| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 500mg | |||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Click chemistry reagent; unnatural amino acid
- 4-Azido-L-phenylalanine hydrochloride is a non-natural amino acid that can be efficiently incorporated into target proteins at specific sites in a cell-free translation system. This incorporation is dependent on an orthogonal transfer RNA (tRNA)/aminoacyl-tRNA synthetase (aaRS) pair (tyrosyl-tRNA synthetase mutant and its cognate tRNA) [1] - The cell-free co-production of the orthogonal tRNA with the target protein (containing an amber stop codon at the desired incorporation site) enabled 4-Azido-L-phenylalanine hydrochloride to be site-specifically inserted into the protein, with an incorporation efficiency of up to ~95% (determined by SDS-PAGE and mass spectrometry analysis) [1] - The incorporated azido group of 4-Azido-L-phenylalanine hydrochloride in the protein retained its reactivity, allowing for subsequent bioorthogonal reactions (e.g., copper-catalyzed azide-alkyne cycloaddition) for protein labeling or modification [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
使用无细胞蛋白质合成 (CFPS) 时，含有 4-叠氮基-L-苯丙氨酸或对炔丙氧基-L-苯丙氨酸 (pPaF) 的修饰可溶性超折叠绿色荧光蛋白 (sfGFP) 将在 CFPS 溶液中累积 0.9-1.7 mg/mL方法[1]。
- 4-叠氮基-L-苯丙氨酸盐酸盐是一种非天然氨基酸，可在无细胞翻译体系中特异性掺入目标蛋白质的特定位点。该掺入过程依赖于正交转运RNA（tRNA）/氨酰-tRNA合成酶（aaRS）对（酪氨酸-tRNA合成酶突变体及其同源tRNA）[1] - 正交tRNA与目标蛋白质（在预期掺入位点含琥珀终止密码子）的无细胞共表达，使4-叠氮基-L-苯丙氨酸盐酸盐能位点特异性插入蛋白质中，掺入效率高达约95%（通过SDS-PAGE和质谱分析验证）[1] - 4-叠氮基-L-苯丙氨酸盐酸盐掺入蛋白质后，其含有的叠氮基团仍保持反应活性，可用于后续生物正交反应（如铜催化的叠氮-炔烃环加成反应），实现蛋白质的标记或修饰[1] |
| 酶活实验 |
除非另有说明，否则含有25微升PANOx SP反应溶液：10 mM谷氨酸铵、20 mM谷氨酸镁、175 mM谷氨酸钾、1.2 mM ATP、CMP、GMP和UMP各0.86 mM、10 mM磷酸二氢钾、34μg/ml亚叶酸、171μg/ml大肠杆菌tRNA、33 mM磷酸烯醇丙酮酸盐（PEP）、1.5 mM亚精胺、1 mM腐胺、0.33 mM烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）、0.27 mM辅酶A、2.7 mM草酸钠、20种氨基酸各2 mM、5μM l-[14C（U）]-亮氨酸、2 mM对叠氮基-l-苯丙氨酸（pAzF）或4 mM对丙酰氧基-l-丙氨酸（pPaF）、0.3 mg/ml pAzFRS或0.5 mg/ml pPaFRS（如上所述制备）、100μg/ml T7 RNA聚合酶、6 nM sfGFP质粒、0.2 mg/ml线性化o-tRNA或o-tRNAopt质粒模板以及0.24体积的标准KC6提取物或0.28体积的正交提取物。谷氨酸盐从10倍浓缩（10倍）的溶液中稀释。类似地，10×NTMP主混合物溶液含有ATP、三种NMP、亚叶酸和大肠杆菌tRNA，并用磷酸二氢钾将pH调节至7.3。从含有50mM浓度的每种氨基酸的储备溶液中稀释天然氨基酸。该储备溶液是通过按以下顺序（以其一个字母代码给出）添加氨基酸来制备的：R、V、W、F、I、L、C、M、A、N、D、E、G、Q、H、K、P、S、T、Y。在制备过程中，确保每种氨基酸在添加下一种氨基酸之前溶解，酪氨酸除外，酪氨酸是最后添加的并保持悬浮在溶液中。除非另有说明，否则将反应物在30°C下孵育16小时。在暗室中制备含有pAzF的CFPS反应，并将含有反应溶液的管包裹在铝箔中，以防止芳香族叠氮化物的光解[1]。
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| 细胞实验 |
正交S30细胞提取物由携带pDule tRNA质粒的KC6细胞制备。均化后不稀释裂解物。该KC6/o-tRNA培养物在分批发酵过程中的比生长速率为0.57 h−1。标准KC6提取物按所述方法制备。均化后，每ml裂解物加入0.2 ml S30缓冲液（14 mM乙酸镁、60 mM乙酸钾、10 mM乙酸三酯，pH 8.2），并将稀释的裂解物在4°C下相对于100体积的S30缓冲溶液透析四次，每次30分钟。最后，将S30细胞提取物在10000 g和4°C下离心20分钟，将上清液等分，快速冷冻并储存在−80°C下。补料分批发酵过程中，KC6培养物的比生长速率为0.96 h−1[1]。
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| 参考文献 |
[1]. Albayrak C, et al. Cell-free co-production of an orthogonal transfer RNA activates efficient site-specific non-natural amino acid incorporation. Nucleic Acids Res. 2013 Jun;41(11):5949-63.
