Vulpinic acid

别名: Vulpinic acid; NSC 5897 吴耳酸;3,4-二羟基-2,5-二苯基-2,4-已二稀二酸甲酯-3,6-内酯;枕酸甲酯
目录号: V34620 纯度: ≥98%
Vulpinic Acid 是一种地衣代谢物,可减少 H2O2 诱导的 ROS、氧化应激以及人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 中与氧化应激相关的损伤。
Vulpinic acid CAS号: 521-52-8
产品类别: Natural Products
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
狐皮酸是一种地衣代谢产物,能够降低人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 中由 H₂O₂ 诱导的活性氧 (ROS)、氧化应激及氧化应激相关损伤。狐皮酸对葡萄球菌、肠球菌和厌氧菌具有活性。狐皮酸在动脉粥样硬化的研究中具有潜在的应用价值。
狐皮酸是一种地衣次生代谢产物,来源于狐皮地衣 (Letharia vulpina) 等物种。[1]
据报道,狐皮酸对癌细胞具有抗增殖、抗血管生成、抗菌和光保护作用。[1]
此前,狐皮酸的抗氧化应激保护作用尚未被研究。[1]
狐皮酸是一种黄色结晶化合物,其化学结构已知(为脉酸衍生物)。 [1]
历史上,含有狐尾酸的地衣提取物早在公元前18世纪就在埃及被用作外用药。[2]
生物活性&实验参考方法
体外研究 (In Vitro)
在人脐静脉内皮细胞 (HUVECs) 中,浓度低于 20 µM 的 狐尾酸 被发现无细胞毒性,在 15 µM 时观察到最高的细胞存活率。过氧化氢 (H2O2) 在 HUVECs 中的 IC50 为 215 µM。用 15 µM 狐尾酸 预处理 24 小时后,再用 215 µM H2O2 处理 24 小时,可显著提高 HUVECs 的细胞存活率 41% (p < 0.001)。[1] 15 µM 狐尾酸 可显著降低 H2O2 诱导的活性氧 (ROS) 生成 (p < 0.05) 至对照水平,并且单独使用狐尾酸可使 ROS 水平低于对照组。 [1]在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中,215 µM H₂O₂处理导致肌动蛋白断裂、细胞收缩和肌动蛋白荧光强度降低,而用狐尾酸预处理可保护细胞免受这些损伤,从而使肌动蛋白分布均匀呈丝状,细胞形态正常。[1]与对照组(评分4.5)相比,H₂O₂处理组的Tie2免疫反应性(免疫组化评分0-5分)降低(评分2)。与单独使用H₂O₂的组相比,狐尾酸预处理可增加Tie2免疫反应性(评分3.5)。[1]
狐尾酸对某些需氧和厌氧微生物具有抗菌活性。它对金黄色葡萄球菌(包括对莫匹罗星敏感和耐药的MSSA、MRSA)、粪肠球菌和屎肠球菌的临床分离株均有抑制作用,浓度范围为4至>32 µg/mL,但其活性通常低于地衣酸。在浓度≤32 µg/mL时,它对革兰氏阴性杆菌(例如大肠杆菌、铜绿假单胞菌)或真菌(例如白色念珠菌)无抑制作用。[2]
狐尾藻酸对拟杆菌属和梭菌属的最低抑菌浓度(MIC)范围为16至>16 µg/mL。[2]
细胞实验
采用 MTT(甲基噻唑基二苯基四唑溴化物)法评估了狐尾酸的细胞毒性和保护作用。将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)以每孔 1×10⁵ 个细胞的密度接种于 96 孔板中,并孵育 24 小时使其贴壁。然后将细胞与不同浓度的狐尾酸(5-300 µM)孵育 24 小时。移除培养基后,用 IC50 浓度的 H₂O₂(215 µM)处理细胞 24 小时。孵育结束后,加入 MTT 溶液(0.5 mg/mL)孵育 2 小时,然后移除 MTT 溶液,并将生成的甲臜盐溶解于 DMSO 中。在 570 nm 波长处读取光密度值。[1]
采用 DCF-DA 法测定细胞内活性氧(ROS)水平。将HUVECs接种于96孔板中,孵育24小时后,用PBS洗涤。加入100 µL DCFH-DA/培养基溶液,孵育60分钟。洗涤后,细胞按以下方式处理:对照组(未处理)、单独使用狐尾酸(15 µM,24小时)、单独使用H2O2(215 µM,24小时)或先用狐尾酸预处理(15 µM,24小时),再用H2O2(215 µM,24小时)处理。在480 nm(激发波长)和530 nm(发射波长)处测量荧光强度。[1]
使用TRITC-鬼笔环肽进行F-肌动蛋白丝染色。将盖玻片上的HUVEC细胞用狐尾酸(15 µM,24小时)和/或H2O2(215 µM,24小时)处理。细胞用3.7%多聚甲醛固定,用0.2% Triton X-100透化,然后用5 µg/mL TRITC-鬼笔环肽染色60分钟,再用DAPI(1 mg/mL)染色30分钟,最后在共聚焦显微镜下观察。[1]
通过免疫细胞化学分析Tie2蛋白的表达。将盖玻片上的HUVEC细胞按上述方法处理和固定。用3% H2O2阻断内源性过氧化物酶,然后将细胞与Tie2一抗在4°C孵育过夜,随后与生物素标记的二抗和链霉亲和素-过氧化物酶复合物孵育。免疫反应采用显色剂3-氨基-9-乙基咔唑进行显色,细胞核用苏木精复染。采用半定量评分系统(基于阳性细胞百分比的0-5分制)。[1]
采用标准化的微量稀释法测试了狐尾酸对需氧菌和厌氧菌的抗菌活性。接种浓度为5×10^5 CFU/mL的菌液,分别接种于阳离子调整的Mueller-Hinton肉汤(用于需氧菌)或Schaedler肉汤(用于厌氧菌)。狐尾酸溶解于四氢呋喃(0.2%体积比)中作为溶剂介质。由于溶解度限制,肉汤中可达到的最大浓度为32 µg/mL。测定最小抑菌浓度(MIC)。 [2]
测定了狐尾酸对肠球菌和葡萄球菌的最低杀菌浓度(MBC),其中地衣酸的最低抑菌浓度(MIC)为4 µg/mL。MBC定义为使初始接种菌落数减少≥99.9%的最低浓度。狐尾酸在所测试的浓度下未显示杀菌活性。[2]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
在 HUVEC 细胞中,发现 狐尾酸 在浓度低于 20 µM 时无细胞毒性。当浓度达到 300 µM 时,细胞活力下降至 37%。最有效的无细胞毒性保护剂量为 15 µM。[1]
参考文献

