Vorinostat (SAHA; MK0683)   中文名称: 伏立诺他

HDAC1 ( IC50 = 10 nM ); HDAC3 ( IC50 = 20 nM ); HDAC2; HDAC7; HDAC11; Autophagy; Mitophagy
Histone deacetylase (HDAC), including HDAC1, HDAC2, HDAC3, HDAC6 and HDAC7, HDAC11. The IC50 values for HDAC1 and HDAC3 are 10 nM and 20 nM respectively.
Histone Deacetylase 1 (HDAC1): Vorinostat (SAHA; MK0683) inhibits recombinant human HDAC1 with an IC50 of 10 nM; no Ki/EC50 values reported [1]
- Histone Deacetylase 2 (HDAC2): Vorinostat inhibits recombinant human HDAC2 with an IC50 of 15 nM; no Ki/EC50 values reported [1]
- Histone Deacetylase 3 (HDAC3): Vorinostat inhibits recombinant human HDAC3 with an IC50 of 20 nM; no Ki/EC50 values reported [1]
- Histone Deacetylase 6 (HDAC6): Vorinostat inhibits recombinant human HDAC6 with an IC50 of 100 nM; no Ki/EC50 values reported [1]
- Class I/II HDACs (pan-inhibition): Vorinostat shows minimal activity against Class III HDACs (sirtuins, IC50 > 10,000 nM) and no inhibition of histone acetyltransferases (HATs), confirming pan-Class I/II HDAC selectivity [1,4]

体外活性：Vorinostat 抑制 HDAC1 和 HDAC3 的活性，IC50 分别为 10 nM 和 20 nM。伏立诺他还会导致组蛋白 H4 显着过度乙酰化。 Vorinostat 在微摩尔浓度 (2.5-7.5 μM) 下抑制三种前列腺癌细胞系 LNCaP、PC-3 和 TSU-Pr1 的生长，并诱导 LNCaP 细胞呈剂量依赖性细胞死亡。 Vorinostat 处理 MCF-7 细胞可抑制细胞增殖，IC50 为 0.75 μM，导致细胞积聚在细胞周期的 G1 和 G2-M 期。 Vorinostat 还可诱导雌激素受体阴性细胞系 SKBr-3 和视网膜母细胞瘤阴性细胞系 MDA-468 的分化。 1 μM 伏立诺他治疗 8 小时或更长时间足以不可逆地诱导人多发性骨髓瘤 (MM) 细胞凋亡。伏立诺他处理的 MM 细胞的基因表达谱并不以全局转录激活为标志，而是以基因的特定功能组的协调转录变化为标志，例如细胞因子诱导的增殖/生存信号级联、癌基因-肿瘤抑制基因、细胞凋亡调节因子、DNA合成修复和细胞周期，以及蛋白酶体泛素功能。激酶测定：免疫沉淀-HDAC 测定，将 Jurkat 细胞的裂解物在冰上孵育 1 小时，并在 4 °C 下以 12,000 g 离心 10 分钟进行澄清。上清液用 30 μL 50% 蛋白 G-Sepharose 浆料在 4 °C 下预澄清 1 小时。通过离心沉淀珠子，并将上清液与来自抗 HDAC1 或 HDAC3 多克隆抗血清的 10 μg IgG 级分在 4 °C 下孵育 1 小时（在室温下与同源或异源免疫肽预孵育 2 小时）。两种抗血清都是通过使用与匙孔血蓝蛋白偶联的合成肽在兔子中产生针对 HDAC1 和 HDAC3 羧基末端肽的。添加 30 μL 50% 蛋白 G-Sepharose 浆液，在 4 °C 下反应 1 小时。通过离心沉淀免疫复合物并用 1 mL 裂解缓冲液洗涤 3 次。将珠子重悬于 200 μL HDAC 缓冲液（20 mM Tris-HCl，pH 8.0/150 mM NaCl/10% 甘油）中，并使用对应于组蛋白 H4 氨基酸 1-24 的 3H 乙酰化肽进行 HDAC 测定。通过闪烁计数对释放的[3H]乙酸进行定量。对于抑制研究，将免疫沉淀复合物与不同浓度的伏立诺他在 4 °C 下预孵育 30 分钟。细胞测定：将细胞（LNCaP、PC-3 和 TSU-Pr1）暴露于不同浓度的伏立诺他 1、2、3 和 4 天。通过台盼蓝染料排除来评估细胞活力。

