| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
DENV NS4B protein, which mediates critical binding with viral NS3 helicase/protease to assemble replication complex;
The compound blocks de novo NS3–NS4B protein complex formation, the EC50 of disrupting wild-type NS3/NS4B interaction is 0.006 μM; mutant NS4B V91A raises this EC50 to 0.2 μM (42-fold resistance), mutant T108I raises EC50 to 0.05 μM (9-fold resistance)[1]. The primary target of (+)-JNJ-A07 is the interaction between two viral proteins, NS3 and NS4B, which is essential for the formation of the dengue virus replication complex. By blocking this interaction, the compound prevents the formation of the viral replication complex and inhibits viral replication. (+)-JNJ-A07 exhibits a high barrier to resistance and demonstrates potent activity against all four dengue virus serotypes. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
(+)- JNJ-A07 具有高抗性屏障，可阻止两种病毒蛋白（NS3 和 NS4B）相互作用形成病毒复制复合物 [1]。
1. 在 Vero E6 细胞上进行的泛登革病毒血清型抗病毒试验：JNJ-A07 对涵盖所有 4 种登革病毒血清型和多种基因型的 21 株临床分离株表现出皮摩尔至低纳摩尔级的 EC50 值。对于 Vero 细胞中的 DENV-2 株 16681，EC50 = 0.0001 μM，CC50 = 13 μM，选择性指数 (SI) = 130000；未观察到对寨卡病毒、日本脑炎病毒、西尼罗河病毒、黄热病病毒或其他RNA/DNA病毒的强交叉抗病毒活性[1] 2. 多细胞系抗DENV-2活性测试：对Huh-7、THP-1 DC-SIGN+细胞、人未成熟树突状细胞和C6/36蚊细胞均有活性；Huh-7细胞EC50 = 0.0008 μM，未成熟树突状细胞EC50 = 0.002 μM，C6/36细胞EC50 = 0.003 μM[1] 3. 给药时间测定：如果在细胞内病毒RNA合成开始之前（感染后10小时）添加JNJ-A07，则可完全抑制DENV RNA的产生；一旦病毒复制开始，抑制作用就会逐渐减弱[1] 4. 体外抗性选择试验：需要长期连续传代DENV（长达40周）才能产生低敏感性变异株；抗性毒株携带多个NS4B突变（L94F、T108I、T216N等），并且在白纹伊蚊C6/36蚊细胞中复制严重受损[1] 5. NS3-NS4B共免疫沉淀Western blot试验：35 nM JNJ-A07可使共沉淀的野生型NS3蛋白减少95%；抗性NS4B突变体在很大程度上逃避了这种阻断作用；该化合物可减缓 NS4A-2K-NS4B 前体蛋白的蛋白水解切割[1] 6. 亚基因组复制子适应性分析：单个 NS4B 抗性突变会导致不同的病毒复制缺陷；L94F 突变赋予最高的抗性（约 950 倍），同时在哺乳动物细胞中保持强大的复制能力[1] 在体外，(+)-JNJ-A07 对登革病毒表现出强效的抗病毒活性，在 Vero 细胞中对 DENV-2 株 (16681) 的 EC₅₀ 为 0.1 nM。它对 21 株临床分离株表现出纳摩尔至皮摩尔级的活性，这些分离株代表了已知基因型和血清型的自然遗传多样性。该化合物通过阻断两种病毒蛋白（NS3 和 NS4B）之间的相互作用来阻止病毒复制复合物的形成。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
1. 预防性 AG129 小鼠致死性登革病毒攻击模型（10⁶ PFU DENV-2 RL）：每日两次口服 JNJ-A07（1/3/10/30 mg/kg），于感染前 1 小时开始给药，可剂量依赖性地降低第 3 天的血浆病毒载量；30 mg/kg 可使病毒 RNA 降低 3.8 log10 拷贝/mL；30 mg/kg 组的动物存活率为 90%，而载体组的死亡率接近 100%[1]
