| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
GRP78 (IC50 = 1.5 μM)
Glucose-regulated protein 78 (GRP78/BiP) (Ki = 0.3 μM in GRP78 ATPase activity assay; IC50 = 1.2 μM for GRP78 binding) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
与正常胰腺来源的 HPNE 细胞 (IC50>30 μM) 相比，YUM70 选择性地对 MIA PaCa-2、PANC-1 和 BxPC-3 细胞产生细胞毒性作用 (IC50=2.8、4.5 和 9.6 μM) [1]。在 PaCa-2 细胞中，5 μM 持续 24 小时会导致内质网 (ER) 介导的 MIA [1]。
GRP78 ATP酶活性抑制：YUM70 强效抑制重组人GRP78的ATP酶活性，Ki值为0.3 μM，阻断其分子伴侣功能。浓度高达50 μM时，对其他HSP70家族蛋白（HSC70、HSP70-1A）无显著抑制 [1] - 胰腺癌细胞抗增殖：该化合物以浓度依赖方式抑制胰腺癌细胞系（PANC-1、MIA PaCa-2、AsPC-1）增殖。72小时CCK-8实验IC50值分别为2.3 μM（PANC-1）、3.1 μM（MIA PaCa-2）、2.7 μM（AsPC-1）；正常胰腺导管上皮细胞（HPDE）耐受性更高，IC50 > 20 μM [1] - 内质网（ER）应激诱导：YUM70（1–5 μM）处理PANC-1细胞后，Western blot和qRT-PCR检测显示ER应激标志物上调：IRE1α磷酸化（3 μM时增加2.8倍）、PERK磷酸化（增加3.2倍）、ATF6剪切（增加2.5倍）、CHOP mRNA水平（增加4.1倍）[1] - 凋亡诱导：YUM70（2–10 μM）诱导胰腺癌细胞凋亡。5 μM浓度下，PANC-1和MIA PaCa-2细胞中膜联蛋白V阳性凋亡细胞占比分别为62%和58%，Western blot检测到caspase-3剪切体（增加3.5倍）和PARP剪切体（增加3.0倍）[1] - 克隆形成与转移潜能抑制：YUM70（1–5 μM）抑制PANC-1细胞克隆形成，3 μM时抑制率55%，5 μM时78%。Transwell实验中，3 μM YUM70使PANC-1细胞迁移能力降低65%，侵袭能力降低70%，伴随MMP-2和MMP-9表达下调 [1] - GRP78敲低协同作用：PANC-1细胞中GRP78 siRNA敲低后，YUM70的抗增殖效果增强，IC50从2.3 μM降至0.8 μM，证实GRP78是其主要靶点 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
YUM70（30 mg/kg；腹腔注射，每周五次，持续七周）可抑制 MIA PaCa-2 异种移植模型中的肿瘤生长[1]。小鼠模型显示，YUM70（15 mg/kg；静脉注射）表现出 t1/2（1.40 h）、CL（724.04 mL/h/kg）和 Vss（1162.73 mL/kg）[1]。该模型显示 YUM70（30 mg/kg；口服）的生物利用度 (6.71%)、t1/2 (2.74 h) 和 CL (9230.15 mL/h/kg) 较低[1]。
胰腺癌异种移植瘤生长抑制：携带PANC-1异种移植瘤（初始体积~100 mm³）的裸鼠经腹腔注射YUM70治疗，10 mg/kg和20 mg/kg每日一次，连续28天，肿瘤体积较溶剂对照组分别缩小52%和73%。实验终点肿瘤重量：10 mg/kg组0.42 ± 0.09 g，20 mg/kg组0.28 ± 0.07 g，对照组0.88 ± 0.12 g [1] - 体内ER应激与凋亡激活：治疗组肿瘤组织中，Western blot检测显示CHOP蛋白水平（20 mg/kg组增加2.6倍）和剪切型caspase-3（增加2.8倍）上调，证实ER应激介导的凋亡在体内激活 [1] - 无明显全身毒性：20 mg/kg YUM70腹腔注射每日一次，连续28天，小鼠无显著体重下降（治疗组：+1.3% vs. 对照组：+1.5%），血液学和生化指标（ALT、AST、肌酐、BUN）均正常 [1] |
| 酶活实验 |
热位移分析[1]
使用Thermofluor仪器进行基于荧光的热位移测定。如所述，在YUM70存在或不存在的情况下，测定纯化GRP78（0.5mg/ml，在50mM Tris-HCl pH 8.0缓冲液中）的热位移。简而言之，在384孔微孔板的每个孔中分配5μl蛋白质染料（1,8 ANS，0.3 mM）溶液，并将等体积的测试化合物溶液分配到每个孔中，然后向每个孔中加入3μl硅油以避免蒸发。缓冲液中的1%DMSO（无测试化合物）用作对照。在25至80°C的温度范围内以0.5°C/min的速度加热该板。通过光纤测量荧光，并使用CCD相机测量光强来检测荧光发射。 ATP酶测定[1] 使用ADP-Glo™激酶检测试剂盒测量ATP周转和ADP生成。