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- 伏立诺他（Vorinostat; SAHA; MK0683）以剂量依赖方式抑制人子宫肉瘤MES-SA细胞的生长。在3 μM浓度下，它可减少细胞增殖，优先靶向I类HDACs（HDAC2、HDAC3）和II类HDAC7，并上调p21WAF1表达，通过DNA片段化和胱天蛋白酶激活检测显示凋亡增加 [1]
- 在神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH和SK-N-Be(2)C中，伏立诺他抑制细胞生长，IC25值分别为1 μM和0.5 μM，其机制为诱导组蛋白和非组蛋白的乙酰化，改变与细胞周期停滞和凋亡相关的基因表达谱 [2]
- 在HPV-18感染的角质形成细胞中，伏立诺他抑制病毒DNA扩增，降低癌蛋白E6和E7的活性，并通过重新激活因组蛋白去乙酰化而沉默的抑癌基因，诱导分化细胞凋亡 [3]
- 在多发性骨髓瘤细胞系中，伏立诺他（0.5-2 μM）诱导组蛋白超乙酰化，下调抗凋亡蛋白（如Bcl-2），并增强对糖皮质激素等细胞毒性药物的敏感性 [6]
- 在原发性慢性淋巴细胞白血病（CLL）细胞中，伏立诺他（1-5 μM）增加组蛋白乙酰化，上调促凋亡基因，并诱导凋亡，对正常B细胞无显著毒性 [9]

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白血病细胞抗增殖：Jurkat（T细胞白血病）和HL-60（急性髓系白血病，AML）细胞用伏立诺他（0.1–5 μM）处理72小时。MTT实验显示剂量依赖性生长抑制，IC50分别为0.5 μM（Jurkat）和0.8 μM（HL-60）。2 μM浓度下，伏立诺他使两种细胞系的活力均降低约80%[2]
- 实体瘤细胞抗增殖：MCF-7（乳腺癌）、HCT116（结肠癌）和A549（肺癌）细胞用伏立诺他（0.5–10 μM）处理96小时。克隆形成实验显示IC50分别为1.2 μM（MCF-7）、1.5 μM（HCT116）和2.0 μM（A549）。5 μM浓度下，所有细胞系的克隆形成均被抑制>90%[3]
- 组蛋白乙酰化诱导：Jurkat细胞用伏立诺他（0.1–2 μM）处理4小时，western blot检测显示乙酰化组蛋白H3（Ac-H3）和H4（Ac-H4）呈浓度依赖性增加。1 μM浓度下，Ac-H3水平是溶媒对照组的约5倍，总H3/H4表达无变化[1]
- 凋亡诱导：HL-60细胞用伏立诺他（1–3 μM）处理48小时，Annexin V阳性细胞占比约60%（对照组约5%），caspase-3/7活性激活（2 μM时增加2.5倍）。Western blot证实2 μM浓度下PARP剪切（凋亡标志）[2,5]
- 抑癌基因激活：MCF-7细胞用伏立诺他（0.5–2 μM）处理24小时，RT-PCR检测显示p21WAF1/CIP1（细胞周期抑制剂）mRNA呈剂量依赖性上调（1 μM时增加3倍），western blot显示蛋白水平上调4倍（1 μM时）。这与G1期细胞周期阻滞相关（2 μM时G1期细胞增加40%）[3,5]
- 皮肤T细胞淋巴瘤（CTCL）细胞敏感性：Hut-78（CTCL）细胞用伏立诺他（0.2–1 μM）处理72小时，IC50为0.3 μM，2 μM浓度下诱导>90%凋亡。这与Ac-H4增加和癌基因c-Myc下调相关[8]

施用伏立诺他（约 100 毫克/公斤/天）可显着抑制裸鼠 CWR22 人前列腺异种移植物的生长，剂量为 25 毫克/公斤/天、50 毫克/天时，肿瘤减少 78%、97% 和 97%。与对照相比，分别为 100 mg/kg/天和 100 mg/kg/天。 Vorinostat 诱导 CWR22 细胞中乙酰化核心组蛋白的积累和前列腺特异性抗原 mRNA 的表达，导致血清前列腺特异性抗原的水平高于仅根据肿瘤体积预测的水平。口服 Vorinostat (0.67g/L) 可穿过血脑屏障，增加大脑中的组蛋白乙酰化，并显着改善亨廷顿病 R6/2 小鼠模型的运动障碍。

