Tyrosinase (206-214) (human)

别名: L-丙氨酰-L-苯丙氨酰-L-亮氨酰-L-脯氨酰-L-色氨酰-L-组氨酰-L-精氨酰-L-亮氨酰-L-苯丙氨酸
目录号: V34874 纯度: ≥98%
酪氨酸酶 (206-214),人 (AFLPWHRLF),一种 9 个氨基酸 (AA) 肽,是酪氨酸酶表位。
Tyrosinase (206-214) (human) CAS号: 166188-11-0
产品类别: Peptides
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
人酪氨酸酶(206-214)(AFLPWHRLF)是一种9个氨基酸(AA)肽,是酪氨酸酶表位。人酪氨酸酶(206-214)可被HLA-A24限制性肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)识别。
酪氨酸酶 (206-214)(人)(CAS号:166188-11-0)是一种合成肽片段,对应于人酪氨酸酶的第206-214位氨基酸。酪氨酸酶是黑色素生物合成的关键酶,催化黑色素生成的限速步骤。该肽片段被用作研究酪氨酸酶功能、黑色素生成和色素沉着障碍的研究工具。它也被用作免疫学研究中的酪氨酸酶衍生表位,用于T细胞研究。
生物活性&实验参考方法
靶点
The primary target of Tyrosinase (206-214) peptide is the tyrosinase enzyme itself, specifically the region corresponding to amino acids 206-214. Tyrosinase is a copper-containing oxidase that catalyzes the hydroxylation of tyrosine to DOPA and the oxidation of DOPA to dopaquinone. This peptide fragment may be used to study the enzyme's structure-function relationships, as an antigen for antibody generation, or as a T cell epitope in immunology research.
体外研究 (In Vitro)
AFLPHRLF,或称人酪氨酸酶(206–214),可用于生产针对 HLA-A24+ 黑色素瘤的肽疫苗和用于过继免疫疗法的黑色素瘤特异性 T 淋巴细胞[1]。
在体外,酪氨酸酶(206-214)肽可用于研究黑素细胞系(如B16-F10或人黑素细胞)中的酪氨酸酶活性和黑素生成。该肽可用作酶活性测定中的底物类似物或抑制剂。在免疫学中,该肽被用作特定的表位,用于在体外刺激酪氨酸酶特异性T细胞,以研究抗黑色素瘤免疫反应。活性可通过酪氨酸酶活性测定或T细胞活化测定进行评估。
体内研究 (In Vivo)
将酪氨酸酶 (206-214) 经鼻内途径(45 µL;每周一次,持续三周)给予 HLA-A24 转基因 (A24Tg) 小鼠。酪氨酸酶 (206-214) 可增加小鼠支气管周围的 CD3+ 和 CD8+ 淋巴细胞数量。所有接种酪氨酸酶 (206-214) 的 A24Tg 小鼠在感染致死性 A/HK483 病毒后均死亡 [2]。
酪氨酸酶(206-214)肽的体内活性主要在癌症免疫学领域进行研究,尤其是在黑色素瘤免疫治疗方面。该肽可用作疫苗抗原,在动物模型中诱导酪氨酸酶特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应。在黑色素瘤模型中,用该肽进行免疫接种可诱导针对表达酪氨酸酶的肿瘤细胞的抗肿瘤免疫反应。关于该肽的详细体内数据可在免疫学文献中找到。
酶活实验
酪氨酸酶(206-214)肽的体外酶活性测定包括以L-酪氨酸或L-多巴为底物测定酪氨酸酶的酶活性。该肽可用作底物或抑制剂。酪氨酸酶活性通过分光光度法测定,监测475 nm处多巴色素的生成。测定该肽对酶动力学(Km、Vmax)的影响。在免疫学研究中,MHC结合试验评估该肽与HLA-A2或其他MHC分子的亲和力。
细胞实验
酪氨酸酶 (206-214) 肽的体外细胞检测采用黑素细胞或黑色素瘤细胞系。在黑色素生成研究中,用肽处理细胞,并通过分光光度法测定黑色素含量。酪氨酸酶活性通过 DOPA 氧化试验进行评估。在免疫学研究中,T 细胞活化试验采用肽脉冲抗原呈递细胞与酪氨酸酶特异性 T 细胞共培养。T 细胞活化通过 IFN-γ ELISPOT、细胞因子释放或细胞毒性试验进行评估。
动物实验
酪氨酸酶(206-214)肽的体内动物研究通常使用小鼠黑色素瘤模型,例如B16-F10。小鼠通过皮下或皮内注射该肽(通常与佐剂联合)进行免疫。随后进行肿瘤攻击,并监测肿瘤生长、存活情况和免疫反应(CTL活性、细胞因子产生)。该肽用于研究T细胞介导的针对表达酪氨酸酶的黑色素瘤细胞的抗肿瘤免疫。
药代性质 (ADME/PK)
酪氨酸酶(206-214)肽的药代动力学特性具有肽抗原的典型特征。作为一种小肽(9个氨基酸),它从循环系统中清除迅速,口服生物利用度有限,且易受蛋白水解酶降解。在疫苗应用中,该肽通常与佐剂联合使用以增强免疫原性。详细的药代动力学参数需要通过实验测定。该肽仅供研究使用。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
酪氨酸酶 (206-214) 肽段作为一种研究试剂,其毒性数据有限。该肽段通常被认为毒性较低。在疫苗研究中,注射部位可能出现局部反应和轻微的全身性反应。该肽段仅供研究使用,未经相关监管机构批准,不得用于人体治疗。处理合成肽时,应遵守标准的实验室安全预防措施。
参考文献

