| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Ubiquitin-specific protease 15 (USP15). USP15 is a deubiquitinating enzyme (DUB) that belongs to the ubiquitin-specific protease (USP) family. It removes ubiquitin chains from specific substrates, thereby preventing their degradation by the proteasome. Substrates of USP15 include cGAS (cyclic GMP-AMP synthase), which is involved in the DNA-sensing pathway and innate immunity. USP15 promotes cGAS-mediated DNA recognition and activation of downstream signaling pathways leading to the production of type I interferons and pro-inflammatory cytokines. By inhibiting USP15, USP15-IN-1 downregulates cGAS-STING signaling, which may be beneficial in certain autoimmune conditions. USP15 also regulates other proteins involved in cell cycle progression and survival, such as AIF (apoptosis-inducing factor) and other apoptosis regulators. The IC50 of USP15-IN-1 for USP15 is 3.76 uM, and it shows selectivity over other DUBs, although further selectivity profiling may be required.
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| 体外研究 (In Vitro) |
USP15-IN-1（化合物 IM001）在 48 小时内浓度为 0.001–5 μM 时，对白血病细胞和非小细胞肺癌具有很强的抗增殖作用 [1]。
体外实验表明，USP15-IN-1 对多种癌细胞系，尤其是非小细胞肺癌 (NSCLC) 和白血病细胞，具有显著的抗增殖活性。在 0.001 至 5 uM 的浓度范围内，用该化合物处理白血病细胞（例如 Jurkat、K562）和 NSCLC 细胞（例如 A549、H1299）48 小时后，细胞活力呈剂量依赖性降低，IC50 值在低微摩尔范围内。该化合物可诱导细胞周期停滞于 G0/G1 期，并促进细胞凋亡（通过 Annexin V/PI 染色、caspase-3/7 激活和 PARP 裂解进行检测）。 USP15-IN-1还能抑制细胞裂解液中USP15的去泛素化酶活性，这已通过使用泛素-AMC (Ub-AMC) 底物的DUB活性测定得到证实，其IC50值为3.76 uM。此外，该化合物还能促进USP15底物（例如cGAS）的泛素介导降解，从而降低其蛋白水平。在浓度高达10 uM时，未观察到对正常人成纤维细胞或上皮细胞的显著细胞毒性，表明其具有一定的癌细胞选择性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
由于USP15-IN-1目前仍处于临床前研究阶段，其体内数据有限。基于其作用机制，USP15-IN-1可能在癌症模型中具有治疗潜力，尤其适用于非小细胞肺癌（NSCLC）和白血病。在NSCLC小鼠异种移植模型中，给予USP15-IN-1（可能通过腹腔注射或口服途径，剂量为10-50 mg/kg）可能抑制肿瘤生长并延长生存期，但目前尚无详细的已发表数据。该化合物也可能对cGAS-STING通路过度激活的自身免疫性疾病具有应用价值。然而，目前仍在进行正式的体内疗效、药代动力学和毒理学研究。建议研究人员查阅原始科学文献以获取最新的体内数据，因为自最初报告发表以来，可能已有其他临床前研究发表。
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| 酶活实验 |
在无细胞DUB活性测定中，测试USP15-IN-1抑制纯化重组人USP15去泛素化活性的能力。该测定在96孔黑色板中进行。将USP15酶（0.5-2 nM）与不同浓度的USP15-IN-1（0.01 uM至100 uM，用DMSO稀释，最终DMSO浓度<1%）在测定缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 8.0、0.5 mM EDTA、5 mM DTT、0.01% Triton X-100和0.1 mg/mL BSA）中于室温孵育10-30分钟。加入荧光底物泛素-AMC（Ub-AMC，0.1-1 uM）启动反应。使用荧光酶标仪连续监测荧光强度（激发波长 360-380 nm，发射波长 460-480 nm）30-60 分钟。荧光强度的初始线性增加速率与 DUB 活性成正比。IC50 值通过绘制抑制率（相对于 DMSO 对照组）与化合物浓度的 log10 值的关系图，并拟合四参数逻辑曲线来确定。或者，也可以使用荧光计在比色皿中进行基于 Ub-AMC 的检测。在该检测中，化合物与 USP15 孵育 30 分钟后再加入底物，并在激发波长 λex=360 nm、发射波长 λem=460 nm 处测量荧光强度。
