24 小时）降低线粒体膜电位 (Δψₘ)：红色荧光强度从 99.4% 降至 69.3%，绿色荧光强度从 0.6% 升至 30.7%（JC-1 染色）[2]。 - Th A 下调 HepG-2 细胞中 Bcl-xL、cyclin D1 和 CDK4 mRNA 的表达（qPCR）[2]。 - Th A 以剂量依赖的方式诱导 caspase-3 和 caspase-9 的裂解（Western blot）[2]。 - Th A 降低核内 p65 蛋白水平（NF-κB），降低磷酸化 ERK 水平，并增加磷酸化 p38 水平（Western blot）[2]。 |
| 酶活实验 |
黄嘌呤氧化酶活性测定：测定体系（总体积 535 μL）包含 50 mM 磷酸钾缓冲液（pH 7.5）、0.15 mM 黄嘌呤溶液和 1% 甲醇或不同浓度的Th A。加入 35 μL 黄嘌呤氧化酶溶液（终浓度 0.2 U/mL）启动反应。在室温下，于 295 nm 波长处记录 3 分钟内的吸光度变化。别嘌呤醇用作标准抑制剂 [1]。
- 苯胺羟化酶 (CYP) 活性测定：通过测定洗涤后的大鼠肝微粒体中对氨基苯酚的生成量来评价该酶的活性。将微粒体与苯胺和 NADPH 生成系统孵育，并用分光光度法测定对氨基苯酚的生成量。测试了Th A（1–100 μM）对该单加氧酶活性的影响 [1]。 - 脱氧核糖测定法用于羟基自由基清除和铁螯合：反应混合物（终体积 1 mL）包含 20 mM KH₂PO₄-KOH 缓冲液（pH 7.4）、2.8 mM 脱氧核糖、100 μM FeCl₃、104 μM EDTA（添加时）、300 μM H₂O₂ 以及不同浓度的 Th A（1–10 μM）或血红三萜提取物。加入抗坏血酸 (100 μM) 启动反应。在 37 °C 孵育 1 小时后，加入 1 mL 1% 硫代巴比妥酸（溶于 0.05 M NaOH）和 1 mL 2.8% 三氯乙酸，然后在 100 °C 加热 20 分钟。在 532 nm 处测定丙二醛产物的吸光度。为了排除假阳性结果，进行了不含脱氧核糖的对照试验[1]。 |
| 细胞实验 |
MTT 细胞毒性试验：将 HepG-2 和 LO2 细胞（5 × 10⁴ 个细胞/mL）接种于 96 孔板中，培养 24 小时。移除上清液后，加入含有不同浓度 Th A（20–100 μg/mL）的新鲜培养基，继续培养 24 小时。然后，向每个孔中加入 100 μL 0.1% MTT 溶液（0.5 mg/mL），于 37 °C 孵育 4 小时。用二甲基亚砜溶解生成的甲臜晶体，并在 570 nm 处测定吸光度。细胞增殖抑制率计算公式为 1 – (CI_sample/CI_control) × 100% [2]。
- 实时细胞增殖监测：将 HepG-2 细胞（4 × 10³ 个细胞/孔）接种于带有集成微电子传感器的 96 孔 E-plate 中。平衡30分钟后，将培养板置于实时细胞电子传感系统中。24小时后，更换新鲜培养基，加入不同浓度的Th A，并连续记录24小时的细胞指数[2]。 - 流式细胞术凋亡分析：将HepG-2细胞用Th A（25、35、45 μg/mL）处理24小时后收集，用PBS洗涤，重悬于结合缓冲液中（2 × 10⁶ 个细胞/mL），加入5 μL Annexin V-FITC和5 μL碘化丙啶，冰上染色15分钟。使用流式细胞仪在488 nm处测定细胞凋亡率（每个样本检测10,000个事件）[2]。 - 细胞周期分析：将HepG-2细胞用Th A（12.5、25、35 μg/mL）处理24小时后，用75%乙醇于-20℃固定过夜，然后用500 μL碘化丙啶工作液在黑暗中染色4小时。使用MultiCycle软件[2]通过流式细胞术分析细胞周期分布（包括亚G1期峰）。 - ROS测定：收集处理后的HepG-2细胞，用PBS洗涤，并悬浮于含10 μM DCFH-DA的PBS中。在37℃孵育20分钟后，在488 nm激发波长和525 nm发射波长下测定荧光强度。DCF相对荧光强度以对照组的百分比表示[2]。 - 线粒体膜电位 (Δψₘ) 检测：将 HepG-2 细胞用 Th A (25、35、45 μg/mL) 处理 24 小时后，用 PBS 洗涤，并在 37 °C、5% CO₂ 条件下用 2 μg/mL JC-1 孵育 30 分钟。采用流式细胞仪检测红色和绿色荧光强度 [2]。 - 定量实时 PCR：使用 Trizol 试剂提取总 RNA 并进行逆转录。使用 SYBR Green I 染料，以 Bcl-xL、CDK4、cyclin D1 和 β-actin（作为内参）为引物进行 qPCR。采用 2⁻ΔΔCt 法计算相对表达量 [2]。 - Western blot 分析：将细胞总蛋白裂解于 RIPA 裂解缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.4、150 mM NaCl、1% Nonidet P-40、0.1% SDS）中。采用 BCA 法测定蛋白浓度。取等量蛋白（20 μg）进行 12% SDS-PAGE 电泳分离，然后转移至 PVDF 膜，用 5% 脱脂奶粉封闭，并与稀释度为 1:1000 的一抗（caspase-3、caspase-9、NF-κB、磷酸化 ERK、磷酸化 p38、GAPDH）于 4℃ 孵育过夜，随后与稀释度为 1:2000 的 HRP 标记二抗孵育 1 小时。采用 ECL 化学发光法和密度扫描法显色 [2]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Th A 在正常人肝细胞 LO2 中表现出中等细胞毒性，24 小时处理后的 IC₅₀ 为 50.91 ± 1.03 μg/mL [2]。
- 在 10 μM 浓度下，Th A 不抑制大鼠肝微粒体苯胺羟化酶 (CYP) 活性，表明该浓度下急性酶抑制作用较低；较高浓度（25 μM、100 μM）分别导致 5% 和 40% 的抑制 [1]。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