[1]. Identification of a tyrosinase epitope recognized by HLA-A24-restricted, tumor-infiltrating lymphocytes. J Immunol. 1995 Aug 1;155(3):1343-8.

[2]. Cross-protective peptide vaccine against influenza A viruses developed in HLA-A*2402 human immunity model. PLoS One. 2011;6(9):e24626.

其他信息
酪氨酸酶(206-214)(人)是一种合成肽,对应于人酪氨酸酶的206-214位氨基酸。它被用作黑色素生成研究和癌症免疫学的研究工具。作为一种酪氨酸酶衍生的表位,它能被HLA-A2限制性细胞毒性T淋巴细胞识别,并用于抗黑色素瘤免疫反应的研究。该肽还用于研究酪氨酸酶的功能和调控。它仅供研究使用,不得用于人类治疗或诊断。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C61H83N15O10
分子量
1186.40623307228
精确质量
1185.644
CAS号
166188-11-0
PubChem CID
9941717
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.4±0.1 g/cm3
折射率
1.665
LogP
5.31
tPSA
396
氢键供体(HBD)数目
13
氢键受体(HBA)数目
13
可旋转键数目(RBC)
32
重原子数目
86
分子复杂度/Complexity
2290
定义原子立体中心数目
9
SMILES
C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N[C@@H](CC3=CNC4=CC=CC=C43)C(=O)N[C@@H](CC5=CN=CN5)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC6=CC=CC=C6)C(=O)O)N
InChi Key
ZDTHINDBILABAB-WDGXTDPFSA-N
InChi Code
InChI=1S/C61H83N15O10/c1-35(2)26-45(54(79)75-50(60(85)86)29-39-18-10-7-11-19-39)71-53(78)44(22-14-24-66-61(63)64)69-57(82)48(31-41-33-65-34-68-41)72-56(81)47(30-40-32-67-43-21-13-12-20-42(40)43)73-58(83)51-23-15-25-76(51)59(84)49(27-36(3)4)74-55(80)46(70-52(77)37(5)62)28-38-16-8-6-9-17-38/h6-13,16-21,32-37,44-51,67H,14-15,22-31,62H2,1-5H3,(H,65,68)(H,69,82)(H,70,77)(H,71,78)(H,72,81)(H,73,83)(H,74,80)(H,75,79)(H,85,86)(H4,63,64,66)/t37-,44-,45-,46-,47-,48-,49-,50-,51-/m0/s1
化学名
(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-aminopropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~125 mg/mL (~105.36 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (1.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (1.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (1.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.8429 mL 4.2144 mL 8.4288 mL
5 mM 0.1686 mL 0.8429 mL 1.6858 mL
10 mM 0.0843 mL 0.4214 mL 0.8429 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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