5-HT₆ Receptor ( Ki = 2.2 nM ); 5-HT₆ Receptor ( EC50 = 6.6 nM )
5-HT6 Receptor: WAY-181187 is a potent and selective 5-HT6 receptor agonist. It displays high affinity binding at the human 5-HT6 receptor (Ki = 2.2 ± 0.3 nM). In a functional cAMP assay, it acts as a full agonist (EC50 = 6.6 ± 0.8 nM; Emax = 93.3% ± 2.1% relative to 5-HT). [1]

WAY-181187（1 和 10 μM）增强 ERK1/2 的激活。WAY-181187 可增加 Fyn Manhattan 的活性[2]。蛋白质印迹分析[2] 细胞系：HEK/HA-5-HT6 受体细胞 浓度：1 和 10 μM 孵育时间：预处理 5 分钟 结果：在 1 和 10 μM 浓度下，ERK1/2 的激活均增加。

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受体选择性：在针对一系列其他单胺受体（5-HT1A、5-HT1B、5-HT1D、5-HT1F、5-HT2A、5-HT2B、5-HT2C 拮抗位点、5-HT2C 激动位点、5-HT7、D2、D3、D4、α1）的结合试验中，WAY-181187 显示出对 5-HT6 受体的选择性。该化合物对 5-HT2C 激动剂结合位点的选择性高达 60 倍（Ki = 124 nM）。在 1 μM 浓度下，除 5-HT2B (Ki = 459 nM) 和 α1 (Ki = 1334 nM) 受体外，该化合物对大多数受试受体的结合均无显著抑制作用（抑制率 0-51%）。[1]
- 对海马切片中谷氨酸释放的影响：在大鼠海马切片制备中，测试了 WAY-181187 (0.1 - 10 μM) 调节谷氨酸释放的能力。叠氮化钠 (10 mM) 处理显著增加了谷氨酸的释放。WAY-181187 预处理呈剂量依赖性地减弱了叠氮化钠刺激引起的谷氨酸释放增加。在浓度为 0.3 μM (P < 0.0001)、1 μM (P = 0.0492)、3 μM (P < 0.0001) 和 10 μM (P < 0.0001) 时观察到显著效应。[1]
- 对高浓度 KCl 刺激的海马切片中谷氨酸释放的影响：在大鼠海马切片中，高浓度 KCl (50 mM) 处理显著增加了谷氨酸的释放。WAY-181187 (3 - 100 μM) 的联合处理在 30 μM 浓度下显著减弱了 KCl 刺激的谷氨酸释放 (P = 0.0059)，并在 100 μM 浓度下显示出减弱的趋势 (P = 0.0775)。[1]

急性皮下注射 WAY-181187（3-30 mg/kg）可显著提高 FX 额叶细胞外 GABA 浓度，而不改变谷氨酸或去甲地平水平。此外，皮下注射 WAY-181187（30 mg/kg）可调节皮质多巴胺和 5-HT 水平，但显著降低 [1]。动物模型：成年雄性Sprague-Dawley大鼠，体重280–350 g[1] 剂量：3、10或30 mg/kg 给药途径：急性皮下注射 结果：细胞外GABA浓度显著升高，而谷氨酸或去甲肾上腺素水平未发生改变。

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大鼠额叶皮层的神经化学效应：急性皮下注射WAY-181187（3-30 mg/kg）可显著增加细胞外GABA浓度，且呈剂量依赖性（30 mg/kg时最大增幅达220%）。预先使用5-HT6受体拮抗剂SB-271046（10 mg/kg，皮下注射）可阻断此效应。 WAY-181187 也导致皮质多巴胺（30 mg/kg 剂量下降低 27%）和血清素（30 mg/kg 剂量下降低 37%）水平出现轻微但显著的下降，这些下降可被 SB-271046 阻断，并可通过局部输注 GABAA 受体拮抗剂比库啉（10 μM）逆转。皮质谷氨酸或去甲肾上腺素水平未观察到显著变化。[1]
- 大鼠纹状体神经化学效应：急性皮下注射 WAY-181187（10-30 mg/kg）可显著提高细胞外 GABA 水平（30 mg/kg 剂量下最大增幅达 518%）。此外，30 mg/kg 剂量下纹状体多巴胺水平也显著降低（降低 34%），该效应可被 SB-271046（10 mg/kg，皮下注射）阻断。在该区域，未观察到去甲肾上腺素、血清素或谷氨酸的显著变化。[1]
- 大鼠背侧海马的神经化学效应：急性皮下注射WAY-181187（10-30 mg/kg）显著提高了细胞外GABA水平（两个剂量下最大增幅均为196%）。未报告对其他所测神经递质的显著影响。[1]
- 大鼠杏仁核的神经化学效应：急性皮下注射WAY-181187（10-30 mg/kg）可显著提高细胞外GABA水平（最高达基线水平的215%）。30 mg/kg剂量下，细胞外去甲肾上腺素水平也显著升高（升高42%）。 [1]
- WAY-181187 对大鼠伏隔核和丘脑的神经化学效应：WAY-181187 的急性给药对伏隔核或丘脑的细胞外 GABA 水平没有显著影响。[1]
- WAY-181187 对程序诱导多饮 (SIP) 模型中的行为学效应：在强迫症大鼠 SIP 模型中，WAY-181187 的急性口服给药呈剂量依赖性地降低了辅助性饮水行为。在 178 mg/kg (po) 剂量下观察到显著效应。在对照条件下（所有饲料均在开始时给予），WAY-181187 不改变饮水行为，表明其对饮水没有非特异性影响。[1]