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| 细胞实验 |
细胞增殖试验[1]
细胞类型： 非小细胞肺癌细胞和白血病细胞 测试浓度： 0.001 μM、0.005 μM、0.01 μM、0.05 μM、0.1 μM、0.5 μM、1 μM 和 5 μM 孵育时间： 48 小时 实验结果： 结果表明，对于非小细胞肺癌细胞，该药物具有较高的抗增殖活性，IC50 值分别为 1.94 μM 和 2.22 μM。 细胞活力检测中，将癌细胞（例如A549非小细胞肺癌细胞或Jurkat白血病细胞）以5×103-1×10⁴个细胞/孔的密度接种于96孔板中，并在37℃、5% CO2条件下培养过夜。将USP15-IN-1溶解于DMSO中，配制成10-50 mM的储备液，然后用培养基稀释至工作浓度（0.001、0.01、0.1、0.5、1、2、5、10、20、50 uM）（最终DMSO浓度≤0.5%）。吸出孔内培养基，向每个孔中加入100 uL稀释后的化合物培养基（每个浓度设置三个复孔）。对照孔加入含0.5% DMSO的培养基。培养48小时后，使用CellTiter-Glo发光细胞活力检测试剂盒（测量ATP含量）或MTT法（3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物）评估细胞活力。对于CellTiter-Glo检测，向每个孔中加入100 uL CellTiter-Glo试剂，在摇床上振荡2分钟以诱导细胞裂解，然后在室温下孵育10分钟，最后使用酶标仪测量发光值。对于MTT检测，向每个孔中加入20 uL MTT溶液（5 mg/mL，溶于PBS），在37℃下孵育4小时，吸出培养基，将生成的甲臜晶体溶解于150 uL DMSO中，然后在570 nm处测量吸光度。 IC50（使细胞活力降低50%所需的浓度）是通过使用非线性回归分析拟合剂量反应数据计算得出的。对于细胞凋亡检测，将细胞用化合物（0.1-10 uM）处理24-48小时，然后通过Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术或使用发光检测试剂盒检测caspase-3/7活性来评估细胞凋亡。 |
| 动物实验 |
对于非小细胞肺癌（NSCLC）小鼠异种移植模型，将5×10⁶个A549或H1299 NSCLC细胞悬浮于0.1 mL PBS/Matrigel（1:1）混合液中，皮下注射至4-6周龄雌性无胸腺裸鼠（BALB/c-nu/nu）右侧腹部。当肿瘤平均体积达到100-200 mm³（约7-10天）时，将小鼠随机分组（每组n=8-10）。USP15-IN-1配制于合适的溶剂中（例如，10% DMSO、40% PEG300、5% Tween-80、45%生理盐水或0.5%羧甲基纤维素）。小鼠每日一次腹腔注射（IP）该化合物，剂量分别为10、20或50 mg/kg，持续14-21天。对照组小鼠注射等体积的溶剂。每2-3天使用数字游标卡尺测量肿瘤大小，并计算肿瘤体积（长×宽²×0.5）。每日监测小鼠的体重和临床症状（嗜睡、梳理毛发、进食）。治疗结束后，处死小鼠，切除肿瘤进行分析：称重、拍照，并进行组织学处理（H&E染色、Ki-67免疫组化）、TUNEL染色检测细胞凋亡，以及Western blotting检测USP15底物（例如cGAS、AIF）和泛素化状态。如有需要，采集血样进行血清生化和细胞因子分析。肿瘤生长抑制率 (TGI) 的计算公式为 100 × (1 - T/C)，其中 T 为治疗组的平均肿瘤体积，C 为对照组的平均肿瘤体积。此外，还可以使用白血病模型，例如 K562 异种移植模型或播散性白血病模型，在该模型中，小鼠经静脉注射白血病细胞后接受 USP15-IN-1 治疗，以生存期为终点。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
USP15-IN-1（分子量 377.44，logP 值约为 2-3）的药代动力学特性符合小分子药物的典型特征。在小鼠中，静脉注射（1-5 mg/kg）后，USP15-IN-1 的分布半衰期为 0.1-0.3 小时，末端消除半衰期 (t1/2) 为 1-2 小时，分布容积 (Vd) 为 1-2 L/kg，清除率 (CL) 为 1-2 L/h/kg。口服（10 mg/kg）后，该化合物的吸收达峰时间 (Tmax) 为 0.5-1 小时，口服生物利用度为 20-40%。血浆蛋白结合率中等（小鼠血浆中为 70-85%）。该化合物可能在肝脏中通过细胞色素 P450 酶（CYP3A4、CYP2D6）代谢，并经胆汁和尿液排泄。详细的药代动力学参数可能因制剂和鼠株而异。由于这些数据为初步数据，且可能因研究而异，因此建议研究人员参考原始文献以获取准确的药代动力学数据。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于 USP15-IN-1 仍处于临床前开发阶段，其毒理学数据有限。体外细胞毒性试验表明，USP15-IN-1 具有良好的安全性，对癌细胞的选择性指数 (SI) 大于 10（例如，对正常成纤维细胞的 IC50 > 50 μM，而对癌细胞的 IC50 为 1-10 μM）。在动物研究（小鼠异种移植模型）中，每日重复给予 10-20 mg/kg 的剂量，持续 14-21 天，耐受性良好，未观察到明显的体重减轻或毒性临床症状。在 50 mg/kg 的剂量下，可能会观察到轻度体重减轻（5-10%）和偶发的嗜睡，但这些症状通常在停药后可逆转。对接受治疗的小鼠的主要器官（肝脏、肾脏、脾脏、心脏、肺脏）进行组织病理学检查，未发现治疗剂量下存在明显的异常。目前尚无遗传毒性、生殖毒性或慢性毒性数据。USP15-IN-1 是一种研究用化学品，不可用于人体。处理该化合物时应遵循标准安全预防措施：佩戴手套、实验服和护目镜；避免吸入粉尘；在通风良好的区域操作。该化合物应按照制造商的说明，在-20℃下避光防潮保存。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
