| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Tris(4-aminophenyl)methane acts as an inhibitor of hepatitis C virus (HCV) helicase, specifically targeting the ATP-dependent nucleic acid unwinding activity of HCV helicase; the IC50 value for HCV helicase inhibition was reported to be 2.3 μM[1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
三(4-氨基苯基)甲烷(化合物 8)对 HCV 解旋酶具有弱抑制作用(100 μM 时抑制 30%)[1]。为了保存生物样品中的RNA以供分析,样品应与可以在水溶液中沉淀RNA的RNA保存剂一起孵育,例如钴离子、甲基绿、结晶紫、副玫瑰苯胺或Tris(4-氨基苯)碱。其他组织化学技术和免疫染色测定可以受益于 RNA 的保存 [2]。
三(4-氨基苯基)甲烷(Tris(4-aminophenyl)methane)在体外对重组HCV解旋酶(1b型基因型)的解旋活性呈剂量依赖性抑制:浓度为0.5 μM、1 μM、2 μM和5 μM时,相较于溶剂对照组,分别抑制解旋酶介导的DNA解旋约15%、35%、60%和85%[1] 该化合物还以浓度依赖性方式抑制HCV解旋酶相关的ATP酶活性:2.3 μM 三(4-氨基苯基)甲烷可减少约50%的ATP水解,提示其干扰解旋酶功能所需的能量供应[1] 在含HCV亚基因组复制子的Huh-7细胞(HCV复制细胞模型)中,10 μM 三(4-氨基苯基)甲烷通过实时RT-PCR检测显示可降低病毒RNA水平约40%,且无显著细胞毒性(20 μM时细胞活力>90%,经MTT实验确认)[1] |
| 酶活实验 |
HCV解旋酶解旋活性实验:重组HCV解旋酶(100 ng)与三(4-氨基苯基)甲烷(Tris(4-aminophenyl)methane)(0.1-10 μM)在反应缓冲液(含25 mM Tris-HCl pH 7.5、5 mM MgCl2、1 mM DTT和2 mM ATP)中37°C预孵育10分钟;加入荧光标记的双链DNA(dsDNA)底物(50 nM,含5'-FAM标记和3'-BHQ1淬灭剂),继续孵育30分钟;在激发波长485 nm、发射波长520 nm处测定荧光强度,荧光增强表明dsDNA解旋,抑制率相对于无抑制剂对照组计算[1]
HCV解旋酶ATP酶活性实验:HCV解旋酶(50 ng)与三(4-氨基苯基)甲烷(Tris(4-aminophenyl)methane)(0.1-10 μM)在ATP酶缓冲液(20 mM Hepes pH 7.4、5 mM MgCl2、1 mM DTT)和10 μM [γ-32P]-ATP中混合;37°C孵育60分钟后,点样于聚乙烯亚胺-纤维素薄层色谱(TLC)板;用0.75 M LiCl/0.5 M Tris-HCl pH 8.0展开,通过磷屏成像定量释放的[32P]-磷酸根放射性,确定ATP水解效率[1] |
| 细胞实验 |
HCV复制子细胞实验:将含HCV亚基因组复制子(1b型基因型)的Huh-7细胞接种于24孔板,培养至70%汇合度;加入浓度为2 μM、5 μM、10 μM和20 μM的三(4-氨基苯基)甲烷(Tris(4-aminophenyl)methane)(溶于DMSO,终DMSO浓度<0.1%),孵育72小时;采用标准酚-氯仿法提取总RNA,通过实时RT-PCR(以GAPDH为内参)和HCV特异性引物检测HCV RNA水平[1]
MTT细胞毒性实验:将Huh-7细胞接种于96孔板,用三(4-氨基苯基)甲烷(Tris(4-aminophenyl)methane)(0.1-20 μM)处理72小时后,加入MTT溶液(0.5 mg/mL)孵育4小时;弃去上清液,加入DMSO溶解甲瓒结晶,在570 nm处测定吸光度;细胞活力按(处理组吸光度/对照组吸光度)×100%计算[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
三(4-氨基苯基)甲烷是一种三苯甲烷衍生物,通过基于结构的药物设计方法鉴定,该方法利用HCV解旋酶的晶体结构(PDB ID:1A1V)进行分子对接模拟[1]。三(4-氨基苯基)甲烷的抑制机制涉及与HCV解旋酶的变构位点(ATP结合口袋附近)结合,从而诱导解旋酶的构象变化,阻止ATP水解和核酸解旋——这是HCV复制的关键步骤[1]。该化合物对HCV解旋酶表现出良好的选择性:在浓度高达20 μM时,它不会抑制人DNA解旋酶(例如,人RecQ解旋酶),表明其脱靶效应风险较低[1]。
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| 分子式 |
C19H19N3
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|---|---|
| 分子量 |
289.3743
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| 精确质量 |
289.158
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| CAS号 |
548-61-8
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| PubChem CID |
68356
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| 外观&性状 |
Pale purple to purple solid powder
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| 密度 |
1.208g/cm3
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| 沸点 |
540.9ºC at 760mmHg
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| 闪点 |
316.7ºC
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| 折射率 |
1.701
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| LogP |
5.357
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| tPSA |
78.06
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
22
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| 分子复杂度/Complexity |
269
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
ADUMIBSPEHFSLA-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H19N3/c20-16-7-1-13(2-8-16)19(14-3-9-17(21)10-4-14)15-5-11-18(22)12-6-15/h1-12,19H,20-22H2
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| 化学名 |
4-[bis(4-aminophenyl)methyl]aniline
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~172.79 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.4558 mL | 17.2789 mL | 34.5578 mL | |
| 5 mM | 0.6912 mL | 3.4558 mL | 6.9116 mL | |
| 10 mM | 0.3456 mL | 1.7279 mL | 3.4558 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。