| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
In FaDu cells, TRi-1 (0.679 and 6.79 μM; 6 hours) potently stimulates JNK and p38 phosphorylation while having no effect on cellular glutathione (GSH) contents [1]. TRi-1 (2 μM) H2O2 is added to grown FaDu cells in a concentration- and time-dependent manner to create TRi-1 (0.1-10 μM; 0-10 h) [1]. TRi-1 at 10 nM.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 FaDu 细胞中，TRi-1（0.679 和 6.79 μM；6 小时）有效刺激 JNK 和 p38 磷酸化，同时对细胞谷胱甘肽 (GSH) 含量没有影响 [1]。将 TRi-1 (2 μM) H2O2 以浓度和时间依赖性方式添加到生长的 FaDu 细胞中，以产生 TRi-1 (0.1-10 μM；0-10 h) [1]。 TRi-1，10 nM。
TRi-1 以不可逆且 NADPH 依赖的方式抑制重组 TXNRD1 酶活性。[1] 用 TRi-1 处理可在癌细胞系（如 FaDu）中抑制细胞 TXNRD 活性，其效力与金诺芬相当或更强。[1] TRi-1 处理不影响细胞谷胱甘肽 (GSH) 浓度，而金诺芬和 TRi-2 在高剂量下会降低 GSH。[1] TRi-1 能有效激活 FaDu 细胞中 JNK 和 p38 的磷酸化，这是与硫氧还蛋白系统抑制一致的下游效应。[1] TRi-1 将被抑制的 TXNRD1 转化为促氧化剂 SecTRAPs（硒受损的硫氧还蛋白还原酶衍生凋亡蛋白），后者能维持 NADPH 依赖的氧化还原循环（例如与胡桃醌），并导致细胞 H2O2 产生增加。[1] TRi-1 对 HCT116 细胞的线粒体基础呼吸和最大呼吸容量影响极小，这与严重损害线粒体功能的金诺芬不同。[1] TRi-1 对 NCI-60 面板中的所有细胞系均表现出细胞毒性活性，其平均生长抑制 50% (GI50) 的浓度为 6.31 µM。它在整个面板中的细胞毒性谱与金诺芬的相似度最低。[1] TRi-1 对癌细胞（如 A549 肺腺癌细胞）的细胞毒性优于对非癌细胞（如小鼠胚胎成纤维细胞 (MEFs)、原代人成纤维细胞、原代角质形成细胞、CCD841 结肠上皮细胞）。基因敲除 Txnrd1 的 MEFs 对 TRi-1 表现出额外的抗性。[1] TRi-1 的细胞毒性与谷胱甘肽合成抑制剂丁硫氨酸-亚砜亚胺 (BSO) 联用时会增强，这支持了其作用机制涉及对氧化应激增敏的观点。[1] TRi-1 在一组人类癌细胞系（包括 p53 改变或 BCL-2 过表达的 HCT116 亚克隆）中的细胞毒性效力受癌细胞基因型的影响较小。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
TRi-1（10 mg/kg；静脉注射；每天两次，持续 4 天；或 5 mg/kg；腹腔注射；每周两次，持续 3 周）会损害人类肿瘤异种移植物和同基因小鼠肿瘤
在携带已建立的人 FaDu 细胞异种移植瘤的 SCID 小鼠中，静脉注射 (i.v.) TRi-1（10 mg/kg，每日两次，持续 4 天）可在四天内显著抑制肿瘤生长，与溶剂对照组相比。[1] 在同一 FaDu 异种移植瘤模型中，用 TRi-1 治疗（5 mg/kg，腹腔注射 (i.p.)，每日一次）导致四天后存活肿瘤区域的 [18F]-FDG 摄取（通过 PET 测量）显著降低，而溶剂治疗的肿瘤则显示摄取增加。TRi-1 治疗组中的一些肿瘤出现了低摄取核心区。[1] 对用 TRi-1 治疗的小鼠的 FaDu 异种移植瘤进行切除和分析，显示在治疗第三天到第四天期间，活化的 caspase-3 染色增加。[1] 在自发形成恶性乳腺癌的 PyMT-MMTV 转基因小鼠中，用 TRi-1 治疗（5 mg/kg，i.p.，每周两次，持续三周）能显著抑制肿瘤生长，与溶剂对照组相比。TRi-1 组的所有小鼠在观察期内均存活。[1] 在携带原位 MDA-MB-231 人乳腺癌异种移植瘤的无胸腺小鼠中，用 TRi-1 治疗（10 mg/kg，通过 i.v. 或 i.p. 给药，方案为前 5 天每日一次，然后停药 2 天，随后每周三次，持续两周）能显著抑制肿瘤生长，与溶剂对照组相比，i.p. 组中有一个肿瘤完全消退。[1] |
| 酶活实验 |
TXNRD1 和 GSR 抑制的重组酶实验在含有 50 mM Tris pH 7.5、2 mM EDTA 和 0.1 mg/mL 牛血清白蛋白的反应缓冲液中进行。实验在 96 孔板中一式三份进行，通过吸光度变化监测活性。化合物溶解于 DMSO。初始筛选使用重组大鼠 TXNRD1，而同工酶特异性比较则使用人重组 TXNRD1 和 TXNRD2。TXNRD1 测定法改编自使用 DTNB 作为底物或 TXN1 偶联胰岛素还原测定的标准比色皿方案。活性相对于 DMSO 和无酶对照进行归一化。[1]