Thonningianin A 是一种单宁，它是一种代谢产物。有报道称 Thonningia sanguinea 含有 Thonningianin A，相关数据可供参考。
- Thonningianin A 是从 Thonningia sanguinea Vahl（Balanophoraceae）的根中分离得到的鞣花单宁，Thonningia sanguinea 是一种药用植物，在非洲用于预防支气管哮喘 [1]。 - Th A 的结构由葡萄糖和二氢查尔酮的没食子酸酯组成；其分子量约为 875 Da [2]。 - Th A 具有很强的抗氧化特性，包括清除自由基（DPPH、超氧阴离子、过氧阴离子）、抑制超氧阴离子生成（通过抑制黄嘌呤氧化酶）和螯合金属（铁）[1]。在HepG-2细胞中，Th A通过线粒体固有途径诱导细胞凋亡：ROS生成→线粒体膜电位（Δψₘ）丧失→Bcl-xL下调→caspase-9和caspase-3激活。它还通过下调细胞周期蛋白D1和CDK4导致G0/G1期细胞周期阻滞，并抑制NF-κB存活通路，同时调节MAPK（降低p-ERK水平，增加p-p38水平）[2]。Th A的抗癌活性已通过DNA片段化和细胞周期阻滞模式得到证实[2]。 |
| 分子式 |
C42H34O21
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|---|---|
| 分子量 |
874.7068
|
| 精确质量 |
872.179
|
| CAS号 |
271579-11-4
|
| PubChem CID |
10328286
|
| 外观&性状 |
White to yellow solid
|
| 密度 |
1.7±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
1365.2±65.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
412.3±27.8 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.733
|
| LogP |
6.13
|
| tPSA |
357
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
12
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
21
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
|
| 重原子数目 |
63
|
| 分子复杂度/Complexity |
1590
|
| 定义原子立体中心数目 |
5
|
| SMILES |
O1[C@]([H])([C@@]([H])([C@]([H])([C@@]2([H])[C@@]1([H])C([H])([H])OC(C1=C([H])C(=C(C(=C1C1=C(C(=C(C([H])=C1C(=O)O2)O[H])O[H])O[H])O[H])O[H])O[H])=O)OC(C1C([H])=C(C(=C(C=1[H])O[H])O[H])O[H])=O)O[H])OC1C([H])=C(C(C(C([H])([H])C([H])([H])C2C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=2[H])=O)=C(C=1[H])O[H])O[H]
|
| InChi Key |
XQVKQEFQGYTUAR-VHBRHXFYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C42H34O21/c43-20(7-6-15-4-2-1-3-5-15)30-21(44)10-17(11-22(30)45)60-42-36(55)38(63-39(56)16-8-23(46)31(50)24(47)9-16)37-27(61-42)14-59-40(57)18-12-25(48)32(51)34(53)28(18)29-19(41(58)62-37)13-26(49)33(52)35(29)54/h1-5,8-13,27,36-38,42,44-55H,6-7,14H2/t27-,36-,37-,38-,42-/m1/s1
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| 化学名 |
(10R,11R,12R,13S,15R)-13-[3,5-dihydroxy-4-(3-phenylpropanoyl)phenoxy]-3,4,5,12,21,22,23-heptahydroxy-8,18-dioxo-9,14,17-trioxatetracyclo[17.4.0.02,7.010,15]tricosa-1(23),2,4,6,19,21-hexaen-11-yl] 3,4,5-trihydroxybenzoate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~114.32 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.86 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.86 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1432 mL | 5.7162 mL | 11.4324 mL | |
| 5 mM | 0.2286 mL | 1.1432 mL | 2.2865 mL | |
| 10 mM | 0.1143 mL | 0.5716 mL | 1.1432 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
鲑鱼精DNA
绞股蓝皂苷LI
伪金丝桃素
Trans-4-Cotininecarboxylic acid
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