| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The primary targets of Hematoporphyrin monomethyl ether‑PDT are reactive oxygen species (ROS) including singlet oxygen and hydroxyl radical, which are generated upon light irradiation.
Intracellular calcium signaling pathways: elevation of cytosolic free calcium concentration ([Ca²⁺]ᵢ) mediated by degradation of sarco/endoplasmic reticulum Ca²⁺‑ATPase (SERCA2) on the endoplasmic reticulum membrane. Mitochondrial apoptotic pathway: cytochrome c release from mitochondria into cytosol and subsequent caspase‑3 activation. [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
对于光动力疗法 (PDT)，血卟啉单甲醚 (HMME) 是一种独特且极具前景的卟啉类光敏剂。在 HeLa 细胞中，HMME-PDT 可诱导坏死和凋亡，从而导致细胞死亡。HeLa 细胞产生的活性氧 (ROS)，例如羟基自由基和单线态氧，是 HMME-PDT 诱导细胞死亡所必需的[2]。
血卟啉单甲醚‐PDT（10 µg/ml HMME，孵育 2 小时，然后用 510.6 nm 波长、18 kJ/m² 的光照射 3 分钟）通过坏死和凋亡两种途径诱导 HeLa 细胞死亡。照射后 24 小时，MTT 法测得的细胞存活率为 19.73 ± 3.98%（与未处理的对照组相比）。 [1] 叠氮化钠（10 mM，单线态氧猝灭剂）或D-甘露醇（40 mM，羟自由基清除剂）分别显著提高了细胞存活率至38.14 ± 2.85%和31.46 ± 3.67%（与PDT组相比，P < 0.01）。BAPTA/AM（100 µM，细胞内钙螯合剂）提高了细胞存活率至42.67 ± 5.67%（与PDT组相比，P < 0.01）。[1] 通过亚G1期细胞群（PI染色）和Annexin V/PI流式细胞术评估细胞凋亡。PDT后12小时，细胞凋亡率为48.5 ± 2.85%。叠氮化钠将其降低至 40.45 ± 3.56%，D-甘露醇降低至 39.43 ± 4.37%，BAPTA/AM 降低至 30.56 ± 3.84%（与 PDT 组相比，P < 0.05）。[1] 血卟啉单甲醚-PDT 立即升高 [Ca²⁺]ᵢ：基础水平为 108.4 ± 7.5 nM；PDT 后 0 分钟为 164.5 ± 11.6 nM；30 分钟为 315.2 ± 12.6 nM；60 分钟为 597.5 ± 41.7 nM（与对照组相比，P < 0.01）。叠氮化钠或 D-甘露醇显著阻断了这些升高。 [1] 蛋白质印迹分析显示，HMME-PDT 可诱导线粒体细胞色素 c 在 PDT 后 6 小时和 12 小时释放到胞质中。叠氮化钠、D-甘露醇或 BAPTA/AM 可部分抑制这种释放。6 小时密度分析：细胞色素 c 释放量分别降低了 18.78 ± 2.31%（叠氮化钠）、38.37 ± 5.47%（D-甘露醇）和 43.88 ± 6.73%（BAPTA/AM）（与 PDT 组相比，P < 0.05）。12 小时：分别降低了 28.28 ± 3.51%、21.99 ± 2.47% 和 37.10 ± 4.73%。[1] 使用 DEVD-AFC 底物测定 Caspase-3 活性。光动力疗法（PDT）后6小时，活性较对照组增加7.19 ± 0.43倍；12小时后，活性增加5.58 ± 0.48倍。叠氮化钠使活性增加倍数分别降低至4.50 ± 0.35（6小时）和3.79 ± 0.41（12小时）；D-甘露醇使活性增加倍数分别降低至5.02 ± 0.51（6小时）和4.07 ± 0.33（12小时）；BAPTA/AM使活性增加倍数分别降低至3.03 ± 0.38（6小时）和3.61 ± 0.46（12小时）（与PDT组相比，P < 0.01）。[1]如Western blot所示，血卟啉单甲醚光动力疗法（PDT）可诱导SERCA2（HeLa细胞中普遍表达的SERCA2b亚型）的快速降解。叠氮化钠或D-甘露醇可部分抑制降解。[1] |
| 酶活实验 |
