| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Kv2.1 channel (IC50 = 31 µM in MIN6 cells; IC50 = 43 µM in Kv2.1-overexpressing CHO cells) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
在MIN6细胞中，单独使用长春碱（50 µM）在2.8 mM葡萄糖浓度下对胰岛素分泌无影响，但在16.8 mM葡萄糖浓度下显著增强胰岛素分泌，表现出剂量和葡萄糖依赖性的葡萄糖刺激胰岛素分泌（GSIS）增强作用，EC50为50 µM。长春碱通过抑制Kv2.1通道降低电压依赖性外向钾电流。长春碱（20或50 µM）不影响MIN6细胞中的胰岛素启动子活性（RIP-luc检测）或细胞内cAMP水平。硝苯地平（10 µM，L-VDCC阻滞剂）、二氮嗪（200 µM，KATP通道开放剂）和亚油酸甲酯（LAME，20 µM，特异性Kv2.1通道开放剂）均能显著降低长春碱对GSIS的增强作用。在过表达Kv2.1N的MIN6细胞中，长春碱增强葡萄糖刺激的胰岛素分泌（GSIS）的能力丧失。长春碱（50 µM）显著降低了细胞因子（5 ng/mL IL-1β、100 ng/mL IFN-γ、10 ng/mL TNF-α）诱导的MIN6细胞凋亡率，从26.36%降至16.45%，并逆转了细胞因子促进的裂解型caspase-3水平。这种抗凋亡作用在过表达Kv2.1N的MIN6细胞中消失。[1] 在原代小鼠胰岛中，长春碱（10、20、50 µM）以剂量和葡萄糖依赖的方式增加胰岛素分泌。 [1]在骨髓巨噬细胞 (BMM) 中，长春碱 (1.25、2.5、5、10 µM) 呈剂量依赖性地降低了 RANKL (100 ng/mL) 诱导的 TRAP 阳性多核破骨细胞的数量和大小（面积）。浓度高达 40 µM 时，长春碱对 BMM 没有细胞毒性作用。长春碱 (5、10 µM) 呈剂量依赖性地抑制了 RANKL 刺激的 BMM 中细胞内 ROS 的产生。长春碱 (10 µM) 处理导致足突 F-肌动蛋白带的大小显著减小，并降低了成熟破骨细胞的多核性。长春碱（5、10 µM）显著抑制了在羟基磷灰石涂层板上培养的成熟破骨细胞的吸收活性。长春碱（10 µM）显著阻断了RANKL诱导的MAPK成员（ERK、JNK和p38）的磷酸化，但不影响NF-κB通路中IκBα的降解或p65的磷酸化。它抑制了RANKL诱导的c-Fos和NFATc1的表达。长春碱（5、10 µM）下调了NFATc1、CTSK、MMP9和TRAP基因的表达。[2] 在大鼠肾组织中，长春碱（20 mg/kg）显著降低了环磷酰胺（CP）诱导的TNF-α、IL-1β、IL-6和NF-κB水平的升高。它还下调了环磷酰胺诱导的Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达，同时上调了Bcl-2蛋白表达。长春碱显著减弱了环磷酰胺诱导的JNK、ERK1/2和p38基因表达的上调。[3]
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| 体内研究 (In Vivo) |
在db/db小鼠中，口服长春碱（40 mg/kg/天）4周可显著降低空腹血糖，改善葡萄糖耐量（口服葡萄糖耐量试验，OGTT），轻微降低糖化血红蛋白（HbA1c）水平，降低血浆甘油三酯（TG）水平，并升高空腹血浆胰岛素水平。免疫组化结果显示，胰岛素阳性胰岛细胞数量显著增加。[1] 在链脲佐菌素/高脂饮食（STZ/HFD）诱导的2型糖尿病大鼠中，口服长春碱（20 mg/kg/天）4周可显著降低空腹血糖，改善葡萄糖耐量（OGTT），大幅降低糖化血红蛋白（HbA1c）水平，降低血浆甘油三酯（TG）水平，并升高空腹血浆胰岛素水平。长春碱治疗明显减轻了STZ/HFD诱导的胰岛细胞破坏，并保留了更多胰岛素阳性胰岛细胞。 [1]
在正常C57小鼠中，禁食12小时后口服长春碱（50 mg/kg）对8小时内的空腹血糖水平影响甚微，而甲苯磺丁脲则显著降低了血糖水平。[1] 在卵巢切除（OVX）诱导的骨丢失小鼠模型中，每隔一天腹腔注射长春碱（5或10 mg/kg体重），持续6周，可剂量依赖性地减轻OVX的有害影响。微型CT分析显示，高剂量（10 mg/kg）长春碱治疗可显著保护骨骼免受骨丢失和骨小梁退化的影响，改善骨体积/组织体积比（BV/TV）、骨小梁数量（Tb. N）和骨小梁间距（Tb. Sp.）。组织学评估（TRAP染色）显示，长春碱呈剂量依赖性地降低了卵巢切除术（OVX）诱导的破骨细胞数量和活性（N.Oc/BS和Oc.S/BS）的升高。[2] 在顺铂（CP）诱导的肾毒性大鼠模型中，连续10天口服长春碱（20 mg/kg/天，第7天注射CP）显著降低了CP诱导的肾脏相对重量、血清肌酐、尿素和BUN水平的升高。它还通过降低MDA水平和增加GSH、SOD和CAT活性来抑制CP诱导的氧化应激。组织病理学检查显示，长春碱治疗显著减少了CP诱导的肾小管坏死、炎症细胞浸润、出血和透明管型形成。[3] |