为了评估不可逆抑制，将 TXNRD1 与化合物在存在或不存在 NADPH 的情况下孵育。然后对酶进行脱盐以去除未结合的化合物和辅助因子，并测量剩余活性。[1] 通过将 NADPH 还原的 TXNRD1 与完全抑制其天然活性的浓度的抑制剂预孵育来测量 SecTRAP 活性。脱盐后，测量残留的 NADPH 依赖性胡桃醌还原，作为促氧化功能获得指标。[1] 通过将 GPX1 酶与化合物在不含 GSH 的情况下预孵育，然后测量残留活性来测试对谷胱甘肽过氧化物酶 1 (GPX1) 的抑制。[1] 通过在将化合物添加到 TXNRD1 反应混合物之前将其与 GSH 预孵育，或者通过在加入胰岛素启动酶反应之前，将化合物与 TXNRD1、NADPH 和不同浓度的 GSH（有时包括 TXN1）共孵育，来测试化合物在细胞亲核物质环境中的抑制特异性。[1] |
| 细胞实验 |
蛋白质印迹分析 [1]
细胞类型： FaDu 细胞 测试浓度： 0.679 和 6.79 μM 孵育时间： 6 小时 实验结果：有效激活 JNK 和 p38 磷酸化。 -100μM； 48 h) 显示对癌细胞的细胞毒性 [1]。 细胞毒性测定[1] 细胞类型：白血病、非小细胞肺癌、中枢神经系统癌、结肠癌、黑色素瘤、卵巢癌、肾癌、前列腺癌和乳腺癌细胞 测试浓度： 10 nM-100 μM 孵育时间： 48 小时 实验结果：<显示了针对每种测试细胞系的效力，平均生长抑制率为 50% (GI50) 为 6.31 μM。 细胞在 37°C、5% CO2 条件下，于含有青霉素/链霉素、L-谷氨酰胺、10% 胎牛血清和 25 nM 亚硒酸钠的培养基中培养。所有实验均一式三份进行。化合物用 DMSO 稀释至终浓度为 0.01%。[1] 对于细胞毒性实验（细胞活力），将细胞与化合物孵育 72 小时，然后测定活力。IC50/GI50 值根据剂量反应曲线计算。[1] 细胞 TXNRD 活性通过处理细胞（如 FaDu）3 小时后进行测量。裂解细胞，并使用胰岛素终点法测定酶活性。[1] 细胞谷胱甘肽 (GSH) 浓度通过将细胞暴露于浓度为各自细胞系 IC50 值 10 倍的化合物中 6 小时后进行测量。[1] 为了分析信号通路，用化合物处理细胞 6 小时，然后裂解并进行 Western blot 分析，以检测 JNK 和 p38 的磷酸化和总水平。[1] 使用 Amplex red 测定法测量细胞 H2O2 产生。用化合物处理细胞，并以浓度和时间依赖的方式荧光监测释放到培养基中的 H2O2。[1] 使用 Seahorse 分析仪评估线粒体呼吸功能。接种细胞并用化合物处理 30 分钟或 5 小时。测量耗氧率 (OCR) 以确定参数，如 ATP 耦合的基础呼吸和最大呼吸容量。[1] 通过用化合物处理细胞，让其在一段时间内形成克隆，然后固定、染色并计数克隆，以评估长期的克隆形成存活能力。[1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： PyMT-MMTV 小鼠可自发形成恶性乳腺癌肿瘤 [1]
剂量： 5 mg/kg 给药途径： 腹腔注射 (ip)，每周两次，持续 3 周 实验结果： 肿瘤生长受阻，肿瘤体积显著缩小。 在 Fox Chase SCID 小鼠中进行了剂量递增毒性研究。小鼠经静脉注射 (iv) 单次给予 TRi-1 (0.7–10 mg/kg)，并观察其健康状况长达 72 小时。[1] 为了在荷瘤小鼠中进行重复剂量毒性和疗效研究，将 FaDu 细胞皮下接种到 SCID 小鼠中。肿瘤形成后（13天），小鼠每天两次经静脉注射（共5天，9次注射）TRi-1（10 mg/kg）、TRi-2（15 mg/kg）、金诺芬（10 mg/kg）或载体，连续4天。每日监测小鼠的健康状况、体重和肿瘤体积（使用游标卡尺测量）。[1] 对于PET成像研究，携带FaDu异种移植瘤的SCID小鼠在肿瘤生长11天后进行基线[18F]-FDG PET成像。随后，小鼠每天一次腹腔注射TRi-1（5 mg/kg）或载体。在治疗的第三天进行随访PET扫描。在第3天或第4天处死小鼠，切除肿瘤并进行分析（例如，caspase-3染色）。 [1] 在 PyMT-MMTV 自发性乳腺癌模型中，转基因小鼠每周两次腹腔注射 TRi-1 (5 mg/kg)、金诺芬 (10 mg/kg) 或载体，持续三周。定期使用游标卡尺测量乳腺肿瘤体积。[1] 在 MDA-MB-231 原位异种移植模型中，将细胞接种到无胸腺裸鼠的乳腺脂肪垫中。当肿瘤达到特定体积时，将小鼠随机分组，并分别通过静脉注射或腹腔注射给予 TRi-1 (10 mg/kg) 或载体，给药方案为：前五天每天一次，停药两天，之后每周三次，持续两周。监测小鼠的健康状况、体重和肿瘤体积。 [1] 将化合物TRi-1溶解于DMSO中，然后配制成含有10% Cremophor EL、10%乙醇和80% PBS的溶液，用于体内给药。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在剂量递增研究中，小鼠对TRi-1耐受性良好，最高给药剂量达10 mg/kg（静脉注射），72小时内未观察到明显的毒性反应。[1]