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- 在荷MES-SA异种移植瘤的裸鼠中，口服伏立诺他（50 mg/kg/天）与对照组相比，肿瘤生长抑制率>50%，且无显著体重减轻或毒性。肿瘤中组蛋白乙酰化水平和p21WAF1表达增加 [1]
- 在HPV-18诱导的 carcinogenesis小鼠模型中，伏立诺他通过抑制病毒复制和重新激活p53通路基因，降低肿瘤发生率和大小 [3]
- 在原发性血小板增多症（ET）和真性红细胞增多症（PV）患者中，口服伏立诺他（400 mg/天）可使升高的白细胞和血小板计数正常化，降低JAK2V617F突变等位基因负荷，并减小脾肿大，部分患者应答持续≥6个月 [7]

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Jurkat移植瘤抑制：6–8周龄雌性裸鼠皮下接种5×10⁶个Jurkat细胞，肿瘤达~100 mm³后分组处理：（1）溶媒组：5% DMSO/PBS，腹腔注射，每周5次，共3周；（2）伏立诺他25 mg/kg组：溶于5% DMSO/PBS，腹腔注射，每周5次，共3周；（3）伏立诺他50 mg/kg组：同剂型，腹腔注射，每周5次，共3周。50 mg/kg组肿瘤生长抑制率（TGI）为60%，中位生存期延长12天（对照组为21天）[2]
- MCF-7移植瘤抑制：携带皮下MCF-7肿瘤的SCID小鼠分组处理：（1）溶媒组：0.5%甲基纤维素，灌胃，每日1次，共4周；（2）伏立诺他50 mg/kg组：悬浮于0.5%甲基纤维素，灌胃，每日1次，共4周；（3）伏立诺他100 mg/kg组：同剂型，灌胃，每日1次，共4周。100 mg/kg组TGI为70%，肿瘤组织中Ac-H3水平是对照组的约4倍（免疫组化检测），无明显体重下降[3,6]
- AML移植瘤生存延长：NOD/SCID小鼠静脉注射1×10⁷个HL-60细胞，7天后分组：（1）溶媒组：5% DMSO/PBS，腹腔注射，每周5次；（2）伏立诺他50 mg/kg组：溶于5% DMSO/PBS，腹腔注射，每周5次。对照组中位生存期24天，处理组为38天，实验结束时骨髓原始细胞减少约50%[8]

重组HDAC酶（如HDAC1、HDAC3）与不同浓度的伏立诺他在含乙酰化组蛋白底物的反应缓冲液中孵育。通过比色法或荧光法检测释放的乙酸离子，测量剩余的去乙酰化酶活性。计算每种HDAC同工酶的ID50（引起50%抑制的浓度） [1,4]

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将 Jurkat 细胞裂解物用冰处理一小时，然后在 4 °C 下以 12,000 g 离心十分钟以除去任何残留物质。将 30 μL 50% 蛋白 G-Sepharose 浆液添加到上清液中，并在 4 °C 下放置一小时以对其进行预澄清。使用同源或异源免疫肽，通过离心沉淀珠子，然后将上清液与来自抗 HDAC1 或 HDAC3 多克隆抗血清的 10 μg IgG 级分在 4 °C 下孵育 1 小时（在室温下预孵育 2 小时） ）。使用与匙孔血蓝蛋白偶联的合成肽，用兔子来产生针对 HDAC1 和 HDAC3 羧基末端肽的抗血清。添加 30 μL 50% 蛋白 G-Sepharose 浆液，在 4°C 下放置半小时。免疫复合物离心后，用1 mL裂解缓冲液洗涤3次。 HDAC 测定中使用对应于组蛋白 H4 氨基酸 1 至 24 的 ³3H-乙酰化肽，并将珠子重悬于 200 μL HDAC 缓冲液（20 mM Tris-HCl，pH 8.0）中。 /150 mM 氯化钠/10% 甘油）。通过使用闪烁计数，可以测量释放的[³H]乙酸。将不同浓度的伏立诺他与免疫沉淀复合物在 4 °C 下预孵育 30 分钟，以进行抑制研究。

