| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Fluorescent dye
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| 体外研究 (In Vitro) |
母液制备
1. 蛋白准备 为获得最佳标记效果,请将蛋白(抗体)浓度调整为 2 mg/mL。 1) 蛋白溶液的 pH 值应为 8.5 ± 0.5。若 pH 低于 8.0,请使用 1 M 碳酸氢钠溶液进行调整。 2) 若蛋白浓度低于 2 mg/mL,标记效率将显著降低。建议最终蛋白浓度范围为 2–10 mg/mL,以获得最佳标记效率。 3) 蛋白应置于不含伯胺(如 Tris、甘氨酸)及铵离子的缓冲液中,否则可能影响标记效率。 2. 染料准备 使用无水 DMSO 将 5(6)-TAMRA 染料溶解,配制成 10 mM 储备溶液。通过玻璃管或涡旋振荡充分混匀。 注:5(6)-TAMRA 储备液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。使用前需先用缩合液(500 μg/mL)活化,方可进行后续标记实验。 3. 染料工作液用量计算 标记反应中所需的 5(6)-TAMRA 染料用量取决于待标记蛋白的量。5(6)-TAMRA 染料与蛋白的最佳摩尔比约为 10。 示例:如需标记 500 μL 浓度为 2 mg/mL 的 IgG(分子量 150,000),将 1 mg 5(6)-TAMRA 染料溶于 100 μL DMSO 中,则所需 5(6)-TAMRA 体积为 2.88 μL。具体计算步骤如下: 1) mmol(IgG)= mg/mL(IgG)× mL(IgG)/ MW(IgG)= 2 mg/mL × 0.5 mL / 150,000 mg/mmol = 6.7×10⁻⁶ mmol 2) mmol(5(6)-TAMRA)= mmol(IgG)× 10 = 6.7×10⁻⁶ mmol × 10 = 6.7×10⁻⁵ mmol 3) μL(5(6)-TAMRA)= mmol(5(6)-TAMRA)× MW(5(6)-TAMRA)/ mg/μL(5(6)-TAMRA)= 6.7×10⁻⁵ mmol × 430.45 mg/mmol / 0.01 mg/μL = 2.88 μL 使用方法 1. 标记反应 1) 取按计算体积新鲜配制的 10 mg/mL 5(6)-TAMRA 染料,缓慢加入 0.5 mL 蛋白样品溶液中,轻轻混匀,短暂离心使样品聚集于反应管底部。切忌剧烈混合,以免蛋白变性失活。 2) 将反应管置于避光处,室温下轻轻摇晃孵育 60 分钟。每隔 10–15 分钟,将反应管轻轻颠倒几次,使两种反应物充分混合,提高标记效率。 2. 蛋白纯化脱盐 以下方案以使用 Sephadex G-25 柱纯化染料-蛋白偶联物为例。 1) 按照生产说明书制备 Sephadex G-25 柱。 2) 将反应混合物加至 Sephadex G-25 色谱柱顶部。 3) 当样品流至顶部树脂表面下方时,立即加入 PBS(pH 7.2–7.4)。 4) 继续加入适量 PBS(pH 7.2–7.4),完成柱纯化。收集含有目标染料-蛋白偶联物的组分。 |
| 参考文献 |
| 分子式 |
C25H22N2O5
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|---|---|
| 分子量 |
430.45
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| 精确质量 |
430.15287
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| CAS号 |
98181-63-6
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| 相关CAS号 |
5(6)-TAMRA SE;246256-50-8
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| PubChem CID |
2762602
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| 外观&性状 |
Brown to black solid powder
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| 熔点 |
≥300ºC(lit.)
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| LogP |
9.059
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| tPSA |
194.1
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
875
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CN(C)C1=CC2=C(C=C1)C(=C3C=CC(=[N+](C)C)C=C3O2)C4=C(C=C(C=C4)C(=O)[O-])C(=O)O
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| InChi Key |
YMZMTOFQCVHHFB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H22N2O5/c1-26(2)15-6-9-18-21(12-15)32-22-13-16(27(3)4)7-10-19(22)23(18)17-8-5-14(24(28)29)11-20(17)25(30)31/h5-13H,1-4H3,(H-,28,29,30,31)
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| 化学名 |
3-carboxy-4-[3-(dimethylamino)-6-dimethylazaniumylidenexanthen-9-yl]benzoate
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| 别名 |
5-carboxytetramethylrhodamine; CHEBI:51657; RefChem:537820; 91809-66-4; ...; 5(6)-TAMRA Acid;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 20.83 mg/mL (~48.39 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.83 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浮液;超声助溶。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3232 mL | 11.6158 mL | 23.2315 mL | |
| 5 mM | 0.4646 mL | 2.3232 mL | 4.6463 mL | |
| 10 mM | 0.2323 mL | 1.1616 mL | 2.3232 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。