在荷瘤小鼠的重复给药研究中，给予TRi-1（10 mg/kg，静脉注射，每日两次，连续4天）与溶媒对照组相比，未引起明显的毒性反应或小鼠体重的显著变化。[1] 与引起严重损害的金诺芬不同，TRi-1对细胞培养中的线粒体呼吸作用影响甚微，提示其在降低线粒体毒性方面可能具有更好的安全性。 [1] TRi-1 与对癌细胞系的作用相比，对多种非癌性原代细胞（成纤维细胞、角质形成细胞、结肠上皮细胞）的细胞毒性降低。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
TRi-1是一种选择性、不可逆的胞质硒酶硫氧还蛋白还原酶1 (TXNRD1) 抑制剂。[1]
其抗癌作用机制涉及两个潜在组成部分：不可逆地抑制TXNRD1的抗氧化活性，以及将受抑制的酶转化为促氧化剂SecTRAPs，后者可生成H2O2，从而加剧癌细胞的氧化应激。[1] 该研究表明，选择性抑制胞质TXNRD1，而不靶向线粒体同工酶TXNRD2，可以产生抗癌疗效，且全身毒性极小，因为与依赖该通路的癌细胞相比，正常成人组织可能更能耐受TXNRD1功能的丧失。[1] TRi-1是通过对392,548种化合物进行高通量筛选而发现的。 [1] |
| 分子式 |
C12H9CLN2O5S
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|---|---|
| 分子量 |
328.728260755539
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| 精确质量 |
327
|
| 元素分析 |
C, 47.64; H, 3.08; Cl, 10.82; N, 4.27; O, 24.41; S, 9.78
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| CAS号 |
246020-68-8
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| PubChem CID |
2801235
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
2.7
|
| tPSA |
111
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
21
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| 分子复杂度/Complexity |
467
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
PRKWNRUVAZZHPH-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C12H9ClN2O5S/c1-20-11-7-6-10(15(16)17)12(14-11)21(18,19)9-4-2-8(13)3-5-9/h2-7H,1H3
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| 化学名 |
2-(4-chlorophenyl)sulfonyl-6-methoxy-3-nitropyridine
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| 别名 |
TRi-1 (TXNRD1 inhibitor 1); TRi 1 (TXNRD1 inhibitor-1); TRi1 (TXNRD 1 inhibitor 1)
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~62.5 mg/mL (~190.13 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.33 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.33 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.0420 mL | 15.2101 mL | 30.4201 mL | |
| 5 mM | 0.6084 mL | 3.0420 mL | 6.0840 mL | |
| 10 mM | 0.3042 mL | 1.5210 mL | 3.0420 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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