| 酶活实验 |
为了确定其对 Kv2.1 和 KATP 通道的影响，我们使用 Axon 200B 放大器进行了全细胞膜片钳实验。将 MIN6 细胞或过表达该通道的 CHO 细胞钳制在 -70 mV，并以 10 mV 的增量将电压阶跃至 +130 mV，记录外向电流。对于 MIN6 细胞，细胞外液中含有硝苯地平以阻断 L 型 Ca2+ 电流。施加长春碱后，测量其对持续外向 K+ 电流的抑制作用。通过拟合剂量反应曲线，估算长春碱对 MIN6 细胞电流阻断的 IC50 值。 [1]
为了评估对 MAPK 和 NF-κB 通路的影响，将骨髓巨噬细胞 (BMM) 进行血清饥饿处理，预先用或不用长春碱 (10 µM) 处理 1 小时，然后用 RANKL (100 ng/mL) 刺激 0、5、10、20、30 或 60 分钟。提取总细胞蛋白，通过 SDS-PAGE 电泳分离，转移至硝酸纤维素膜，并用针对 ERK、JNK、p38、IκBα 和 p65 总蛋白和磷酸化形式的特异性抗体进行免疫印迹分析。对蛋白条带进行显影和定量。[2] 为了分析肾组织中的细胞凋亡通路，从匀浆化的肾组织中提取蛋白质，通过 12% SDS-PAGE 电泳分离，并转移至 PVDF 膜。将膜封闭后，与 Bax (1:2000)、Bcl-2 (1:1500)、caspase-3 (1:1300) 和 caspase-9 (1:1000) 的一抗于 4°C 孵育过夜，随后与 HRP 标记的二抗孵育。采用化学发光法检测蛋白条带，并以 β-actin 进行标准化。[3] |
| 细胞实验 |
胰岛素分泌测定（GSIS）中，将MIN6细胞接种于24孔板（5×10⁵个细胞/孔）。在无葡萄糖的KRB缓冲液中饥饿2小时后，将细胞与长春碱和不同浓度的葡萄糖（2.8、5.6、11.2、16.8、25 mM）共同孵育2小时。使用ELISA试剂盒测定上清液中的胰岛素含量。对于原代胰岛，将分离的小鼠胰岛在无葡萄糖的KRB缓冲液中饥饿2小时，然后用长春碱（10、20、50 µM）和葡萄糖刺激2小时。 [1]
为进行细胞活力（细胞毒性）测定，将骨髓单核细胞 (BMM) 接种于 96 孔板中，并用不同浓度的长春碱 (1.25、2.5、5、10、20、40 µM) 处理 48 小时。采用 CCK-8 法，通过测量 450 nm 处的吸光度来评估细胞活力。[2] 为进行破骨细胞分化测定，将 BMM 接种于 96 孔板中（6 x 10^3 个细胞/孔），并在有或无长春碱 (1.25、2.5、5、10 µM) 的情况下，用 RANKL (100 ng/mL) 和 M-CSF (50 ng/mL) 刺激 5 天。随后对细胞进行TRAP活性染色，并使用ImageJ软件计数TRAP阳性多核细胞（≥3个细胞核）并量化其面积。[2] 为了测量细胞内ROS，将用RANKL刺激48小时的BMM细胞（有或无长春碱，5、10 µM）与DCFH-DA孵育40分钟。在荧光显微镜下检测荧光强度（DCF），并使用ImageJ软件进行分析。[2] 为了对足突F-肌动蛋白带进行染色，将用RANKL刺激5天的BMM来源的破骨细胞（有或无长春碱，5、10 µM）进行固定、透化处理，用罗丹明标记的鬼笔环肽（用于F-肌动蛋白）和DAPI（用于细胞核）染色，并通过荧光显微镜观察。 [2] 对于羟基磷灰石吸收测定，将前破骨细胞（用RANKL刺激3天）重新接种于羟基磷灰石包被的骨吸收测定板上，并用长春碱（5、10 µM）处理或不处理48小时。去除细胞，并定量吸收陷窝面积。[2] 对于定量实时PCR (qPCR)，使用TRIzol试剂从细胞中提取总RNA，反转录为cDNA，并使用SYBR Green PCR Master Mix和CTSK、MMP9、NFATc1和TRAP的特异性引物进行扩增。基因表达以GAPDH为内参，采用2-ΔΔCT法进行标准化。 [2] 为了分析大鼠肾脏组织中的基因表达，提取总RNA，并使用SYBR Green一步法定量RT-PCR试剂盒进行JNK、p38和ERK1/2的RT-PCR。GAPDH用作管家基因，并使用2-ΔΔCT法计算相对表达量。[3] |
| 动物实验 |