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重组HDAC1/2/3/6活性检测：将纯化的重组人HDAC1、2、3或6在反应缓冲液（50 mM Tris-HCl pH8.0、137 mM NaCl、2.7 mM KCl、1 mM MgCl2）中与荧光肽底物（含乙酰赖氨酸的肽偶联7-氨基-4-甲基香豆素，AMC）孵育。加入系列浓度的伏立诺他（0.1 nM–10 μM），与酶在37°C预孵育15分钟后，加入底物启动反应，孵育60分钟后用三氯乙酸终止。检测荧光强度（激发光360 nm，发射光460 nm），从剂量-反应曲线计算IC50[1]
- HDAC选择性面板检测：用上述荧光实验（SIRT1）或HAT特异性乙酰辅酶A掺入实验（p300），检测10 μM 伏立诺他对重组SIRT1（III类HDAC）和p300（HAT）的活性。两种靶点的抑制率均<5%，证实其对I/II类HDAC的特异性[4]

- 增殖和凋亡实验：将癌细胞（如MES-SA、神经母细胞瘤细胞系）接种于96孔板，用伏立诺他（0.1-10 μM）处理24-72小时。通过MTT法或台盼蓝排斥法评估细胞活力。通过膜联蛋白V-FITC/PI染色（流式细胞术）、DNA laddering或caspase-3/7活性实验检测凋亡 [1,2,9]
- 基因表达分析：收集经伏立诺他处理的细胞，提取总RNA，通过RT-PCR或微阵列分析定量p21WAF1、Bcl-2或病毒癌基因（E6/E7）的表达变化。通过western blot使用乙酰化组蛋白特异性抗体检测组蛋白乙酰化水平 [1,3,6]
- 药物联合实验：多发性骨髓瘤细胞单独用伏立诺他（0.5 μM）或与地塞米松（100 nM）联合处理，通过测量细胞活力评估协同效应 [6]

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使用 RIPA 缓冲液（25 mM Tris-HCl pH 7.6、150 mM NaCl、1% NP-40、1% 脱氧胆酸钠、0.1% SDS）制备细胞裂解物，并使用 Bio-Rad DC 蛋白测定法测量蛋白质浓度。蛋白质裂解物通过 SDS-PAGE 分离后转移到硝酸纤维素膜上。使用随后的稀释液和抗体：小鼠抗 p21WAF1 (0.5 μg/mL)、兔抗 HDAC1 (1 μg/mL)、兔抗 HDAC2 (1 μg/mL)、兔抗 HDAC3 (9 μg/mL) ) 和兔抗 HDAC7 (3 μg/mL)。二抗采用猪抗兔和兔抗鼠HRP偶联抗体，终浓度为1 μg/mL。所有一抗在洗涤前均在 4°C 下孵育一整晚，二抗在室温下孵育两小时。增强的化学发光测定允许特定蛋白质条带的可视化。为了显示蛋白质样品的均匀加载，在每个蛋白质印迹中都会探测 β-微管蛋白。

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MTT细胞活力实验：将Jurkat、HL-60或MCF-7细胞接种于96孔板（5×10³个细胞/孔），加入伏立诺他（0.1–10 μM，每浓度3复孔），培养72–96小时。每孔加入10 μL MTT试剂（5 mg/mL），4小时后加入100 μL DMSO溶解甲臜，检测570 nm吸光度，通过非线性回归计算IC50[2,3]
- 组蛋白乙酰化western blot：用伏立诺他（0.1–2 μM）处理Jurkat或MCF-7细胞后，用含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞。裂解物经SDS-PAGE分离后转移至PVDF膜，用抗Ac-H3、Ac-H4、p21、caspase-3抗体和总H3/H4抗体（上样对照）进行免疫印迹，通过光密度法量化化学发光信号[1,5]
- Annexin V/PI凋亡实验：用伏立诺他（1–3 μM）处理HL-60细胞48小时后，用Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）染色，流式细胞术定量凋亡细胞（Annexin V+/PI-和Annexin V+/PI+群体），用流式软件分析数据[5]
- p21 mRNA RT-PCR：用伏立诺他（0.5–2 μM）处理MCF-7细胞24小时后提取总RNA，合成cDNA，通过实时定量RT-PCR（qPCR）检测p21 mRNA水平（以GAPDH为内参基因），用ΔΔCt法计算折叠变化[3]

异氟烷用于麻醉14只12周龄雄性小鼠，随后将5×10⁶个MES-SA细胞皮下注射至小鼠右侧腹部。对照组小鼠注射300 μL空HOP-β-CD（2-羟丙基-β-环糊精）囊泡作为安慰剂。另一组小鼠每日腹腔注射溶于HOP-β-CD的伏立诺他，剂量为50 mg/kg。从注射MES-SA肿瘤细胞后的第四天开始，腹腔注射空囊泡和伏立诺他。每周两次测量肿瘤大小（w² × l × 0.52；使用游标卡尺测量）和小鼠体重。治疗21天后，所有小鼠均通过颈椎脱臼处死。测定不同的肿瘤参数，并将每个肿瘤作为一个整体分离。然后将肿瘤切片用4%福尔马林固定，并冷冻保存以备后续分析。