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| 其他信息 |
- 4-Azido-L-phenylalanine hydrochloride is a synthetic non-natural amino acid featuring an azido functional group (-N3) on the phenyl ring, which is bioorthogonally reactive [1]
- Its core application in the study is to serve as a substrate for site-specific incorporation into proteins via an orthogonal translation system, enabling precise modification or labeling of proteins in vitro [1] - The compound is designed for biochemical and molecular biology research, particularly for protein engineering and site-specific protein modification studies, rather than for therapeutic use [1] |
| 分子式 |
C9H11CLN4O2
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|---|---|
| 分子量 |
242.6622402668
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| 精确质量 |
242.057
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| 元素分析 |
C, 44.55; H, 4.57; Cl, 14.61; N, 23.09; O, 13.19
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| CAS号 |
34670-43-4
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| 相关CAS号 |
4-Azido-L-phenylalanine;33173-53-4
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| PubChem CID |
86585254
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| 外观&性状 |
Typically exists as off-white to light yellow solids at room temperature
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| tPSA |
77.7Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
16
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| 分子复杂度/Complexity |
267
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
C(O)(=O)[C@H](CC1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1)N.[H]Cl
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| InChi Key |
VXCXRGSRHCHMBK-QRPNPIFTSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C9H10N4O2.ClH/c10-8(9(14)15)5-6-1-3-7(4-2-6)12-13-11;/h1-4,8H,5,10H2,(H,14,15);1H/t8-;/m0./s1
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| 化学名 |
(2S)-2-amino-3-(4-azidophenyl)propanoic acid;hydrochloride
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| 别名 |
34670-43-4; 4-Azido-L-phenylalanine hydrochloride; 4-Azido-L-phenylalanine (hydrochloride); (2S)-2-amino-3-(4-azidophenyl)propanoic acid;hydrochloride; (2S)-2-AMINO-3-(4-AZIDOPHENYL)PROPANOIC ACID HYDROCHLORIDE; 4-Azido-L-phenylalanine HCl; 3-(p-Azidophenyl)-L-alanine Hydrochloride; 4-Azidophenylalanine Hydrochloride; p-Azido-L-phenylalanine Hydrochloride; p-Azidophenylalanine Hydrochloride; p-Azido-L-phenylalanine hydrochloride;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 103.3 mg/mL (~425.70 mM)
H2O : ~10 mg/mL (~41.21 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 16.67 mg/mL (68.70 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C). 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.1210 mL | 20.6050 mL | 41.2099 mL | |
| 5 mM | 0.8242 mL | 4.1210 mL | 8.2420 mL | |
| 10 mM | 0.4121 mL | 2.0605 mL | 4.1210 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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