对于db/db小鼠模型，将8周龄雄性db/db小鼠（约30g）每日口服给予赋形剂或长春碱（40 mg/kg/天），持续4周。每周测量体重和空腹血糖。4周后，进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT），小鼠禁食6小时后口服2 g/kg葡萄糖，并在0、15、30、60、90和120分钟时测量血糖。试验结束时，测量血浆胰岛素、糖化血红蛋白（HbA1c）和甘油三酯（TG）水平。取出胰腺进行免疫组织化学染色。[1]
对于STZ/HFD诱导的2型糖尿病大鼠模型，将喂食高脂饮食（HFD）2周的雄性SD大鼠腹腔注射STZ（25 mg/kg）。糖尿病大鼠每日口服给予赋形剂或长春碱（20 mg/kg/天），持续4周。隔夜禁食后进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT），口服葡萄糖（2 g/kg）。测定血糖、血浆胰岛素、糖化血红蛋白（HbA1c）和甘油三酯（TG）水平。取出胰腺进行组织学和免疫组织化学分析。[1] 在正常小鼠急性低血糖试验中，6周龄的正常C57/BL6小鼠禁食12小时后，口服给予长春碱（50 mg/kg）或甲苯磺丁脲（50 mg/kg）。分别于0、1、2、4、6和8小时采集尾血，测定血糖水平。[1] 在卵巢切除术（OVX）诱导的骨丢失小鼠模型中，11周龄的雌性C57BL/6J小鼠接受双侧卵巢切除术或假手术。术后7天，小鼠每隔一天腹腔注射生理盐水（假手术组和卵巢切除组）或长春碱（5或10 mg/kg体重），持续6周。处死后，切取胫骨进行微型CT分析和组织学评估（TRAP染色）。[2] 对于顺铂诱导的肾毒性大鼠模型，将雄性Wistar大鼠（170-180g，6-8周龄）分为四组（n=6）。连续10天口服长春碱（20 mg/kg/天）。第7天，单次腹腔注射顺铂（5 mg/kg）。10天结束后，处死大鼠。采集血液和肾脏组织进行生化分析、组织病理学（H&E染色）和蛋白质印迹分析。[3] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
体外长春碱对 Kv2.1 通道的 IC50 值 (31 µM) 与其体内有效剂量 (20-40 mg/kg) 之间的差异可能是由于其口服生物利用度低所致（数据未显示）。[1]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在db/db小鼠和STZ/HFD诱导的2型糖尿病大鼠中，用长春碱治疗4周后，未观察到对体重和组织重量的不良影响。[1]
与甲苯磺丁脲不同，长春碱（50 mg/kg，口服）对正常小鼠的空腹血糖水平影响甚微，提示其低血糖的潜在副作用较低。[1] 体外实验表明，浓度高达40 µM的长春碱对骨髓单核细胞（BMM）的活力无细胞毒性作用。[2] 在环磷酰胺（CP）诱导的大鼠肾毒性模型中，与对照组相比，长春碱（20 mg/kg）未引起肾病标志物水平或组织学方面的任何显著变化，表明该剂量下无毒性。[3] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
长春碱是一种属于生物碱酯、有机杂戊烷化合物、甲酯、乙酸酯、叔胺化合物和叔醇类的长春花碱。它是长春花正离子(1+)的共轭碱。据报道，长春碱存在于长春花（毛叶长春花，Catharanthus trichophyllus）、长春花（长春花，Catharanthus roseus）以及其他具有相关数据的生物体中。长春碱是一种吲哚生物碱，通过抑制微管组装发挥抗有丝分裂活性。(NCI)
长春碱是一种源自长春花（Catharanthus roseus）的天然产物，长春花是一种传统上用作抗糖尿病民间药物的植物。该研究表明，长春碱有助于该植物的抗糖尿病作用。 [1] 长春碱是一种Kv2.1抑制剂，可增强葡萄糖刺激的胰岛素分泌（GSIS），并保护胰岛β细胞免于凋亡。其葡萄糖依赖性刺激特性使其能够避免磺脲类药物常见的低血糖副作用。该研究强调了这种天然产物在抗糖尿病药物先导化合物开发中的潜力。[1] 长春碱具有抗破骨细胞生成和抗骨吸收特性，使其成为治疗破骨细胞介导的溶骨性疾病（如绝经后骨质疏松症）的潜在药物。它通过抑制RANKL诱导的MAPK通路和细胞内ROS的产生来抑制破骨细胞的分化和功能，从而抑制c-Fos和NFATc1的诱导。 [2] 长春碱通过多种机制减轻顺铂引起的大鼠肾毒性，这些机制包括抗氧化、抗炎和抗凋亡特性，可能通过调节ERK通路发挥作用。[3] |
| 分子式 |
C25H32N2O6
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|---|---|