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- 将携带MES-SA异种移植瘤（皮下植入5×10⁶个细胞）的裸鼠随机分为对照组和治疗组。将Vorinostat溶解于0.5%甲基纤维素溶液中，以50 mg/kg/天的剂量口服给药，持续21天。每2-3天测量一次肿瘤体积和体重，并收集肿瘤进行组织学分析和组蛋白乙酰化Western blot分析[1]。
- 在肿瘤诱导后2周开始，通过灌胃给予Vorinostat治疗（剂量未指定）。对小鼠进行肿瘤发展监测，并收集组织以评估病毒DNA水平和基因表达[3]
- ET/PV患者每日口服400 mg伏立诺他。每月监测血细胞计数、JAK2V617F等位基因负荷和脾脏大小。治疗持续至疾病进展或出现不可接受的毒性[7]

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Jurkat异种移植（腹腔注射）：将5×10⁶个Jurkat细胞悬浮于Matrigel中，皮下注射至雌性裸鼠（每组n=6）。当肿瘤体积达到约100 mm³时：（1）载体：5% DMSO/PBS，腹腔注射，每周5天，持续3周；（2）伏立诺他25 mg/kg：溶于5% DMSO/PBS，腹腔注射，每周5天，持续3周； (3) Vorinostat 50 mg/kg：同上制剂，腹腔注射，每周 5 天，持续 3 周。每周两次测量肿瘤体积（长 × 宽² / 2）和体重[2]
- MCF-7 异种移植瘤（口服给药）：雌性 SCID 小鼠（每组 n=6）皮下注射 1×10⁷ 个 MCF-7 细胞。当肿瘤体积达到约 150 mm³ 时：(1) 赋形剂：0.5% 甲基纤维素，灌胃，每日一次，持续 4 周；(2) Vorinostat 50 mg/kg：溶于 0.5% 甲基纤维素，灌胃，每日一次，持续 4 周；(3) Vorinostat 100 mg/kg：同上制剂，灌胃，每日一次，持续 4 周。研究结束时切除肿瘤进行Ac-H3免疫组化分析[3,6]
- HL-60 AML异种移植（腹腔注射）：NOD/SCID小鼠（每组n=6）静脉注射1×10⁷个HL-60细胞。7天后：（1）载体：5% DMSO/PBS，腹腔注射，每周5天；（2）Vorinostat 50 mg/kg：溶于5% DMSO/PBS，腹腔注射，每周5天。每日监测生存情况，并在研究结束时收集骨髓进行原始细胞计数[8]

吸收、分布和排泄
体外人肝微粒体研究表明，细胞色素P450 (CYP) 的生物转化作用可忽略不计。伏立诺他主要通过代谢消除，尿液中回收的原药剂量不足1%，表明肾脏排泄在伏立诺他的消除过程中不起作用。然而，肾脏排泄在伏立诺他的消除过程中不起作用。
在23例复发或难治性晚期癌症患者中评估了伏立诺他的药代动力学。单次口服400 mg伏立诺他（与高脂餐同服）后，平均±标准差的曲线下面积（AUC）、血清峰浓度（Cmax）和达峰时间（Tmax）分别为5.5±1.8 μM·hr、1.2±0.62 μM和4（2-10）小时。
空腹状态下，单次口服400 mg伏立诺他后，平均AUC和Cmax分别为4.2±1.9 μM·hr、1.2±0.35 μM和1.5（0.5-10）小时。因此，与空腹状态相比，与高脂餐同服可使伏立诺他吸收程度增加（33%），但吸收速率略有下降（Tmax延迟2.5小时）。然而，这些微小的影响预计不具有临床意义。在CTCL患者的临床试验中，伏立诺他与食物同服。
在进食状态下达到稳态后，多次口服400 mg伏立诺他，其平均AUC和Cmax以及中位Tmax分别为6.0±2.0 μM·hr、1.2±0.53 μM和4（0.5-14）小时。
在0.5至50 μg/mL的浓度范围内，伏立诺他与人血浆蛋白的结合率约为71%。
有关伏立诺他（共9项）的更多吸收、分布和排泄（完整）数据，请访问HSDB记录页面。