2. 非致死性登革病毒动力学小鼠模型（10² PFU DENV-2 RL）：每日两次口服 3–30 mg/kg JNJ-A07 可将血浆病毒载量抑制至接近定量下限； 30/10 mg/kg 组的病毒载量 AUC 为载体对照组的 0%[1] 3. 延迟治疗小鼠模型：在第 4 天（病毒血症高峰期）开始治疗，可在 72 小时内清除血浆病毒；即使在第 5/6 天（病毒高峰期）开始治疗，也能立即降低病毒载量，尽管在第 6 天开始治疗时，AUC 抑制率下降至 52%[1] 4. 组织病毒载量检测：口服 JNJ-A07 可剂量依赖性地显著降低小鼠脾脏、肾脏和肝脏中的 DENV RNA 拷贝数[1] 5. 感染小鼠血浆中的细胞因子检测：化合物治疗可使登革病毒感染诱导的促炎细胞因子 IL-6、IL-18、IFNγ 和 TNF 水平恢复正常[1] 6. 与 NS4B 抑制剂 NITD-688 的直接比较：在 AG129 小鼠中，等效口服剂量的 JNJ-A07 可实现更强的病毒抑制[1] 在体内，(+)-JNJ-A07 具有口服活性，并显示出显著的抗病毒疗效该化合物在小鼠登革病毒感染模型中显示出良好的药代动力学特性，支持其口服生物利用度和体内疗效。研究表明，该化合物能够降低登革病毒感染动物模型的病毒载量并提高其存活率。 |
| 酶活实验 |
1. NS3-NS4B结合免疫沉淀功能分析：构建编码NS2B-NS3蛋白酶-解旋酶复合物和NS4A-2K-NS4B（野生型或带有C端HA标签的突变型NS4B）的载体，并在基因工程改造的Huh7-T7细胞中表达。在转染或更换培养基时加入测试化合物。使用含有蛋白酶抑制剂的温和非离子去垢剂裂解缓冲液制备细胞裂解液。抗HA亲和树脂捕获NS4B相关蛋白复合物。捕获的蛋白质经SDS-PAGE分离后，通过Western blot定量分析共洗脱的NS3和NS4B前体条带强度，以计算NS3/NS4B结合率和化合物抑制效力[1]
2. 体外预形成的NS3-NS4B复合物稳定性测定：将含有已组装的NS3/NS4B复合物的细胞裂解液与测试化合物在20℃或37℃下孵育2小时，然后进行HA pull-down和Western blot检测，以验证化合物是否能破坏已形成的蛋白质异二聚体[1] (+)-JNJ-A07的体外酶/受体结合测定通常涉及研究其对NS3-NS4B相互作用的影响。使用共免疫沉淀、表面等离子共振或荧光偏振等生化测定方法，检测该化合物破坏这两种病毒蛋白之间相互作用的能力。 EC₅₀ 值由剂量反应曲线计算得出。 |
| 细胞实验 |
1. EGFP 报告基因 DENV 细胞病变抑制试验：将贴壁 Vero/Huh7 悬浮 THP-1 DC-SIGN 细胞接种于多孔板中，并加入系列稀释的 JNJ-A07 病毒。以固定 MOI 感染 eGFP 标记的 DENV-2 病毒，孵育 72 小时。通过激光成像定量反映病毒复制的荧光信号；同时进行细胞活力发光试验，测定化合物的细胞毒性，计算 EC50 和 CC50[1]
2. 人未成熟树突状细胞流式细胞术抗病毒试验：用白细胞介素诱导人外周血中分离的单核细胞分化为未成熟树突状细胞。用梯度化合物处理野生型 DENV-2 病毒感染细胞。孵育 48 小时后，固定细胞并用抗 prM 病毒抗体染色，流式细胞术计数病毒阳性细胞的百分比； 3. 蚊子 C6/36 细胞病毒产量降低试验：将白纹伊蚊 C6/36 细胞在 28 °C 下培养，并与系列稀释的化合物和 DENV-2 RL 毒株孵育 7 天。收集细胞上清液进行病毒 RNA RT-qPCR 定量；同时进行细胞核染色，定量活细胞计数以计算 CC50[1] 4. DENV 全基因组测序用于鉴定耐药突变体：将野生型 DENV 在经化合物处理的 Vero 细胞中每周进行连续传代，最多传代 43 代。从培养上清液中提取病毒 RNA，进行逆转录、扩增，并在 Illumina 平台上进行测序；设定变异频率阈值15%用于鉴定NS4B耐药突变[1] 5. DENV亚基因组复制子荧光素酶检测：将体外转录的突变型/野生型DENV亚基因组复制子RNA电穿孔导入Huh7细胞。将化合物进行系列稀释后加入细胞培养基中。孵育48-96小时后，读取细胞裂解荧光素酶信号以评估病毒复制能力和化合物耐药倍数变化[1] (+)-JNJ-A07的体外细胞检测包括测试其对登革病毒的抗病毒活性。用登革病毒感染Vero细胞或其他易感细胞系，并用(+)-JNJ-A07进行系列稀释（0.001-100 nM）处理。感染48-72小时后，通过噬斑试验、qRT-PCR或免疫荧光法检测病毒复制情况。该化合物表现出浓度依赖性的抗病毒活性，对登革病毒2型（DENV-2）的EC₅₀值为0.1 nM。同时采用MTT或CCK-8法评估其细胞毒性。 |
| 动物实验 |
1. 雄性CD-1小鼠静脉注射药代动力学试验：将JNJ-A07配制成浓度为0.5 mg/mL的PEG400和钠调节水混合溶剂，单次静脉注射2.5 mg/kg。分别于0.12、0.33、1、2、4、7 h经肢体静脉采集血样，并于24 h进行心脏穿刺，采用LC-MS/MS检测血浆化合物浓度[1]