Caspase-3活性检测：在光动力疗法（PDT）后不同时间点收集细胞，离心后重悬于50 µl细胞裂解缓冲液中，并在0 °C下孵育10分钟。离心去除细胞碎片。然后向上清液中加入50 µl 2×反应缓冲液/DTT混合物和5 µl caspase-3底物（DEVD-AFC）。在37 °C下孵育1小时后，使用荧光分光光度计，以400 nm激发波长和505 nm发射波长测量荧光强度。Caspase-3活性以处理组细胞荧光强度与正常细胞荧光强度的比值表示。蛋白质浓度采用蛋白质定量试剂盒测定。 [1] SERCA2 蛋白印迹：收集 HeLa 细胞，用冰冷的 PBS 洗涤，并在冰上用裂解缓冲液裂解 30 分钟，然后以 10,000×g 离心 10 分钟。取 100 µg 去垢剂可溶性蛋白，在还原条件下进行 5% SDS-PAGE 电泳分离，并将蛋白转移至膜上。将膜与 SERCA2 抗体（1:1000）在室温下孵育 2 小时，随后与 HRP 标记的抗小鼠二抗（1:1000）孵育。化学发光信号在 X 光胶片上成像，并通过密度扫描进行定量分析。 [1]
细胞色素c释放测定：将细胞在4℃下以1000×g离心5分钟收集，用冷的PBS洗涤，并重悬于5倍体积的缓冲液A（250 mM蔗糖、20 mM HEPES-KOH、10 mM KCl、1.5 mM MgCl₂、1 mM EDTA钠、1 mM EGTA钠、1 mM DTT、0.1 mM苯甲基磺酰氟、20 µg/ml亮抑蛋白酶肽、10 µg/ml抑蛋白酶，pH 7.5）中。用22号针头反复抽吸15-20次进行匀浆。将匀浆液在 4 °C 下以 750×g 离心两次，每次 10 分钟，以去除碎片；然后将上清液在 4 °C 下以 10,000×g 离心 15 分钟，以获得线粒体沉淀。将上述上清液在 4 °C 下以 100,000×g 离心 1 小时，获得胞质提取物。测定蛋白质浓度后，取 100 µg 线粒体或 S-100 组分上样至 15% SDS-PAGE 凝胶。Western blot 使用小鼠单克隆 IgG1 抗细胞色素 c 抗体（1:500）和二抗 HRP 标记的抗小鼠抗体（1:1000）。[1] |
| 细胞实验 |
细胞培养和光动力疗法 (PDT)：HeLa 细胞培养于含 10% 热活化牛血清、100 IU/ml 青霉素和 100 mg/ml 链霉素的 DMEM 培养基中，置于 37 °C、5% CO₂ 的培养箱中。进行 PDT 时，将培养基更换为含 2% FBS 的新鲜培养基，并添加或不添加 10 µg/ml 血卟啉单甲醚，在黑暗条件下孵育 2 小时。然后，在室温下，使用铜蒸气激光器以 510.6 nm 波长的光照射细胞，光通量为 18 kJ/m²（照射时间 3 分钟，频率 6 kHz）。照射后，将细胞置于 37 °C、5% CO₂ 的培养箱中，直至进行实验。如前所述，在光照前 2 小时向培养物中加入叠氮化钠 (10 mM)、D-甘露醇 (40 mM) 或 BAPTA/AM (100 µM)。[1]
细胞存活率测定 (MTT)：将细胞以 1×10⁴ 个细胞/孔的密度接种于 96 孔板中，每孔加入 200 µl 培养基。过夜培养后，按照所述方法进行光动力疗法 (PDT) 处理。光照后 24 小时，向每孔加入 20 µl MTT（终浓度 0.5 mg/ml），并在 4 °C 下孵育 4 小时。用 200 µl DMSO 替换培养基以溶解甲臜晶体。室温下振荡 30 分钟，并在 570 nm 处读取光密度值。存活率以处理组细胞吸光度相对于正常细胞的百分比表示。 [1] [Ca²⁺]ᵢ 的测定：细胞用 D-PBS 洗涤，经胰蛋白酶消化收集，并在不同后处理时间点重悬于含 10% FBS 的 RPMI-1640 培养基中，浓度为 2×10⁷/ml。细胞在 37 °C 下用 Fura-2/AM（终浓度 5 µM）孵育 45 分钟。孵育后，细胞离心，用无 Ca²⁺ 的 HEPES 缓冲 HBSS 洗涤三次，并重悬于 2 ml 无 Ca²⁺ 的 HBSS 中，浓度为 10⁶/ml。在 37 °C 下，使用荧光分光光度计测量荧光强度，激发波长设置为 340 nm 和 380 nm，每 4 秒交替一次；发射波长为 500 nm。 [Ca²⁺]ᵢ 的计算公式为：[Ca²⁺]ᵢ (nM) = (F – F_min) / (F_max – F) × 224，其中 F 为 340/380 比值。F_max 通过添加 0.1% Triton X-100 和 1.25 mM CaCl₂ 获得，F_min 通过添加 10 mM EGTA 获得。[1] 细胞凋亡检测（Annexin V/PI）：刮取约 0.5×10⁶ 个处理或未处理的细胞，用冰冷的 PBS 洗涤两次，并重悬于 480 µl Annexin V 结合缓冲液中。将细胞与 5 µl Annexin V 和 10 µl 碘化丙啶在室温下避光孵育 20 分钟，然后用流式细胞仪进行分析（每个样品 1×10⁵ 个细胞）。右下象限（Annexin V⁺/PI⁻）=早期凋亡；右上象限（Annexin V⁺/PI⁺）=晚期凋亡。总凋亡率=右下象限和右上象限之和。[1] 凋亡检测（亚G1期细胞群）：用胰蛋白酶消化收集细胞，重悬于200 µl PBS中，并在4℃下用2 ml 75%冰乙醇固定过夜。离心沉淀细胞，重悬于含0.1 µg/ml RNase A和40 µg/ml PI的950 µl PBS中，于37℃染色30分钟，并通过流式细胞仪进行检测（每个样本10,000个细胞）。凋亡细胞以亚G1期细胞的百分比进行定量。[1] |