5-HT6受体结合实验：使用表达人5-HT6受体的HeLa细胞膜制备物测定结合亲和力。反应在96孔板中进行，以[3H]LSD为放射性配体，缓冲液为Tris-HCl、MgSO4和EDTA。使用10 μM甲硫噻吩测定非特异性结合。反应在室温下避光进行120分钟，之后过滤结合的复合物并测量放射性。Ki值根据IC50值，使用Cheng-Prusoff方程计算。[1] 5-HT6受体cAMP功能实验：将转染人5-HT6受体的HeLa细胞洗涤后，在含有IBMX的Krebs缓冲液中于37°C孵育5分钟。然后用不同浓度的WAY-181187刺激细胞，于37°C继续孵育10分钟。用高氯酸终止反应，并通过放射免疫分析法测定细胞内 cAMP 水平。EC50 和 Emax 值由对数浓度-反应曲线确定。[1]

细胞系：HEK/HA-5-HT6受体细胞
浓度：1和10 μM
孵育时间：预处理5分钟
结果：在1和10 μM浓度下，ERK1/2的激活均增强。

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cAMP检测的细胞培养：将稳定表达人5-HT6受体基因的人星形胶质瘤1321N1细胞培养于添加10% FBS、1 mM丙酮酸钠和400 μg/mL G418的DMEM培养基中，置于37°C、5% CO2气氛下培养。[2]
- 钙、ERK和Fyn检测的细胞培养：使用稳定表达HA-5-HT6受体的HEK293细胞。细胞在添加了 10% FBS、青霉素（100 单位/毫升）、链霉素（100 微克/毫升）和 G-418（400 微克/毫升）的 DMEM 培养基中，于 37°C、5% CO₂ 和 95% 空气的湿润环境中培养。钙离子测定时，细胞用 Gα15 蛋白瞬时转染 24 小时。[2]

体重 280–350 g 的成年雄性 Sprague-Dawley 大鼠
3、10 或 30 mg/kg
皮下急性给药

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急性微透析研究：** 本研究使用成年雄性 Sprague-Dawley 大鼠。在氟烷麻醉下，通过立体定位手术将引导套管植入不同脑区。植入微透析探针后，以 1 μL/min 的流速灌注人工脑脊液。稳定期后，采集 5 个基线样本。随后，动物分别接受赋形剂（2% Tween/0.5% 葡萄糖溶液）或预处理（例如，皮下注射 SB-271046，剂量为 10 mg/kg）。约 20 分钟后，皮下注射 WAY-181187（3、10 或 30 mg/kg）或赋形剂。每隔 20 分钟收集一次透析液样本。在局部灌注研究中，GABAA 受体拮抗剂比库啉 (10 μM) 通过微透析探针以 1 μL/min 的流速灌注 1 小时。[1]
- **慢性微透析研究：** 在 WAY-208466 的慢性治疗中，大鼠在笼内每日皮下注射载体或 WAY-208466 (10 mg/kg)，持续 14 天。第 14 天，对大鼠进行手术，在额叶皮层上方植入引导套管。第二天进行微透析，并用实验期间给予的相同化合物进行急性刺激。[1]
- **体外海马切片灌注：** 制备大鼠海马切片并将其置于灌注装置中。以 0.4 mL/min 的流速用含氧的 Krebs 缓冲液灌注组织。经过 60 分钟的平衡后，收集基线组分。在叠氮化钠实验中，组织在 30 分钟叠氮化钠 (10 mM) 刺激前和刺激期间均用 WAY-181187 预处理 30 分钟。在氯化钾实验中，WAY-181187 与 50 mM 氯化钾共同作用 30 分钟。收集样品进行 HPLC 氨基酸分析。[1]
- **程序诱导多饮 (SIP) 模型：** 将单独饲养的雄性 Sprague-Dawley 大鼠（体重维持在自由摄食体重的约 85%）置于操作箱中，并可自由饮水。在 120 分钟的测试期间，每分钟投放一颗食物颗粒，以诱导辅助饮水。在测试当天，急性给予 WAY-181187（1-178 mg/kg，口服），以评估其对饮水量的影响。 [1]