2. 雄性CD-1小鼠口服药代动力学试验：将化合物溶解于相同的PEG400-水溶剂中，单次灌胃给予1、3、10、30 mg/kg。血液采样时间点与静脉注射组一致，采用非房室药代动力学分析计算暴露参数[1] 3. 大鼠口服和静脉注射药代动力学：Sprague Dawley雄性大鼠接受2.5 mg/kg静脉注射或10 mg/kg口服化合物溶液，血浆采样和LC-MS/MS定量分析与小鼠方案相同[1] 4. 致死性登革热预防小鼠模型（AG129雌性小鼠，7-11周龄）：腹腔注射10⁶ PFU DENV-2 RL；感染前24小时，单次注射抗黄病毒抗体以模拟抗体依赖性增强。JNJ-A07每日两次灌胃（1/3/10/30 mg/kg），给药于病毒攻击前1小时开始，连续治疗5天。每日观察小鼠体重减轻和临床症状，直至第25天；收集终末血液和器官组织用于病毒载量检测[1] 5. 延迟治疗登革热小鼠模型（AG129雌性）：腹腔注射低剂量10² PFU DENV-2 RL。感染后第0/1/2/3/4/5/6天开始每日两次口服30 mg/kg JNJ-A07治疗，治疗持续时间固定为6天。动物被分成交替采血的亚组，以测量14天内血浆病毒RNA的纵向水平[1] 6. 啮齿动物15天重复剂量毒性试验：雄性大鼠连续15天每日灌胃给予JNJ-A07，剂量最高达300 mg/kg，并在给药期间监测临床不良反应[1] (+)-JNJ-A07的体内动物研究包括在登革病毒感染模型中进行疗效测试。小鼠感染登革病毒后，以不同剂量口服给予(+)-JNJ-A07治疗。在感染过程中监测存活率、体重变化和组织中的病毒载量。该化合物显示出显著疗效，可降低小鼠感染模型中的病毒载量并提高存活率。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 小鼠静脉注射药代动力学参数（2.5 mg/kg IV）：血浆清除率 CLp = 4.1±0.4 mL/min/kg；
稳态分布容积 Vdss = 0.78±0.04 L/kg； 末端消除半衰期 t1/2 = 3.0±0.04 h； 总血浆暴露量 AUC0-last = 10227±903 ng·h/mL[1] 2. 小鼠口服药代动力学参数：口服生物利用度 F 在 1–30 mg/kg 剂量范围内为 37%–59%； 30 mg/kg 口服组 Cmax = 12143±4500 ng/mL，Tmax = 2.0±1.7 h，AUC0-last = 71963±8550 ng·h/mL[1] 3. 大鼠静脉注射药代动力学（2.5 4. 大鼠口服药代动力学 (10 mg/kg)：CLp=4.4±2.5 mL/min/kg，Vdss=1.0±0.4 L/kg，t1/2=3.1±0.3 h[1] 5. 大鼠口服药代动力学 (10 mg/kg)：口服生物利用度 >100%，Cmax=4440±322 ng/mL，Tmax=5.0±1.7 h[1] 6. 感染小鼠的组织分布：口服 JNJ-A07 可渗透至脾脏、肾脏和肝脏组织，发挥局部抗登革热活性[1] 7. 线性暴露特征：在测试的口服剂量范围内（1–30 mg/kg 小鼠），血浆 AUC 和 Cmax 随口服剂量的增加呈比例增加[1] (+)-JNJ-A07 的分子式为 C₂₈H₂₆ClF₃N₂O₆ 和该化合物分子量为578.96。该化合物仅供研究使用，尚未获准用于临床。它是一种高效的口服活性泛血清型登革病毒抑制剂。临床前研究已对其半衰期和口服生物利用度等详细的药代动力学参数进行了表征。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 啮齿动物重复给药毒性：大鼠连续 15 天每日口服剂量高达 300 mg/kg，未观察到不良毒性症状[1]
2. 体外细胞毒性：对登革病毒感染细胞具有高选择性指数；Vero 细胞中的 CC50 = 13 μM，远高于抗病毒 EC50 (0.0001 μM)；在Huh7细胞中CC50 >25 μM，在有效抗病毒浓度下细胞毒性极低[1] 3. 蚊细胞毒性：JNJ-A07对C6/36细胞的CC50 =18 μM，在有效抗病毒浓度下未观察到明显的细胞损伤[1] 4. 脱靶病毒毒性：在治疗浓度下，对其他黄病毒（寨卡病毒、日本脑炎病毒、西尼罗河病毒、黄热病毒）或无关的RNA/DNA病毒无显著抑制活性，表明脱靶病毒毒性风险低[1] 5. 耐药病毒传播毒性：NS4B突变耐药病毒在蚊子C6/36细胞中复制能力较弱，即使在人类宿主中出现耐药性，通过蚊媒的传播也受到很大限制[1] (+)-JNJ-A07的毒性特征尚未得到充分表征。作为一种研究化合物，标准的毒性研究应包括评估其在动物模型中的急性经口毒性、重复给药毒性和遗传毒性。该化合物仅供研究使用，尚未获准用于临床。需要进行进一步的毒理学研究，以充分确定其在治疗应用中的安全性。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. 作用机制核心：JNJ-A07 仅抑制 NS3–NS4B 蛋白复合物的从头形成，不能解离预组装的 NS3/NS4B 异二聚体；该化合物减缓 NS4A-2K-NS4B 多聚蛋白前体的蛋白水解切割，从而进一步阻断复制复合物的组装[1]