| 分子量 |
456.5314
|
| 精确质量 |
456.226
|
| CAS号 |
2182-14-1
|
| PubChem CID |
260535
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
569.8±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
163-165ºC
|
| 闪点 |
298.4±30.1 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.6 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.626
|
| LogP |
2.2
|
| tPSA |
88.54
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
33
|
| 分子复杂度/Complexity |
864
|
| 定义原子立体中心数目 |
6
|
| SMILES |
O(C(C([H])([H])[H])=O)C1([H])[C@](C(=O)OC([H])([H])[H])([C@]2([H])[C@@]3(C4C([H])=C([H])C(=C([H])C=4N2C([H])([H])[H])OC([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])N2C([H])([H])C([H])=C([H])[C@]1(C([H])([H])C([H])([H])[H])[C@@]23[H])O[H]
|
| InChi Key |
CXBGOBGJHGGWIE-ACSXSLCXSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C25H32N2O6/c1-6-23-10-7-12-27-13-11-24(19(23)27)17-9-8-16(31-4)14-18(17)26(3)20(24)25(30,22(29)32-5)21(23)33-15(2)28/h7-10,14,19-21,30H,6,11-13H2,1-5H3/t19-,20+,21+,23+,24+,25-/m0/s1
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| 化学名 |
methyl (1R,9R,10S,11R,12R,19R)-11-acetyloxy-12-ethyl-10-hydroxy-5-methoxy-8-methyl-8,16-diazapentacyclo[10.6.1.01,9.02,7.016,19]nonadeca-2(7),3,5,13-tetraene-10-carboxylate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~250 mg/mL (~547.61 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 6.25 mg/mL (13.69 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 62.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 6.25 mg/mL (13.69 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 62.5mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 6.25 mg/mL (13.69 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1904 mL | 10.9522 mL | 21.9044 mL | |
| 5 mM | 0.4381 mL | 2.1904 mL | 4.3809 mL | |
| 10 mM | 0.2190 mL | 1.0952 mL | 2.1904 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
鲑鱼精DNA
绞股蓝皂苷LI
伪金丝桃素
Trans-4-Cotininecarboxylic acid
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