| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
BRafV600E 38 nM (IC50) BRAFWT 79 nM (IC50) CRAF 68 nM (IC50) p38 6 nM (IC50) CSF1R 35 nM (IC50) MAP3K7 6400 nM (IC50) CSK 7050 nM (IC50)
AZ304 targets BRAF kinase, specifically inhibiting both wild-type BRAF and the V600E mutant form. The compound binds to the ATP-binding site of BRAF, blocking its kinase activity and preventing the phosphorylation of downstream targets in the MAPK/ERK pathway. The IC50 values for BRAF inhibition are 38 nM for the V600E mutant and 79 nM for wild-type BRAF. By inhibiting BRAF, AZ304 reduces the phosphorylation of ERK (p-ERK), a key downstream effector, with mean EC50 values of 65 nM in V600E mutant BRAF melanoma cells (A375) and 52-60 nM in wild-type BRAF melanoma cells (SK-MEL-31). The compound’s activity against both mutant and wild-type BRAF makes it a valuable tool for studying the role of BRAF in cancer and for exploring potential therapeutic applications. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
AZ304（1 nM–100 μM）显著降低 p-ERK 磷酸化水平；在含有 V600E 突变 BRAF 的黑色素瘤细胞系 A375 中，平均 EC50 为 65 nM，而在野生型 BRAF 黑色素瘤细胞系 SK-MEL-31 中，无论是否添加 EGF，EC50 分别为 52 nM 和 60 nM[1]。在两种 BRAF 基因状态的细胞系中，AZ304 也均能强烈抑制 p-p38[1]。 AZ304（0、0.1、1、10、100 μM，48 和 72 小时）的 GI50 值分别为 4.539 μM、3.896 μM、4.987 μM 和 1.763 μM（48 小时），GI50 值分别为 0.5032 μM、0.3887 μM、0.6354 μM 和 0.3772 μM（72 小时），呈剂量依赖性地抑制 RKO、HT-29、DiFi 和 Caco-2 细胞的生长[1]。AZ304（2 μM，36 和 48 小时）可提高 BRAF 野生型和 BRAF V600E 突变细胞中 p-EGFR 的水平，同时降低 BRAF、p-ERK、p-AKT 和 p-mTOR 的水平。与 C225 联用时，AZ304 能更有效地抑制 BRAF、ERK、AKT 和 mTOR 信号通路，同时下调 p-EGFR 并抑制 p-ERK[1]。
AZ304 对多种癌细胞系表现出强大的体外活性。在 BRAF V600E 突变癌细胞系中，AZ304 显著抑制细胞增殖，GI50（50% 生长抑制）值范围为 0.08 至 7.72 μM。在携带野生型 BRAF/RAS 或突变型 RAS 的细胞系中，AZ304 能有效抑制细胞生长，GI50 值范围为 0.43 至 11.7 μM。在不同BRAF突变状态的结直肠癌细胞系中，AZ304呈剂量依赖性地抑制RKO（V600E突变型）、HT-29（V600E突变型）、DiFi（野生型BRAF）和Caco-2（野生型BRAF）细胞的生长，48小时的GI50值分别为4.539 μM、3.896 μM、4.987 μM和1.763 μM，72小时的GI50值分别为0.5032 μM、0.3887 μM、0.6354 μM和0.3772 μM。AZ304能有效降低黑色素瘤细胞系中的ERK磷酸化水平（p-ERK）。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
AZ304 已在异种移植瘤模型中进行了评估。在 RKO 和 Caco-2 肿瘤模型中，AZ304 均表现出抗肿瘤活性。该化合物以 10 mg/kg 的剂量每日两次口服给药。治疗结果显示肿瘤生长受到抑制，证实了 AZ304 作为 BRAF 抑制剂的体内疗效。在这些研究中，该化合物耐受性良好，未报告明显的毒性反应。这些发现支持 AZ304 作为 BRAF 突变型癌症（包括黑色素瘤和结直肠癌）治疗药物的潜力。
|
| 酶活实验 |
AZ304 的激酶抑制活性可通过体外激酶活性测定进行评估。在典型的测定中，将重组 BRAF 激酶（野生型或 V600E 突变体）与肽底物、ATP（包括放射性标记的 ³³P-ATP）以及不同浓度的 AZ304 一起孵育。测定磷酸盐掺入底物的量，并根据剂量-反应曲线计算半数抑制浓度 (IC50)。V600E 突变体和野生型 BRAF 的 IC50 值分别为 38 nM 和 79 nM。AZ304 对一系列其他激酶的选择性可通过激酶谱分析服务进行评估，以确定其脱靶效应。
|
| 细胞实验 |