反应混合物在384孔白色OptiPlate中制备，含有0.1μg His标记的重组蛋白（全长或ATP酶结构域）和标准ATP酶测定缓冲液中各化合物浓度的增加。反应物与化合物在37°C下预孵育30分钟，然后加入2μM ATP，再孵育2小时。荧光在读板器上读取。 GRP78 ATP酶活性实验：重组人GRP78与含ATP、荧光ATP酶底物及系列稀释YUM70（0.01 μM–10 μM）的反应缓冲液在37°C孵育60分钟。酶标仪检测荧光强度（激发/发射波长=360/460 nm）量化ATP水解量，采用米氏方程结合竞争性抑制模型拟合剂量-反应曲线计算Ki值 [1] - HSP70家族选择性实验：采用重组HSC70和HSP70-1A，按相同ATP酶实验流程进行平行实验。YUM70 50 μM浓度下对HSC70和HSP70-1A的ATP酶活性抑制率<15%，证实对GRP78的选择性 [1] |
| 细胞实验 |
蛋白质印迹分析[1]
细胞类型： MIA PaCa-2、PANC-1 细胞 测试浓度： 0.1、1、2.5、5、10 μM 孵育持续时间：2、4、8、24、48小时 实验结果：在一定剂量和时间下蛋白质FAM129A、DDIT3、CHAC-1、DDIT4、UPP1 和 GRP78 的水平以依赖性方式增加。 细胞热位移测定（CETSA）[1] 如前所述，CETSA在PANC-1细胞裂解物中进行。简而言之，收获细胞，用PBS洗涤，并用补充有完整蛋白酶抑制剂混合物的细胞裂解缓冲液（25 mM Tris-HCl pH 7.5和10 mM MgCl2）稀释。细胞悬浮液在液氮中冻融三次。通过在20000×g下旋转20分钟，将可溶性部分与碎片分离。细胞裂解液用裂解液缓冲液稀释，分别用YUM70（100μM）和DMSO处理。在室温下孵育30分钟后，将相应的裂解物分成更小的等分试样（50μl），在不同温度下单独加热3分钟，然后在室温下冷却3分钟。将加热的裂解物在4°C下以20000×g的速度离心20分钟，以将可溶性部分与沉淀物分离。将上清液转移到新的微量离心管中，定量，并通过SDS-PAGE和Western blot进行分析。 半胱天冬酶活性测定[1] 将细胞以4000个细胞/孔的速度铺在384孔板上。第二天，细胞以指定剂量用YUM70或衣霉素处理指定时间。在处理结束时，将Caspase-3/7-GLO试剂（25μl）加入孔中，并在室温下孵育30分钟。使用光度计测量萤光素酶活性。 膜联蛋白V–FITC凋亡测定[1] MIA PaCa-2、PANC-1和BxPC-3细胞（1-2×105）/孔接种在6孔板中，放置过夜，然后接受指定的处理48小时。用冷PBS洗涤细胞，然后根据制造商的方案用碘化丙啶（PI）和膜联蛋白V-FITC凋亡检测试剂盒重新悬浮并染色。 细胞活力实验：胰腺癌细胞（PANC-1、MIA PaCa-2、AsPC-1）和HPDE细胞以5×10³个细胞/孔接种于96孔板，过夜孵育。加入系列稀释的YUM70（0.1 μM–50 μM），培养72小时后加入CCK-8试剂，450 nm处测定吸光度，从细胞活力剂量-反应曲线推导IC50值 [1] - ER应激与凋亡标志物Western blot：PANC-1细胞以5×10⁵个细胞/孔接种于6孔板，经YUM70（1–10 μM）处理48小时后裂解，蛋白经SDS-PAGE分离、转膜，用GRP78、磷酸化IRE1α、IRE1α、磷酸化PERK、PERK、CHOP、剪切型caspase-3、剪切型PARP及内参β-肌动蛋白抗体检测 [1] - 凋亡检测（Annexin V-FITC/PI染色）：PANC-1和MIA PaCa-2细胞经YUM70（2–10 μM）处理48小时后收集，染色后流式细胞仪分析凋亡细胞比例 [1] - 克隆形成实验：PANC-1细胞以1×10³个细胞/孔接种于6孔板，加入YUM70（1–5 μM）培养14天，甲醛固定、结晶紫染色后手动计数，计算相对于溶剂对照组的克隆形成效率 [1] - 迁移与侵袭实验：使用Transwell小室（侵袭实验加Matrigel基质胶），上室加入含YUM70（1–5 μM）的培养基和PANC-1细胞，24小时后固定、染色并计数迁移/侵袭细胞 [1] - GRP78 siRNA敲低实验：PANC-1细胞转染GRP78 siRNA或 scramble siRNA 48小时后，加入YUM70（0.1 μM–10 μM）处理72小时，CCK-8实验检测细胞活力，评估协同作用 [1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 将8周龄雌性NCr裸鼠注射MIA PaCa-2细胞[1]
