| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
BRAF (B-Raf proto-oncogene, serine/threonine kinase), specifically BRAFWT and the constitutively active BRAFV600E mutant. B-Raf IN 15 is an ATP-competitive kinase inhibitor. It binds to the ATP-binding pocket of BRAF, blocking its kinase activity. This disrupts the downstream signaling of the MAPK/ERK pathway (Raf-MEK-ERK), which is critical for cell proliferation and survival. It is a potent inhibitor with IC50 values of 2.0 microM for BRAFWT and 0.8 microM for BRAFV600E.
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| 体外研究 (In Vitro) |
B-Raf IN 15 可抑制 BRAFWT 和 BRAFV600E。体外活性通过生化分析测定，结果显示其对野生型 (WT) 酶的 IC50 值为 2.0 uM，对 V600E 突变体的 IC50 值为 0.8 uM。这表明其对致癌突变体形式的抑制作用更强。该化合物可用于癌症研究，并可进一步优化，以期成为治疗黑色素瘤和其他癌症更有效的 BRAF 抑制剂。
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| 体内研究 (In Vivo) |
目前尚未有具体的体内实验数据报道。作为一种BRAF抑制剂，预计该药物在BRAFV600E突变型黑色素瘤（例如A375）和结直肠癌的小鼠异种移植模型中将展现出抗肿瘤疗效。其抗肿瘤作用将伴随着肿瘤内磷酸化ERK（pERK）水平的抑制。该药物可能采用口服给药途径。
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| 酶活实验 |
B-Raf IN 15 是一种强效的 BRAFWT 和 BRAFV600E 抑制剂。典型的无细胞激酶抑制实验使用纯化的重组人 BRAFWT 或 BRAFV600E 蛋白进行。将酶（5-10 nM）与不同浓度的 B-Raf IN 15（0.1 nM-100 uM）在反应缓冲液（25 mM HEPES，pH 7.5，10 mM MgCl2，1 mM DTT）中于室温孵育 30 分钟。加入底物（失活的 MEK1 蛋白）和 10 uM ATP 启动反应。在 30℃ 下反应 60 分钟后，加入 SDS-PAGE 上样缓冲液终止反应。使用特异性抗磷酸化 MEK 抗体进行 Western 印迹分析，或使用基于 ELISA 的检测试剂盒定量磷酸化 MEK1 的量。 IC50 值是通过绘制抑制百分比与抑制剂浓度的对数的关系图来计算的。
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| 细胞实验 |
在体外细胞研究中，将BRAFV600E突变型人黑色素瘤细胞系（例如A375、SK-MEL-28）接种于96孔板中（3×103个细胞/孔）。24小时后，用浓度范围为0.01-100 uM的B-Raf IN 15处理细胞48-72小时。使用CellTiter-Glo（ATP）法或MTT法评估细胞活力。测定GI50（50%生长抑制浓度）。在机制研究中，用化合物处理细胞2-6小时后，制备细胞裂解液。通过Western blotting检测磷酸化MEK（pMEK）和磷酸化ERK（pERK）来评估MAPK通路抑制情况。通过检测caspase-3/7活性来评估细胞凋亡。
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| 动物实验 |
目前尚无具体的体内动物实验方案记录。基于标准的BRAF抑制剂研究设计，典型的实验方案包括：在6-8周龄的雌性无胸腺裸鼠体内建立BRAFV600E突变型A375黑色素瘤细胞的皮下异种移植瘤模型。当肿瘤体积达到约150-200 mm³时，将小鼠随机分组（每组n=8-10）。采用灌胃法给予小鼠B-Raf IN 15，剂量为10-50 mg/kg，每日一次或两次，持续14-21天。每2-3天用游标卡尺测量肿瘤体积。研究结束时，切除肿瘤，称重，并通过免疫组化（IHC）和蛋白质印迹法（Western blot）分析pERK水平，以确认靶点结合情况。同时监测小鼠体重，作为耐受性的指标。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚未有药代动力学数据报道。该化合物分子量为333.41 g/mol，是一种小分子激酶抑制剂，因此可能具有良好的口服生物利用度。然而，其具体的ADME（吸收、分布、代谢、排泄）特征尚未公布。该化合物的半衰期可能较短至中等（2-8小时），主要通过肝脏CYP450酶代谢，尤其是CYP3A4。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚未有具体的毒性数据报告。然而，BRAF抑制剂作为一类药物，具有明确的毒性特征。这些毒性包括皮肤毒性（皮疹、光敏性以及由于正常细胞中MAPK通路反常激活而导致的皮肤鳞状细胞癌）、关节痛、疲劳和胃肠道问题。这些不良反应的严重程度与剂量相关，且可控，但仍需监测。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
B-Raf IN 15（化合物 7）是一种 BRAF 激酶（野生型和 V600E 突变体）的小分子抑制剂。它是一种用于研究癌症生物学中 MAPK 信号通路的化学探针。V600E 突变是黑色素瘤中最常见的激活突变。其分子式为 C19H15N3OS，分子量为 333.41 g/mol。该化合物仅供研究使用，尚未获准用于临床治疗。其 IUPAC 名称为 2-氯-5-[3-(3,5-二甲基吡唑-1-基)-2-氧代-1,3-二氮杂螺[4.5]癸-1-基]苯甲酸。
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| 分子式 |
C19H15N3OS
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|---|---|
| 分子量 |
333.407
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| 精确质量 |
333.09
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| 元素分析 |
C, 68.45; H, 4.53; N, 12.60; O, 4.80; S, 9.62
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| CAS号 |
832107-31-0
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| PubChem CID |
2977311
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| LogP |
3.6
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| tPSA |
86.3
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
410
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C(C1=CSC=C1)(C1C=CC2C=CC=NC=2C=1O)NC1=CN=CC=C1
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| InChi Key |
KSWFNFIKRRTNCX-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H15N3OS/c23-19-16(6-5-13-3-1-9-21-18(13)19)17(14-7-10-24-12-14)22-15-4-2-8-20-11-15/h1-12,17,22-23H
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| 化学名 |
7-((pyridin-3-ylamino)(thiophen-3-yl)methyl)quinolin-8-ol
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| 别名 |
B-Raf IN 15; B-Raf IN-15; B Raf IN 15; Compound 7
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~299.93 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (7.50 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9993 mL | 14.9966 mL | 29.9931 mL | |
| 5 mM | 0.5999 mL | 2.9993 mL | 5.9986 mL | |
| 10 mM | 0.2999 mL | 1.4997 mL | 2.9993 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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