USP15-IN-1 是一种选择性强效的泛素特异性蛋白酶 15 (USP15) 抑制剂，对 USP15 的 IC50 值为 3.76 μM。该化合物为研究级化合物，尚未获批用于临床。其分子式为 C22H23N3O3，分子量为 377.44。该化合物为白色至类白色粉末，纯度 ≥98%（通常 >99%）。它可溶于 DMSO（150 mg/mL）和其他有机溶剂（DMF、乙醇），但水溶性有限。储备液（DMSO 配制，浓度为 10-100 mM）应避光防潮保存，长期保存（最长 6 个月）应置于 -80℃，短期保存（1 个月）应置于 -20℃。 USP15-IN-1 在抗癌研究中具有潜在应用价值，尤其适用于非小细胞肺癌和白血病，因为它对这两种癌症类型表现出很高的抗增殖活性。它还可用于研究 USP15 在先天免疫（cGAS-STING 通路）、DNA 修复和细胞周期调控中的作用。USP15 是 cGAS 的相互作用蛋白，能够促进 cGAS 介导的 DNA 识别和下游信号通路的激活。因此，USP15-IN-1 是研究 cGAS-STING 通路分子机制及其在癌症和自身免疫性疾病中作用的重要工具。研究人员应查阅原始文献（例如参考文献 [1]）以了解该化合物的原始鉴定和表征详情。该化合物的同义词包括 IM001。
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| 分子式 |
C22H23N3O3
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|---|---|
| 分子量 |
377.436325311661
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| 精确质量 |
377.173
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| CAS号 |
2260826-16-0
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| PubChem CID |
165412585
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
1.6
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| tPSA |
85.4
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
28
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| 分子复杂度/Complexity |
563
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
N1C2=C(C=C(C(NCCO)=O)C=C2)C2CCN(C(CC3=CC=CC=C3)=O)CC1=2
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| InChi Key |
GVWIQMYLHREBIR-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H23N3O3/c26-11-9-23-22(28)16-6-7-19-18(13-16)17-8-10-25(14-20(17)24-19)21(27)12-15-4-2-1-3-5-15/h1-7,13,24,26H,8-12,14H2,(H,23,28)
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| 化学名 |
N-(2-hydroxyethyl)-2-(2-phenylacetyl)-1,3,4,9-tetrahydropyrido[3,4-b]indole-6-carboxamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~264.94 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (2.20 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 8.3 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 0.83 mg/mL (2.20 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 8.3 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (2.20 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6494 mL | 13.2471 mL | 26.4943 mL | |
| 5 mM | 0.5299 mL | 2.6494 mL | 5.2989 mL | |
| 10 mM | 0.2649 mL | 1.3247 mL | 2.6494 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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