[1]. Vulpinic acid, a lichen metabolite, emerges as a potential drug candidate in the therapy of oxidative stress-related diseases, such as atherosclerosis. Hum Exp Toxicol. 2019 Jun;38(6):675-684.

[2]. In vitro activities of the lichen secondary metabolites vulpinic acid, (+)-usnic acid, and (-)-usnic acid against aerobic and anaerobic microorganisms. Antimicrob Agents Chemother. 1995 Nov;39(11):2541-3.

其他信息
狐狸酸是一种丁烯内酯。据报道,它存在于哥伦比亚粉虱(Candelilla simonii)和其他具有相关数据的生物体中。
狐狸酸是地衣的次生代谢产物,地衣是真菌和藻类的共生体。[1]
由活性氧(ROS)(如H₂O₂)诱导的氧化应激是许多疾病的基础,包括动脉粥样硬化、糖尿病、癌症和神经退行性疾病。氧化应激引起的内皮损伤是动脉粥样硬化发展的关键初始步骤。[1]
该研究表明,狐狸酸可降低H₂O₂诱导的HUVECs氧化应激及其相关损伤,表明其可能是一种治疗动脉粥样硬化和其他氧化应激相关疾病的潜在候选药物。 [1]
地衣在传统医学中有着悠久的应用历史,其次生代谢产物,包括松萝酸和狐尾藻酸,在20世纪50年代被鉴定为活性成分。[2]
狐尾藻酸在水基营养肉汤中的溶解度较低,因此其测试浓度最高只能达到32 µg/mL。[2]
由于狐尾藻酸具有亲脂性,因此在软膏中可能可以达到更高的浓度,这表明其可能用于局部治疗以清除医院内金黄色葡萄球菌分离株,但由于缺乏杀菌活性,其应用可能受到限制。[2]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C19H14O5
分子量
322.31146
精确质量
322.084
元素分析
C, 70.80; H, 4.38; O, 24.82
CAS号
521-52-8
PubChem CID
54690323
外观&性状
Light yellow to yellow a crystalline solid
密度
1.375g/cm3
沸点
568.8ºC at 760mmHg
熔点
146-148ºC
闪点
210.2ºC
折射率
1.656
LogP
3.096
tPSA
72.83
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
4
重原子数目
24
分子复杂度/Complexity
575
定义原子立体中心数目
0
SMILES
COC(=O)/C(=C\1/C(=C(C(=O)O1)c2ccccc2)O)/c3ccccc3
InChi Key
OMZRMXULWNMRAE-BMRADRMJSA-N
InChi Code
InChI=1S/C19H14O5/c1-23-18(21)15(13-10-6-3-7-11-13)17-16(20)14(19(22)24-17)12-8-4-2-5-9-12/h2-11,20H,1H3/b17-15+
化学名
methyl (2E)-2-(3-hydroxy-5-oxo-4-phenylfuran-2-ylidene)-2-phenylacetate
别名
Vulpinic acid; NSC 5897
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~25 mg/mL (~77.57 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;再向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 12.5 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.1026 mL 15.5130 mL 31.0260 mL
5 mM 0.6205 mL 3.1026 mL 6.2052 mL
10 mM 0.3103 mL 1.5513 mL 3.1026 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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