细胞增殖实验[1]
细胞类型： RKO、HT-29、DiFi、Caco-2 细胞 测试浓度： 0、0.1、1、10、100 μM 孵育时间： 48、72 小时 实验结果： AZ304 呈剂量依赖性地抑制 V600E 突变型 BRAF 细胞系（RKO、HT-29）和野生型 BRAF 细胞系（DiFi、Caco-2）的生长。 使用一系列具有不同 BRAF 突变状态的癌细胞系评估 AZ304 的细胞活性。将细胞接种于96孔板中，并用递增浓度的AZ304（0、0.1、1、10、100 μM）处理48或72小时。采用MTT法检测细胞活力，并根据剂量反应曲线计算半数抑制浓度（GI50）值。采用Western blotting或ELISA法（使用针对磷酸化ERK的特异性抗体）检测ERK磷酸化（p-ERK）。采用流式细胞术和Western blotting评估AZ304对下游信号通路和细胞周期进程的影响。 |
| 动物实验 |
AZ304 已在异种移植模型中进行了评估，该模型使用接种了 RKO 或 Caco-2 细胞的雌性无胸腺 BALB/c 裸鼠。当肿瘤达到可触及的大小时，将动物随机分为治疗组和对照组。AZ304 以 10 mg/kg 的剂量每日两次口服给药。该化合物配制于 0.5% HPMC（羟丙基甲基纤维素）中。每周使用游标卡尺测量两次肿瘤体积，并计算肿瘤生长抑制率 (TGI)。监测体重作为毒性的一般指标。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
AZ304 的药代动力学特性已在临床前研究中得到表征。该化合物具有口服生物利用度，可通过灌胃给药。每日两次，每次 10 mg/kg 的剂量可使 AZ304 达到足够的全身暴露量，从而抑制肿瘤中的 BRAF 激酶活性。现有文献中尚未详细描述该化合物的半衰期、最大浓度 (Cmax)、曲线下面积 (AUC) 和其他药代动力学参数。0.5% HPMC 制剂表明该化合物具有良好的溶解性和稳定性，适合口服给药。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
现有文献中尚未发表AZ304的详细毒性数据。在异种移植小鼠研究中，据报道该化合物在每日两次、每次10 mg/kg的剂量下耐受性良好。然而，仍需进行全面的毒理学研究以评估AZ304的安全性，从而评估其潜在的临床开发。AZ304的作用机制涉及抑制BRAF和MAPK/ERK通路，可能导致皮肤毒性、胃肠道反应以及其他与BRAF抑制剂相关的常见不良反应。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
AZ304 是一种高效、选择性强且口服有效的 BRAF 抑制剂，可同时靶向野生型 BRAF 和 V600E 突变体，其 IC50 值分别为 79 nM 和 38 nM。该化合物能有效降低黑色素瘤细胞系中的 ERK 磷酸化水平 (p-ERK)。AZ304 可抑制癌细胞系的增殖，其 GI50 值范围为 0.08 至 11.7 μM。体内实验表明，AZ304 在异种移植瘤模型中具有抗肿瘤活性，每日两次口服 10 mg/kg 的剂量即可观察到此现象。AZ304 是研究 BRAF 驱动型癌症和探索潜在治疗策略的重要研究工具。
|
| 分子式 |
C27H25N5O2
|
|---|---|
| 精确质量 |
451.2
|
| 元素分析 |
C, 71.82; H, 5.58; N, 15.51; O, 7.09
|
| CAS号 |
942507-42-8
|
| PubChem CID |
16202218
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
5.2
|
| tPSA |
99.9
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
34
|
| 分子复杂度/Complexity |
749
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
CC1=C(C=C(C=C1)NC(=O)C2=CC(=CC=C2)C(C)(C)C#N)NC3=NC=NC4=C3C=CC(=C4)OC
|
| InChi Key |
NGWQZRWVYYFTHC-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C27H25N5O2/c1-17-8-9-20(31-26(33)18-6-5-7-19(12-18)27(2,3)15-28)13-23(17)32-25-22-11-10-21(34-4)14-24(22)29-16-30-25/h5-14,16H,1-4H3,(H,31,33)(H,29,30,32)
|
| 化学名 |
3-(2-cyanopropan-2-yl)-N-(3-((7-methoxyquinazolin-4-yl)amino)-4-methylphenyl)benzamide
|
| 别名 |
AZ304; AZ-304; AZ 304;
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : 125 mg/mL (276.84 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.61 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.61 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.61 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