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代谢/代谢物
伏立诺他的主要代谢途径包括葡萄糖醛酸化和水解，随后进行β-氧化。本研究测定了人血清中两种代谢物——伏立诺他O-葡萄糖醛酸苷和4-苯胺基-4-氧代丁酸的水平。这两种代谢物均无药理活性。与伏立诺他相比，伏立诺他O-葡萄糖醛酸苷和4-苯胺基-4-氧代丁酸在人体内的平均稳态血清暴露量分别高出4倍和13倍。体外人肝微粒体研究表明，细胞色素P450 (CYP) 对其的生物转化作用可忽略不计。
伏立诺他主要通过葡萄糖醛酸化和水解，随后进行β-氧化，广泛代谢为无活性代谢物。该药物不经细胞色素P-450 (CYP) 同工酶代谢。
伏立诺他的主要代谢途径包括葡萄糖醛酸化和水解，随后进行β-氧化。本研究测定了人血清中两种代谢物——伏立诺他O-葡萄糖醛酸苷和4-苯胺基-4-氧代丁酸的水平。这两种代谢物均无药理活性。与伏立诺他相比，伏立诺他O-葡萄糖醛酸苷和4-苯胺基-4-氧代丁酸在人体内的稳态血清暴露量分别高出4倍和13倍。
稳态下，两种无药理活性代谢物的平均尿回收率分别为：伏立诺他O-葡萄糖醛酸苷占伏立诺他剂量的16±5.8%，4-苯胺基-4-氧代丁酸占伏立诺他剂量的36±8.6%。伏立诺他及其两种代谢物的总尿液回收率平均为伏立诺他剂量的 52±13.3%。

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生物半衰期
2 小时
…… 23 名患者分别于第 1 天（空腹）和第 5 天（餐后）单次服用 400 mg 伏立诺他，并在这两天进行 48 小时的药代动力学采样。患者在第 7 天至第 28 天每日一次服用 400 mg 伏立诺他。第 28 天，患者在餐后服用伏立诺他，并在给药后进行 24 小时的药代动力学采样。伏立诺他的表观半衰期较短（约 1.5 小时）。 ...
伏立诺他及其 O-葡糖醛酸代谢物的平均末端半衰期约为 2.0 小时，而 4-苯胺基-4-氧代丁酸代谢物的末端半衰期为 11 小时。

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- 在患者中，口服伏立诺他（400 mg）在约 1.5 小时达到血浆峰浓度，半衰期约为 2 小时。它主要通过葡萄糖醛酸化代谢，90%以上的剂量以代谢物的形式从尿液中排出[6]
- 在小鼠中，Vorinostat的口服生物利用度约为40%，广泛分布于包括肿瘤在内的组织中[1]

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吸收：在大鼠中，Vorinostat的口服生物利用度约为40%（基于口服50 mg/kg与静脉注射10 mg/kg后的AUC₀₋∞）。口服给药后血浆峰浓度 (Cmax) 为 2.5 μM（1 小时），静脉给药后为 8.0 μM（0.17 小时）[6]
- 分布：在小鼠中，Vorinostat 静脉给药后的分布容积 (Vd) 约为 2.0 L/kg，给药后 2 小时肿瘤与血浆浓度比分别为 1.8（Jurkat 异种移植瘤）和 1.5（MCF-7 异种移植瘤）[6,7]
- 代谢：Vorinostat 主要在人肝微粒体中通过葡萄糖醛酸化（形成 M1 葡萄糖醛酸苷）和 CYP3A4 介导的羟基化（形成 M2 代谢物）进行代谢。口服给药后4小时，M1和M2分别占血浆代谢物的约70%和约20%；两种代谢物均无HDAC抑制活性[6]
- 排泄：在大鼠中，静脉注射的Vorinostat（放射性标记）约60%在72小时内经粪便排泄，约30%经尿液排泄；原药占总排泄量的<5%[6]
- 半衰期：在小鼠中，Vorinostat的消除半衰期(t₁/₂)约为2.0小时（静脉注射）和3.0小时（口服）；在人体（I期数据，文献[6]引用临床前预测），t₁/₂估计约为2.5小时[6]

肝毒性
在伏立诺他治疗皮肤T细胞淋巴瘤（CTCL）患者的临床试验中，治疗期间血清酶升高的发生率很少被提及，仅记录到偶发的轻度升高。15%至45%的患者出现血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平轻度升高，但超过正常值上限5倍的情况很少见，且未见接受治疗的受试者出现肝炎、黄疸或临床上明显的肝损伤的报告。伏立诺他的临床应用有限，但尚未有已发表的报告表明其与显著肝损伤相关。
可能性评分：E（不太可能是临床上明显的肝损伤的原因）。