| 参考文献 |
[1]. Ding X, et al. Hematoporphyrin monomethyl ether photodynamic damage on HeLa cells by means of reactive oxygen species production and cytosolic free calcium concentration elevation. Cancer Lett. 2004;216(1):43-54.
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| 其他信息 |
血卟啉单甲醚是一种第二代卟啉类光敏剂，其开发旨在克服第一代光敏剂的缺点，例如皮肤光敏作用持续时间长（长达10周）、组织穿透性激活波长欠佳以及化学成分不明确。HMME由两种位置异构的单体卟啉组成。其光动力疗法机制涉及光激活后活性氧（单线态氧和羟基自由基）的生成，这些活性氧随后通过SERCA2降解诱导内质网应激，导致胞质钙离子浓度升高、细胞色素c释放、caspase-3激活以及随后的细胞凋亡。[1]
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| 分子式 |
C70H80N8O12
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|---|---|
| 分子量 |
1225.43
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| 精确质量 |
612.294
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| CAS号 |
148471-91-4
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
1123.6±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
633.3±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±0.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.622
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| LogP |
6.87
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| tPSA |
160.36
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| SMILES |
CC(C1=C(C)C2=NC1=CC1=C(C)C(CCC(=O)O)=C(C=C3C(CCC(=O)O)=C(C)C(C=C4C(C)=C(C(OC)C)C(=C2)N4)=N3)N1)O
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : 62.5 mg/mL (51.00 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (1.70 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.8160 mL | 4.0802 mL | 8.1604 mL | |
| 5 mM | 0.1632 mL | 0.8160 mL | 1.6321 mL | |
| 10 mM | 0.0816 mL | 0.4080 mL | 0.8160 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
RMC-5127
Degarelix acetate hydrate
DDO-2728
Vatalanib hydrochloride (Vatalanib hydrochloride; PTK787 hydrochloride; ZK-222584 hydrochloride; CGP-797870 hydrochloride)
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