| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Target: Cyclophilin A (inhibits cis-trans isomerase activity) [1]
27 times more potent than cyclosporine A (exact IC50 not provided) [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
当用 TMN 355 (0.5–10 μM) 处理 3 至 9 小时后，环孢亲和素 A 蛋白表达降低了 75.9%。激活 6 小时后，1 μM TMN 355 可抑制环孢亲和素 A [1]。体外实验：在 THP-1 分化巨噬细胞中，1 μM TMN 355 处理 6 小时后，环孢亲和素 A 蛋白表达降低了 75.9%（通过蛋白质印迹法测定）。定量实时 PCR 检测显示，TMN 355 处理也降低了环孢亲和素 A mRNA 水平。[1] 免疫荧光分析和油红 O 染色结果显示，TMN 355 处理（1 μM，6 小时）显著降低了巨噬细胞的脂质摄取，表明泡沫细胞形成减少。 [1]
TMN355降低了经氧化低密度脂蛋白（oxLDL）处理的单核细胞来源巨噬细胞中清道夫受体标志物CD36和LOX-1的表达。[1] TMN355显著降低了单核细胞来源巨噬细胞条件培养基中促炎细胞因子TNF-α和MCP-1以及细胞外环孢素A的水平（通过ELISA检测）。[1] 在从血液中分离的人原代单核细胞中，与环孢素A处理的细胞相比，用TMN355（1 μM）处理导致Dil-oxLDL摄取量降低77%（p<0.005）。[1] |
| 细胞实验 |
Western Blot 分析[1]
细胞类型： THP 细胞系 测试浓度： 0.5、1、2.5、5 和 10 μM 孵育时间： 3、6 和 9 小时 实验结果： 环孢亲和素 A 蛋白表达降低了 75.9%。 细胞活力检测：为评估细胞活力，使用 MTT（3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物）法，以时间和剂量依赖的方式用 TMN355 处理 THP-1 分化的巨噬细胞。研究发现，1 μM 的 TMN355 可抑制环孢亲和素 A 的表达，且不影响细胞活力，因此后续实验均采用该浓度（处理 6 小时）。[1] 在基因沉默/抑制实验中，将 THP-1 细胞（2-4×10⁵）用 mission siRNA 转染 48 小时，或在 37°C 下用 1 μM 的 TMN355 处理 6 小时。处理后，将细胞置于高糖（20 mM）RPMI 1640 培养基中，用 PMA（50 ng/mL）诱导分化 96 小时，然后饥饿 24 小时，再用氧化型低密度脂蛋白（oxLDL，50 μg/mL）孵育 24 小时以诱导泡沫细胞形成。采用油红 O 染色、免疫荧光（Dil-oxLDL）和流式细胞术定量脂质摄取。 [1] 对于蛋白质印迹分析，在用OxLDL和TMN355处理后，制备蛋白质裂解液，并通过SDS-PAGE进行分离。将蛋白质转移至硝酸纤维素膜，并与稀释度为1:1000的一抗（抗环孢菌素A、抗CD36、抗LOX-1、抗β-肌动蛋白）于4℃孵育过夜，随后与稀释度为1:5000的HRP标记二抗孵育。使用ECL底物显色。[1] 对于ELISA，使用夹心免疫测定试剂盒，按照制造商的说明，测定处理后条件培养基中TNF-α、MCP-1和环孢菌素A的水平。所有样品均进行重复分析。[1] 对于定量实时PCR，使用TRIzol试剂提取总RNA，并用随机六聚体引物和M-MLV逆转录酶进行逆转录。使用针对环孢亲和素A和β2微球蛋白（作为内参）的特异性引物，在ABI Prism 7900HT系统上进行PCR，循环40次（95°C 15秒，60°C 1分钟）。Ct值用于计算相对表达量。[1] 对于人原代单核细胞实验，使用抗CD14微珠和磁分离法从健康志愿者中分离CD14+单核细胞。将单核细胞在含PMA（50 ng/mL）的RPMI 1640培养基中培养96小时，培养基中添加或不添加TMN355（1 μM）和/或环孢亲和素A（100 ng/mL），然后用Dil-oxLDL（10 μg/mL）处理4小时。采用共聚焦显微镜（559 nm 滤光片）分析 Dil-oxLDL 的摄取，并使用 NIS-Elements 软件进行定量分析。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
毒性/毒代动力学：MTT 法检测显示，1 μM 的 TMN355 对 THP-1 分化巨噬细胞的细胞活力无影响。未报告其他毒性数据。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
补充信息：TMN355是一种环孢素A的化学抑制剂，其效力是环孢素A的27倍，但缺乏免疫抑制功能。它通过与Arg55、Gln63和Asn102残基形成2-3个氢键来抑制环孢素A的顺反异构酶活性。本研究利用TMN355证明，在高糖条件下，环孢素A在单核细胞黏附、跨内皮迁移、分化为巨噬细胞以及泡沫细胞形成过程中发挥着关键作用。TMN355对环孢素A的抑制作用降低了脂质摄取、清道夫受体（CD36和LOX-1）的表达以及促炎细胞因子（TNF-α、MCP-1）的分泌，提示靶向环孢素A可能延缓糖尿病动脉粥样硬化病变的进展。 [1]
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| 分子式 |
C21H14CLFN2O2
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|---|---|
| 分子量 |
380.8034
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| 精确质量 |
380.073
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| CAS号 |
1186372-20-2
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| PubChem CID |
44249042
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| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
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| LogP |
5.47
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| tPSA |
58.2
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
27
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| 分子复杂度/Complexity |
552
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1=CC=C2C(=C1)C(C3=CC=CC=C32)NC(=O)NC(=O)C4=C(C=CC=C4Cl)F
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| InChi Key |
SFNLLCUAISZNRV-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H14ClFN2O2/c22-16-10-5-11-17(23)18(16)20(26)25-21(27)24-19-14-8-3-1-6-12(14)13-7-2-4-9-15(13)19/h1-11,19H,(H2,24,25,26,27)
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| 化学名 |
2-chloro-N-[(9H-fluoren-9-ylamino)carbonyl]-6-fluoro-benzamide
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| 别名 |
Compound 3i TMN 355 TMN-355 TMN355
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~31.25 mg/mL (~82.06 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.46 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6261 mL | 13.1303 mL | 26.2605 mL | |
| 5 mM | 0.5252 mL | 2.6261 mL | 5.2521 mL | |
| 10 mM | 0.2626 mL | 1.3130 mL | 2.6261 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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