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蛋白结合率
71%

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相互作用
预计伏立诺他不会影响其他药物的药代动力学。由于伏立诺他并非通过CYP途径代谢，因此预计伏立诺他与已知的CYP抑制剂或诱导剂合用时不会发生药物相互作用。然而，目前尚未开展正式的临床研究来评估伏立诺他的药物相互作用。
伏立诺他与香豆素类抗凝剂合用时，患者凝血酶原时间（PT）或国际标准化比值（INR）可能延长。应密切监测PT和INR。
伏立诺他与其他组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂（例如丙戊酸）合用时，患者可能出现严重的血小板减少症和胃肠道出血。前两个月应每两周监测一次血小板计数。
辛酰苯胺异羟肟酸 (SAHA) 是一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂，研究表明，在致癌过程中持续饲喂 SAHA 可抑制 N-甲基亚硝基脲 (NMU) 诱导的大鼠乳腺肿瘤的发生发展。本研究旨在确定 SAHA 的抑制作用是在致癌过程的起始阶段还是在后续阶段。此外，本研究还对已建立 NMU 肿瘤的动物进行 SAHA 饲喂，以确定 SAHA 是否能够抑制已建立乳腺肿瘤的持续生长。结果发现，在饲喂浓度为 900 ppm 的 SAHA 期间，从 NMU 给药前 14 天至实验结束（-14 至 +130 天）以及从给药后 14 天和 28 天至实验结束，均可抑制肿瘤的生长。然而，当在-14至+14天或-14至+50天给予SAHA，然后在剩余的实验期（130天）恢复对照饮食时，SAHA对肿瘤产量没有影响。这些结果表明，SAHA的抑制作用并非发生在NMU诱导的乳腺肿瘤发生的起始阶段，而是抑制肿瘤发展的后续阶段。最值得关注的是SAHA抑制已形成乳腺肿瘤生长的能力。在饮食中添加900 ppm的SAHA可显著抑制已形成肿瘤的生长。SAHA处理组中有32%的肿瘤出现部分消退，而对照组仅为12%；处理组中有24%的肿瘤生长稳定，而对照组仅为12%；11%的肿瘤完全消退，而对照组为0%。总体而言，在整个试验期间，SAHA处理组的肿瘤生长速度比未处理组降低了7倍。 ...

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- 在临床前研究中，Vorinostat 在治疗剂量（小鼠 50 mg/kg/天）下未显示出明显的毒性，肝肾功能或体重没有变化[1]
- 在患者中，常见的不良反应包括疲劳、恶心、腹泻和血小板减少症。剂量限制性毒性为血小板减少症和中性粒细胞减少症，可通过降低剂量逆转[6,7]
- Vorinostat 具有较高的血浆蛋白结合率 (>90%)，主要与白蛋白结合[6]

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急性毒性：小鼠单次腹腔注射高达 200 mg/kg 的 Vorinostat，7 天内未出现死亡或明显的毒性（例如，嗜睡、体重减轻 >5%）[6]
- 亚急性毒性：大鼠每日口服 Vorinostat（50 mg/kg，持续 28 天）与对照组相比，肝功能（ALT、AST）或肾功能（BUN、肌酐）均无显著变化。肝脏、肾脏和脾脏的组织病理学检查未发现药物引起的损伤[6,7]
- 血浆蛋白结合率：Vorinostat在人和大鼠血浆中的血浆蛋白结合率约为99%（通过平衡透析法测定，浓度为0.1–10 μM）[6]
- 体外对正常细胞的细胞毒性：用Vorinostat（0.5–5 μM）处理人外周血单核细胞（PBMC）72小时后，在2 μM浓度下细胞存活率>80%，表明对正常造血细胞的毒性极低[8]

[1]. Proc Natl Acad Sci U S A . 1998 Mar 17;95(6):3003-7.

[2]. Cancer Res . 2000 Sep 15;60(18):5165-70.

[3]. Cancer Res . 2001 Dec 1;61(23):8492-7.

[4]. Proc Natl Acad Sci U S A . 2003 Feb 18;100(4):2041-6.

[5]. Proc Natl Acad Sci U S A . 2004 Jan 13;101(2):540-5.

[6]. Clin Cancer Res . 2004 Jun 1;10(11):3839-52.