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急性微透析研究：本研究采用成年雄性Sprague-Dawley大鼠。在氟烷麻醉下，通过立体定位手术将引导套管植入不同脑区。植入微透析探针后，以1 μL/min的流速灌注人工脑脊液。稳定期后，采集5个基线样本。随后，动物分别接受赋形剂（2%吐温/0.5%葡萄糖溶液）或预处理（例如，皮下注射SB-271046，剂量为10 mg/kg）。约20分钟后，皮下注射WAY-181187（剂量分别为3、10或30 mg/kg）或赋形剂。每20分钟采集一次透析液样本。在局部灌注研究中，GABAA受体拮抗剂比库啉（10 μM）以1 μL/min的流速通过微透析探针灌注1小时。[1]
- 慢性微透析研究：在WAY-208466的慢性治疗中，大鼠在笼内每日皮下注射载体或WAY-208466（10 mg/kg），连续14天。第14天，对大鼠进行手术，在额叶皮层上方植入引导套管。第二天进行微透析，并用实验期间给予的相同化合物进行急性刺激。[1]
- 体外海马切片灌注：制备大鼠海马切片并将其置于灌注装置中。以0.4 mL/min的流速用含氧的Krebs缓冲液灌注组织。平衡60分钟后，收集基线组分。在叠氮化钠实验中，组织在接受 10 mM 叠氮化钠 30 分钟刺激前和刺激期间均用 WAY-181187 预处理 30 分钟。在氯化钾实验中，WAY-181187 与 50 mM 氯化钾共同作用 30 分钟。收集样品进行高效液相色谱 (HPLC) 氨基酸分析。[1]
- 程序诱导多饮 (SIP) 模型：将单独饲养的雄性 Sprague-Dawley 大鼠（体重维持在自由摄食体重的约 85%）置于操作箱中，并可自由饮水。在 120 分钟的测试期间，每分钟投喂一颗食物颗粒，以诱导辅助饮水。在测试当天，急性给予 WAY-181187（1-178 mg/kg，口服），以评估其对饮水量的影响。[1]

[1]. Neuropharmacological Profile of Novel and Selective 5-HT6 Receptor Agonists: WAY-181187 and WAY-208466. Neuropsychopharmacology. 2008 May;33(6):1323-35.

[2]. ST1936 Stimulates cAMP, Ca2+, ERK1/2 and Fyn Kinase Through a Full Activation of Cloned Human 5-HT6 Receptors. Eur J Pharmacol. 2011 Jul 1;661(1-3):8-14.

背景：WAY-181187 是一种新型、选择性强效的 5-HT6 受体完全激动剂。它的研发旨在研究 5-HT6 受体刺激的生物学效应，此前由于缺乏合适的体内研究激动剂，该领域的研究一直受阻。[1]
- 作用机制：WAY-181187 可激活 5-HT6 受体，这是一种 G 蛋白偶联受体，能够正向刺激腺苷酸环化酶。其激活会导致皮质-边缘脑区细胞外 GABA 水平的区域特异性升高。由此产生的 GABA 能张力可间接调节谷氨酸能和单胺能（多巴胺、血清素、去甲肾上腺素）神经传递。这些神经化学效应是由 5-HT6 受体介导的，因为它们可被选择性拮抗剂 SB-271046 阻断。 [1]
- 治疗潜力：WAY-181187 能够提高 GABA 水平并减弱谷氨酸刺激释放，因此被认为具有治疗焦虑相关疾病（例如强迫症）的潜在疗效，这已在 SIP 模型中得到证实。作者还假设 5-HT6 受体激动剂可能具有抗抑郁样活性，这可能是通过增加 BDNF 表达并迅速起效实现的。[1]

C15H13CLN4O2S2

380.87232

380.017

554403-49-5

WAY-181187 oxalate; 1883548-85-3; WAY-181187 hydrochloride; 554403-08-6

10150497

White to yellow solid powder

4.523

119.01

1

5

4

24

572

0

RYBOXBBYCVOYNO-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C15H13ClN4O2S2/c16-13-14(19-7-8-23-15(19)18-13)24(21,22)20-9-10(5-6-17)11-3-1-2-4-12(11)20/h1-4,7-9H,5-6,17H2

2-[1-(6-chloroimidazo[2,1-b][1,3]thiazol-5-yl)sulfonylindol-3-yl]ethanamine

WAY-181187; WAY 181187; WAY181187; SAX187; SAX-187; SAX187

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO: ~100 mg/mL (~262.6 mM）

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.56 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (6.56 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.56 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。