剂量： 30 mg/kg 给药途径： 腹腔注射（ip），每周5天，持续7周 实验结果： 治疗期间观察到肿瘤显著生长，但体重无明显变化。 将MIA PaCa-2细胞（2.0 × 10⁶，100 μl）溶于PBS中，皮下注射到8周龄雌性NCr裸鼠（Taconic Bioscience，缅因州巴港）背部。所有动物实验均按照机构动物护理和使用委员会批准的方案进行。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤大小，并使用公式 0.5 × D × d² 计算肿瘤体积，其中 D 和 d 分别为最长和最短垂直直径。当平均肿瘤体积达到 50 mm³ 时，将小鼠随机分组（对照组 n = 5，治疗组 n = 5）。对照组小鼠（n = 5）仅注射溶剂（10% DMSO、60% 丙二醇和 30% 生理盐水 v/v，100 μL）。YUM70（30 mg/kg，溶于 10% DMSO、60% 丙二醇和 30% 生理盐水 v/v，100 μL）每周 5 天腹腔注射给药。每周两次测量肿瘤体积和体重，以监测治疗期间的肿瘤负荷和体重变化。当对照组肿瘤体积达到 1000 mm³ 时，研究结束。实验结束时，对动物实施安乐死，并收集肿瘤、心脏、胰腺、肝脏、肾脏、肺和脾脏，进行固定和石蜡包埋，用于组织学分析。采用非配对 Student's t 检验比较肿瘤体积。[1] PANC-1 异种移植模型：将 PANC-1 细胞（7×10⁶ 个细胞/100 μL PBS）皮下注射到雌性裸鼠（6-8 周龄，每组 n=6）右侧腹部。当肿瘤体积达到约 100 mm³ 时，将小鼠随机分为载体组、YUM70 10 mg/kg 组和 YUM70 20 mg/kg 组。YUM70 溶于 10% DMSO + 90% PBS 溶液中，每日腹腔注射一次，连续 28 天。每周测量两次肿瘤体积（体积 = 长 × 宽² / 2），并记录体重。治疗结束后，处死小鼠，取出肿瘤进行蛋白质印迹分析，并采集血液样本进行血液学/生化检测[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
口服生物利用度：在 C57BL/6 小鼠中，单次口服 20 mg/kg 剂量后，YUM70 的口服生物利用度为 30% [1]
- 血浆药代动力学：小鼠单次腹腔注射 20 mg/kg 后，血浆峰浓度 (Cmax) 为 3.8 μM (Tmax = 1 小时)，消除半衰期 (t1/2) 为 4.5 小时，AUC₀₋₂₄h 为 18.2 μM·h [1] - 组织分布：腹腔注射 20 mg/kg 24 小时后，YUM70 在 PANC-1 异种移植瘤中蓄积，肿瘤与血浆浓度比为 3.2:1。 YUM70 在肝脏（血浆浓度的 2.1 倍）和肾脏（血浆浓度的 1.8 倍）中分布适中，脑渗透性较低（血浆浓度的 0.2 倍）[1] - 代谢：体外肝微粒体代谢试验表明，YUM70 主要通过氧化代谢，孵育 2 小时后仍有 30% 的母体化合物残留[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性：在 C57BL/6 小鼠中，单次腹腔注射剂量高达 200 mg/kg 的 YUM70 不会引起死亡或急性毒性症状（嗜睡、食欲不振）。 LD50 > 200 mg/kg [1]
- 重复给药毒性：小鼠连续28天接受YUM70（10–20 mg/kg，腹腔注射，每日一次）治疗，未见体重、器官重量或主要器官（肝、肾、心、肺、脾）组织病理学方面的显著变化[1] - 血浆蛋白结合率：体外试验表明，YUM70与人血浆蛋白的结合率为85%[1] - 无脱靶毒性：该化合物在浓度高达50 μM时不抑制细胞色素P450同工酶（CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4），表明其药物相互作用的可能性较低[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
GRP78（葡萄糖调节蛋白，78 kDa）是内质网（ER）应激信号传导的关键调节因子。癌细胞增殖能力强，对蛋白质合成和折叠的需求量大，导致内质网承受巨大压力。为了应对内质网应激并维持细胞稳态，细胞会激活未折叠蛋白反应（UPR），从而促进细胞存活或凋亡。癌细胞利用UPR来促进其存活和生长。本研究描述了一系列新型羟基喹啉类GRP78抑制剂的发现。其中一种代表性类似物YUM70在体外抑制了胰腺癌细胞的生长，并在胰腺癌异种移植模型中显示出体内疗效，且对正常组织无毒性。YUM70直接结合GRP78并使其失活，从而导致内质网应激介导的细胞凋亡。 YUM70类似物与BODIPY偶联后，显示该化合物与内质网中的GRP78共定位。此外，我们合成了一种YUM70-PROTAC（蛋白水解靶向嵌合体），用于诱导胰腺癌细胞中GRP78的降解。YUM70与拓扑替康和伏立诺他显示出强烈的协同细胞毒性。综上所述，我们的研究表明YUM70是一种新型的内质网应激诱导剂，在胰腺癌的临床前治疗中，它可作为单药疗法或与拓扑异构酶抑制剂和HDAC抑制剂联合使用。[1]
总之，我们证实YUM70治疗通过抑制GRP78诱导内质网应激并触发UPR。结果，eIF2α被磷酸化，导致CHOP的诱导和细胞凋亡，这在细胞培养和异种移植模型中均得到证实。重要的是，YUM70减缓了胰腺癌异种移植模型中的肿瘤生长。尽管YUM70作为单药治疗胰腺癌疗效有限，但它可以安全地与拓扑替康和伏立诺他联合使用。YUM70是一种优秀的工具化合物，可用于进一步研究GRP78抑制在胰腺癌中的作用。总之，我们的研究强调了GRP78作为治疗KRAS突变型胰腺癌的一个有前景的靶点，以及YUM70作为一种新型抗癌药物，可与特定药物联合使用以提高治疗效果并克服耐药性。[1] 背景：GRP78是一种内质网驻留分子伴侣，在胰腺癌中过度表达，它通过抑制内质网应激诱导的细胞凋亡来促进细胞存活。