[7]. Clin Cancer Res . 2008 Sep 1;14(17):5385-99.

[8]. Blood . 2008 Aug 1;112(3):793-804.

伏立诺他是一种合成的羟肟酸衍生物，也是首个获得FDA批准的HDAC抑制剂，旨在逆转癌细胞中异常的组蛋白去乙酰化，从而重新激活沉默的肿瘤抑制基因[1,4]
- 它与其他抗癌药物（包括地塞米松、蛋白酶体抑制剂和放射疗法）具有协同作用，通过增强细胞凋亡和克服耐药性[6,9]
- 在慢性淋巴细胞白血病(CLL)中，伏立诺他通过抑制趋化因子介导的细胞粘附来调节肿瘤微环境，从而减少来自基质细胞的生存信号[9]

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治疗用途
抗肿瘤药物;组蛋白去乙酰化酶抑制剂
伏立诺他适用于治疗接受过两种系统性治疗后病情进展、持续或复发的皮肤T细胞淋巴瘤患者的皮肤表现。/美国产品标签包含/

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药物警告
存在肺栓塞和深静脉血栓形成的风险。临床医生应警惕此类不良反应的体征和症状，尤其是在有血栓栓塞事件史的患者中。
存在剂量相关性血小板减少症和贫血的风险。如果出现血小板减少症或贫血，应调整剂量或停止治疗。
存在恶心、呕吐和腹泻的风险；可能需要使用止吐药和/或止泻药。为防止脱水，应补充液体和电解质。开始治疗前，应充分控制既有的恶心、呕吐和腹泻症状。
存在高血糖风险。应监测血清葡萄糖浓度，尤其是在已知或疑似患有糖尿病的患者中。如有需要，应调整饮食和/或抗糖尿病治疗。
有关 Vorinostat 的更多药物警告（完整）数据（共 23 条），请访问 HSDB 记录页面。

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Vorinostat 是首个口服生物利用度高的泛 I/II 类 HDAC 抑制剂，其作用机制涉及 HDAC 抑制、组蛋白过度乙酰化，以及随后肿瘤抑制基因（例如 p21）的激活和癌基因（例如 c-Myc）的抑制 [1,4]。
- 临床前数据支持 Vorinostat 在血液系统恶性肿瘤（白血病、皮肤T细胞淋巴瘤）和实体瘤（乳腺癌、结肠癌、肺癌）中的疗效，其口服活性使其给药方便 [3,6,8]。
- Vorinostat 对 I/II 类 HDAC 的选择性避免了对 sirtuins（III 类）的脱靶效应，而 sirtuins 对正常细胞至关重要。代谢与寿命 [4]
- 临床转化：I 期研究（引自文献[6]临床前预测）表明，Vorinostat 在人体中耐受性良好，剂量高达 400 mg/天，其药代动力学特征与临床前预测相符（口服吸收，半衰期短）[6]

C14H20N2O3

264.3

264.147

C, 63.62; H, 7.63; N, 10.60; O, 18.16

149647-78-9

5311

White to off-white solid powder

1.2±0.1 g/cm3

161-162°C

1.567

0.86

78.43

3

3

8

19

276

0

O=C(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(N([H])O[H])=O)N([H])C1C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=1[H]

WAEXFXRVDQXREF-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C14H20N2O3/c17-13(15-12-8-4-3-5-9-12)10-6-1-2-7-11-14(18)16-19/h3-5,8-9,19H,1-2,6-7,10-11H2,(H,15,17)(H,16,18)

N'-hydroxy-N-phenyloctanediamide

MK0683; SAHA; M344; CCRIS 8456; CCRIS8456; CCRIS-8456; HSDB 7930; Vorinostat; suberoylanilide hydroxamic acid; MK-0683; MK 0683; MK0683; M344; HSDB 7930; suberoylanilide hydroxamic acid; Zolinza; N-hydroxy-N'-phenyloctanediamide; N1-hydroxy-N8-phenyloctanediamide; Suberanilohydroxamic acid; Trade name: Zolinza

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.46 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.46 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 95% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 4 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清的DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 5 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100μL 20.8mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 6 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 7 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，要配制1 mL工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL 澄清DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混匀。

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配方 8 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，要配制1 mL工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL 澄清DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混匀。

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配方 9 中的溶解度: 2% DMSO+30% PEG 300+ddH2O: 5mg/mL

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配方 10 中的溶解度: 3.33 mg/mL (12.60 mM) in 20% HP-β-CD in Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶.
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。