2. 耐药屏障特征：高遗传屏障需要多个 NS4B 点突变同时发生才能产生高水平耐药性；单个突变仅导致轻度至中度的敏感性降低；自然循环的登革热临床分离株几乎不携带高风险 NS4B 耐药突变[1] 3. 临床转化价值：在预防性和延迟治疗性小鼠登革热模型中均有效；能够快速降低病毒血症峰值，与登革热临床患者的病毒动力学特征相符，支持其在人类治疗和预防方面的应用潜力[1] 4. 化合物开发背景：源自吲哚骨架高通量筛选，共合成约2000个类似物用于结构优化；合成路线已在多项全球专利出版物中记录，其中一个结构相近的类似物已进入后续临床前评估[1] 5. 与现有NS4B抑制剂NITD-688相比的优势：独特的NS4B结合模式和耐药突变谱； JNJ-A07在登革热小鼠模型中，以等效口服剂量显示出显著更强的体内抗病毒活性[1] 6. 适应症方向：本品被开发为一种用于治疗和预防登革热及重症登革热感染的泛血清型口服小分子药物，填补了已批准的登革热口服抗病毒药物的空白[1] (+)-JNJ-A07（CAS 2135640-93-4）是一种高效、口服有效的泛血清型登革病毒抑制剂，靶向NS3-NS4B相互作用。其分子式为C₂₈H₂₆ClF₃N₂O₆，分子量为578.96。该化合物对21株临床分离株具有纳摩尔至皮摩尔级的活性，对DENV-2的EC₅₀值为0.1 nM。该药物在小鼠感染模型中显示出显著疗效。它仅供研究使用，尚未获准用于临床。 |
| 分子式 |
C28H26CLF3N2O6
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|---|---|
| 分子量 |
578.96
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| 精确质量 |
578.143
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| 元素分析 |
C, 58.09; H, 4.53; Cl, 6.12; F, 9.84; N, 4.84; O, 16.58
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| CAS号 |
2135640-93-4
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| 相关CAS号 |
(-)-JNJ-A07;2135640-92-3
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| PubChem CID |
131964318
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| 外观&性状 |
White to light brown solid powder
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| LogP |
6.3
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| tPSA |
97.3
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
10
|
| 可旋转键数目(RBC) |
11
|
| 重原子数目 |
40
|
| 分子复杂度/Complexity |
843
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
N1(CCC2=C1C=C(C=C2)OC(F)(F)F)C(C(C1=CC=C(C=C1)Cl)NC1=CC(OCCCC(O)=O)=CC(=C1)OC)=O
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| InChi Key |
WUBVXTOLZKVNEG-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C28H26ClF3N2O6/c1-38-22-13-20(14-23(15-22)39-12-2-3-25(35)36)33-26(18-4-7-19(29)8-5-18)27(37)34-11-10-17-6-9-21(16-24(17)34)40-28(30,31)32/h4-9,13-16,26,33H,2-3,10-12H2,1H3,(H,35,36)
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| 化学名 |
4-[3-[[1-(4-chlorophenyl)-2-oxo-2-[6-(trifluoromethoxy)-2,3-dihydroindol-1-yl]ethyl]amino]-5-methoxyphenoxy]butanoic acid
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| 别名 |
JNJ-A07; (+)-JNJ-A07; (+)-JNJ A07; SCHEMBL25852911;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : 100 mg/mL (172.72 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7272 mL | 8.6362 mL | 17.2724 mL | |
| 5 mM | 0.3454 mL | 1.7272 mL | 3.4545 mL | |
| 10 mM | 0.1727 mL | 0.8636 mL | 1.7272 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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