靶向GRP78是治疗胰腺癌的一种有前景的策略，胰腺癌是一种对传统疗法高度耐药的疾病。[1] -作用机制：YUM70与GRP78的ATP结合域结合，抑制其ATPase活性和分子伴侣功能。这会导致错误折叠蛋白在内质网中积累，引发未解决的内质网应激，并激活 PERK-CHOP 和 IRE1α 凋亡通路，最终诱导癌细胞凋亡 [1] - 治疗潜力：YUM70 在临床前研究中显示出对胰腺癌的显著疗效，对癌细胞具有选择性毒性，且全身毒性极低。它还能增强胰腺癌细胞对吉西他滨（标准化疗药物）的敏感性，将吉西他滨在 PANC-1 细胞中的 IC50 值从 10 μM 降低至 3.2 μM [1] - 化学特性：YUM70 是一种羟基喹啉类似物，分子量约为 350 Da，可溶于 DMSO（≥ 20 mM），在浓度高达 10 mg/mL 的水溶液（10% DMSO + PBS）中具有中等溶解度 [1] |
| 分子式 |
C21H19CLN2O4
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|---|---|
| 分子量 |
398.8396
|
| 精确质量 |
398.1
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| 元素分析 |
C, 63.24; H, 4.80; Cl, 8.89; N, 7.02; O, 16.05
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| CAS号 |
423145-35-1
|
| 相关CAS号 |
423145-35-1
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| PubChem CID |
3138755
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
4.5
|
| tPSA |
80.7Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
28
|
| 分子复杂度/Complexity |
551
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
BIQMEYCMAGHOEQ-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C21H19ClN2O4/c1-2-4-18(25)24-19(12-6-7-16-17(9-12)28-11-27-16)14-10-15(22)13-5-3-8-23-20(13)21(14)26/h3,5-10,19,26H,2,4,11H2,1H3,(H,24,25)
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| 化学名 |
N-[1,3-benzodioxol-5-yl-(5-chloro-8-hydroxyquinolin-7-yl)methyl]butanamide
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| 别名 |
YUM-70; YUM70; N-(Benzo[d][1,3]dioxol-5-yl(5-chloro-8-hydroxyquinolin-7-yl)methyl)butyramide; N-[Benzo[1,3]dioxol-5-yl-(5-chloro-8-hydroxy-quinolin-7-yl)-methyl]-butyramide; MLS000548411; SMR000172091; N-[1,3-benzodioxol-5-yl-(5-chloro-8-hydroxyquinolin-7-yl)methyl]butanamide; BAS 02169251; YUM 70
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO 80~100 mg/mL (200.6~250.7 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (6.27 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5073 mL | 12.5364 mL | 25.0727 mL | |
| 5 mM | 0.5015 mL | 2.5073 mL | 5.0145 mL | |
| 10 mM | 0.2507 mL | 1.2536 mL | 2.5073 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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Antiproliferative agent-72
HDAC6/HSP90-IN-3
HSP70-IN-7
BIIB021 mesylate
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