| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Fluorescent dye
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| 体外研究 (In Vitro) |
母液准备:
1. 蛋白准备 为获得最佳标记效果,请将蛋白(抗体)浓度调整为 2 mg/mL。 1) 蛋白溶液的 pH 值应为 8.5 ± 0.5。若 pH 低于 8.0,请使用 1 M 碳酸氢钠溶液进行调整。 2) 若蛋白浓度低于 2 mg/mL,标记效率将显著降低。建议最终蛋白浓度控制在 2–10 mg/mL 范围内,以获得最佳标记效率。 3) 蛋白应置于不含伯胺(如 Tris、甘氨酸)及铵离子的缓冲液中,否则可能影响标记效率。 2. 染料准备 使用无水 DMSO 将 5(6)-TAMRA SE 染料溶解,配制成 10 mM 储备液。通过玻璃管或涡旋振荡充分混匀。 3. 染料工作液用量计算 标记反应中所需的 5(6)-TAMRA SE 染料用量取决于待标记蛋白的量。5(6)-TAMRA SE 染料与蛋白的最佳摩尔比约为 10。 示例:如需标记 500 μL 浓度为 2 mg/mL 的 IgG(分子量 150,000),将 1 mg 5(6)-TAMRA SE 染料溶于 100 μL DMSO 中,则所需 5(6)-TAMRA SE 体积为 3.53 μL。具体计算步骤如下: 1) mmol(IgG)= mg/mL(IgG)× mL(IgG)/ MW(IgG)= 2 mg/mL × 0.5 mL / 150,000 mg/mmol = 6.7×10⁻⁶ mmol 2) mmol(5(6)-TAMRA SE)= mmol(IgG)× 10 = 6.7×10⁻⁶ mmol × 10 = 6.7×10⁻⁵ mmol 3) μL(5(6)-TAMRA SE)= mmol(5(6)-TAMRA SE)× MW(5(6)-TAMRA SE)/ mg/μL(5(6)-TAMRA SE)= 6.7×10⁻⁵ mmol × 527.53 mg/mmol / 0.01 mg/μL = 3.53 μL 使用方法 1. 标记反应 1) 取按计算体积新鲜配制的 10 mg/mL 5(6)-TAMRA SE 染料,缓慢加入 0.5 mL 蛋白样品溶液中,轻轻混匀,短暂离心使样品聚集于反应管底部。切忌剧烈混合,以免蛋白变性失活。 2) 将反应管置于避光处,室温下轻轻摇晃孵育 60 分钟。每隔 10–15 分钟,将反应管轻轻颠倒几次,使两种反应物充分混合,提高标记效率。 2. 蛋白纯化脱盐 以下方案以使用 Sephadex G-25 柱纯化染料-蛋白偶联物为例。 1) 按照生产说明书制备 Sephadex G-25 柱。 2) 将反应混合物加至 Sephadex G-25 色谱柱顶部。 3) 当样品流至顶部树脂表面下方时,立即加入 PBS(pH 7.2–7.4)。 4) 继续加入适量 PBS(pH 7.2–7.4),完成柱纯化。收集含有目标染料-蛋白偶联物的组分。 |
| 细胞实验 |
细菌标记及浓度监测实验:从含水层分离的两株细菌培养至对数中期,用磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤两次以去除培养基成分。5(6)-四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯(5(6)-TAMRA SE)溶解于二甲基亚砜(DMSO)制备储备液,再用PBS稀释至终浓度10 μM。细菌悬液(1×10⁶ CFU/mL)与染料溶液混合,25°C避光孵育30分钟。通过三轮离心-重悬于PBS的步骤去除未结合的染料。标记后的细菌采用荧光显微镜和流式细胞仪检测,激发波长544 nm,发射波长572 nm,可同时近实时监测两株细菌的浓度 [1]
肽段标记及聚合物掺入实验:含游离氨基的合成肽段溶解于0.1 M碳酸氢钠缓冲液(pH 8.5)中。按染料与肽段摩尔比3:1加入5(6)-四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯(5(6)-TAMRA SE)的DMSO储备液,室温避光搅拌反应2小时。加入1 M甘氨酸溶液(反应体积的10%)孵育30分钟终止反应。标记后的肽段经凝胶过滤层析和反相高效液相色谱(HPLC)纯化,去除未反应的染料和副产物。通过紫外-可见光谱和质谱法确认标记效率,标记后的肽段在激发后于572 nm处呈现特征荧光 [2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
5(6)-TAMRA SE(5(6)-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯)是一种荧光染料衍生物,以5-和6-异构体的混合物形式存在[1][2]
它含有一个琥珀酰亚胺酯(SE)官能团,该官能团可与生物分子(例如细菌表面蛋白、肽氨基末端)的伯氨基(-NH₂)发生共价反应,形成稳定的酰胺键,从而实现荧光标记[1][2] 其主要荧光特性包括激发波长约为544 nm,发射波长约为572 nm,具有高荧光量子产率和光稳定性,适用于长期监测和检测[1][2] 由于其强荧光和稳定的偶联作用,典型应用包括环境监测中的微生物标记、用于聚合物掺入的肽/蛋白质标记以及生物分子示踪[1][2] |
| 分子式 |
C29H25N3O7
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|---|---|
| 分子量 |
527.5247
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| 精确质量 |
527.169
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| CAS号 |
246256-50-8
