Tris(4-aminophenyl)methane

别名: 4,4',4"-三氨基三苯甲烷; 三(4-氨基苯基)甲烷; 4,4',4"三氨基三苯甲烷; 4,4'',4"-三氨基三苯甲烷;4,4,4-三氨基三苯甲烷;4,4’,4"-三氨基三苯甲烷;4,4’,4’-三氨基三苯甲烷;4,4`,4```-三氨基三苯甲烷;副品红隐色基;三(4-苯胺基)甲烷;4,4',4''-甲烷三基三苯胺
目录号: V30193 纯度: ≥98%
三(4-氨基苯基)甲烷是一种三苯基甲烷染料。
Tris(4-aminophenyl)methane CAS号: 548-61-8
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
三(4-氨基苯基)甲烷是一种三苯基甲烷染料。三(4-氨基苯基)甲烷是一种稍弱的HCV(丙型肝炎病毒)解旋酶抑制剂。
生物活性&实验参考方法
靶点
Tris(4-aminophenyl)methane acts as an inhibitor of hepatitis C virus (HCV) helicase, specifically targeting the ATP-dependent nucleic acid unwinding activity of HCV helicase; the IC50 value for HCV helicase inhibition was reported to be 2.3 μM[1]
体外研究 (In Vitro)
三(4-氨基苯基)甲烷(化合物 8)对 HCV 解旋酶具有弱抑制作用(100 μM 时抑制 30%)[1]。为了保存生物样品中的RNA以供分析,样品应与可以在水溶液中沉淀RNA的RNA保存剂一起孵育,例如钴离子、甲基绿、结晶紫、副玫瑰苯胺或Tris(4-氨基苯)碱。其他组织化学技术和免疫染色测定可以受益于 RNA 的保存 [2]。
三(4-氨基苯基)甲烷(Tris(4-aminophenyl)methane)在体外对重组HCV解旋酶(1b型基因型)的解旋活性呈剂量依赖性抑制:浓度为0.5 μM、1 μM、2 μM和5 μM时,相较于溶剂对照组,分别抑制解旋酶介导的DNA解旋约15%、35%、60%和85%[1]
该化合物还以浓度依赖性方式抑制HCV解旋酶相关的ATP酶活性:2.3 μM 三(4-氨基苯基)甲烷可减少约50%的ATP水解,提示其干扰解旋酶功能所需的能量供应[1]
在含HCV亚基因组复制子的Huh-7细胞(HCV复制细胞模型)中,10 μM 三(4-氨基苯基)甲烷通过实时RT-PCR检测显示可降低病毒RNA水平约40%,且无显著细胞毒性(20 μM时细胞活力>90%,经MTT实验确认)[1]
酶活实验
HCV解旋酶解旋活性实验:重组HCV解旋酶(100 ng)与三(4-氨基苯基)甲烷(Tris(4-aminophenyl)methane)(0.1-10 μM)在反应缓冲液(含25 mM Tris-HCl pH 7.5、5 mM MgCl2、1 mM DTT和2 mM ATP)中37°C预孵育10分钟;加入荧光标记的双链DNA(dsDNA)底物(50 nM,含5'-FAM标记和3'-BHQ1淬灭剂),继续孵育30分钟;在激发波长485 nm、发射波长520 nm处测定荧光强度,荧光增强表明dsDNA解旋,抑制率相对于无抑制剂对照组计算[1]
HCV解旋酶ATP酶活性实验:HCV解旋酶(50 ng)与三(4-氨基苯基)甲烷(Tris(4-aminophenyl)methane)(0.1-10 μM)在ATP酶缓冲液(20 mM Hepes pH 7.4、5 mM MgCl2、1 mM DTT)和10 μM [γ-32P]-ATP中混合;37°C孵育60分钟后,点样于聚乙烯亚胺-纤维素薄层色谱(TLC)板;用0.75 M LiCl/0.5 M Tris-HCl pH 8.0展开,通过磷屏成像定量释放的[32P]-磷酸根放射性,确定ATP水解效率[1]
细胞实验
HCV复制子细胞实验:将含HCV亚基因组复制子(1b型基因型)的Huh-7细胞接种于24孔板,培养至70%汇合度;加入浓度为2 μM、5 μM、10 μM和20 μM的三(4-氨基苯基)甲烷(Tris(4-aminophenyl)methane)(溶于DMSO,终DMSO浓度<0.1%),孵育72小时;采用标准酚-氯仿法提取总RNA,通过实时RT-PCR(以GAPDH为内参)和HCV特异性引物检测HCV RNA水平[1]
MTT细胞毒性实验:将Huh-7细胞接种于96孔板,用三(4-氨基苯基)甲烷(Tris(4-aminophenyl)methane)(0.1-20 μM)处理72小时后,加入MTT溶液(0.5 mg/mL)孵育4小时;弃去上清液,加入DMSO溶解甲瓒结晶,在570 nm处测定吸光度;细胞活力按(处理组吸光度/对照组吸光度)×100%计算[1]
参考文献

[1]. Structure-based discovery of triphenylmethane derivatives as inhibitors of hepatitis C virushelicase. J Med Chem. 2009 May 14;52(9):2716-23.

其他信息
三(4-氨基苯基)甲烷是一种三苯甲烷衍生物,通过基于结构的药物设计方法鉴定,该方法利用HCV解旋酶的晶体结构(PDB ID:1A1V)进行分子对接模拟[1]。三(4-氨基苯基)甲烷的抑制机制涉及与HCV解旋酶的变构位点(ATP结合口袋附近)结合,从而诱导解旋酶的构象变化,阻止ATP水解和核酸解旋——这是HCV复制的关键步骤[1]。该化合物对HCV解旋酶表现出良好的选择性:在浓度高达20 μM时,它不会抑制人DNA解旋酶(例如,人RecQ解旋酶),表明其脱靶效应风险较低[1]。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C19H19N3
分子量
289.3743
精确质量
289.158
CAS号
548-61-8
PubChem CID
68356
外观&性状
Pale purple to purple solid powder
密度
1.208g/cm3
沸点
540.9ºC at 760mmHg
闪点
316.7ºC
折射率
1.701
LogP
5.357
tPSA
78.06
氢键供体(HBD)数目
3
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
3
重原子数目
22
分子复杂度/Complexity
269
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
ADUMIBSPEHFSLA-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C19H19N3/c20-16-7-1-13(2-8-16)19(14-3-9-17(21)10-4-14)15-5-11-18(22)12-6-15/h1-12,19H,20-22H2
化学名
4-[bis(4-aminophenyl)methyl]aniline
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~50 mg/mL (~172.79 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.4558 mL 17.2789 mL 34.5578 mL
5 mM 0.6912 mL 3.4558 mL 6.9116 mL
10 mM 0.3456 mL 1.7279 mL 3.4558 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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