Topoisomerase I

体外活性：(±)-10-Hydroxycamptothecin (10-OH-camptothecin 或 10-HCPT) 是 topo I 的抑制剂。(±)-10-Hydroxycamptothecin (10-HCPT, 5-20 nM) 显着抑制增殖Colo 205 细胞以剂量依赖性方式。 (±)-10-羟基喜树碱 (5-20 nM) 将 Colo 205 细胞阻滞在细胞周期的 G2 期，并通过 caspase-3 依赖性途径触发细胞凋亡。 (±)-10-Hydroxycamptothecin (HPT, 0.01-10 μg/mL) 引起细胞皱缩、核碎裂和染色体浓缩，并诱导人膀胱癌细胞系 (T24) 凋亡。细胞测定：将 Colo 205 细胞 (5×105) (ATCC:CCL-222) 接种在 25T 烧瓶中过夜，然后分别用 5、10、15 或 20 nM HCPT 处理（对照）和不处理。处理 24-120 小时后，通过胰蛋白酶-EDTA 收获细胞，然后在 4°C 下以 1,500 rpm 离心 5 分钟。将细胞沉淀重悬于含有0.04%台盼蓝的培养基中，并通过血细胞计数器计数活细胞。

(±)-10-羟基喜树碱 (10-HCPT) 可安全、低剂量口服用于长期治疗。 HCPT在体内的长期消除可能对其治疗效果产生重大影响。 HCPT 代谢为其羧酸盐形式和葡萄糖醛酸苷。静脉注射 HCPT 时观察到剂量依赖性毒性。

在 25T 烧瓶中接种过夜后，用 5、10、15 或 20 nM (±) -10-羟基喜树碱分别作为对照。处理 24-120 小时后，使用胰蛋白酶-EDTA 收获细胞，然后在 4°C 下以 4,500 rpm 离心 5 分钟。将细胞沉淀重悬于含有 0.04% 台盼蓝的培养基中后，使用血细胞计数器对细胞沉淀中的活细胞进行计数 [2]。

Sterilized conditions and a controlled 12-hour light and 12-hour dark cycle are provided for BALB/c-nu mice living in a laminar flow room at 25 ± 2˚C. RPMI-1640 medium without serum is used to harvest and resuspend the Colo 205 cells. A volume of 0.1 mL is subcutaneously injected into the mice's flanks after the cell density is adjusted to 1 × 10⁷ cells/mL. Three to seven tumor-bearing mice per experimental group were used. Therapy commences when the tumor size reaches 3-5 mm and is administered with a solution of (±)-10-hydroxycamptothecin dissolved in propylene glycol. (±)-10-Hydroxycamptothecin is injected intraperitoneally (i.e., once every two or four days) at 1, 2.5, 5, 7.5, and 1 mg/kg (0.1 mL/20 g of body weight for the injection volume). Every two days, a propylene glycol vehicle is given to the control group. Throughout the experiment, body weight and tumor size are recorded twice a week. A vernier caliper is used to measure the size of the tumor. The formula for calculating tumor volume (V) is V (mm³) = 0.4AB², where A and B represent the longest and shortest diameters, respectively. Upon completion of the experiment, CO₂ gas is used to kill every mouse. For pathological analysis, tumors, livers, kidneys, and lungs are removed, preserved, embedded, and stained with hematoxylin and eosin[2].

[1]. Interaction of several nucleoside triphosphate analogues and 10-hydroxycamptothecin with human DNA topoisomerases. Cancer Res. 1989 Mar 15;49(6):1366-70.

[2]. Anticancer effects of low-dose 10-hydroxycamptothecin in human colon cancer. Oncol Rep. 2006 May;15(5):1273-9.

[3]. Detection of apoptosis exposed to 10-hydroxycamptothecin in T24 human urinary bladder cancer cells. Zhonghua Wai Ke Za Zhi. 1999 Jan;37(1):57-9.

C20H16N2O5

364.35

364.10592162

64439-81-2

(S)-10-Hydroxycamptothecin;19685-09-7

Solid

CCC1(C2=C(COC1=O)C(=O)N3CC4=C(C3=C2)N=C5C=CC(=CC5=C4)O)O

HAWSQZCWOQZXHI-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C20H16N2O5/c1-2-20(26)14-7-16-17-11(5-10-6-12(23)3-4-15(10)21-17)8-22(16)18(24)13(14)9-27-19(20)25/h3-7,23,26H,2,8-9H2,1H3

19-ethyl-7,19-dihydroxy-17-oxa-3,13-diazapentacyclo[11.8.0.02,11.04,9.015,20]henicosa-1(21),2(11),3,5,7,9,15(20)-heptaene-14,18-dione

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (6.86 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。