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| 相关CAS号 |
5(6)-TAMRA;98181-63-6;NHS-5(6)Carboxyrhodamine;150408-83-6
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| PubChem CID |
92044448
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| 外观&性状 |
Purple to purplish red solid powder
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| LogP |
3.545
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| tPSA |
105.69
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
18
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| 可旋转键数目(RBC) |
10
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| 重原子数目 |
78
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| 分子复杂度/Complexity |
1960
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CN(C)C1=CC2=C(C=C1)C3(C4=C(C=C(C=C4)C(=O)ON5C(=O)CCC5=O)C(=O)O3)C6=C(O2)C=C(C=C6)N(C)C.CN(C)C1=CC2=C(C=C1)C3(C4=C(O2)C=C(C=C4)N(C)C)C5=C(C=CC(=C5)C(=O)ON6C(=O)CCC6=O)C(=O)O3
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| InChi Key |
UWQYEQKHQZYMMZ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/2C29H25N3O7/c1-30(2)17-6-9-21-23(14-17)37-24-15-18(31(3)4)7-10-22(24)29(21)20-8-5-16(13-19(20)28(36)38-29)27(35)39-32-25(33)11-12-26(32)34;1-30(2)17-6-9-20-23(14-17)37-24-15-18(31(3)4)7-10-21(24)29(20)22-13-16(5-8-19(22)28(36)38-29)27(35)39-32-25(33)11-12-26(32)34/h2*5-10,13-15H,11-12H2,1-4H3
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| 化学名 |
(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3',6'-bis(dimethylamino)-1-oxospiro[2-benzofuran-3,9'-xanthene]-5-carboxylate;(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3',6'-bis(dimethylamino)-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-5-carboxylate
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| 别名 |
246256-50-8; Xanthylium, 9-[2-carboxy-4(or 5)-[[(2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl)oxy]carbonyl]phenyl]-3,6-bis(dimethylamino)-, inner salt; 2,5-dioxopyrrolidin-1-yl 3',6'-bis(dimethylamino)-3-oxo-3H-spiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-5-carboxylate; 2,5-dioxopyrrolidin-1-yl 3',6'-bis(dimethylamino)-3-oxo-3H-spiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-6-carboxylate; MFCD30179714; 5(6)-TAMRASE;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 氮气保护,产品对湿气敏感,尽量减少暴露在空气中,避免反复的进出冰箱导致水汽凝结产生的影响 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~10 mg/mL (~18.96 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8957 mL | 9.4783 mL | 18.9566 mL | |
| 5 mM | 0.3791 mL | 1.8957 mL | 3.7913 mL | |
| 10 mM | 0.1896 mL | 0.9478 mL | 1.8957 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。