shp2 (IC50 = 0.318 μM); shp1 (IC50 = 0.355 μM)
NSC-87877 targets the protein tyrosine phosphatases SHP-1 (PTPN6) and SHP-2 (PTPN11). These are key regulators of growth factor and cytokine signaling pathways, which are often dysregulated in cancer. By inhibiting SHP-2, which is an oncoprotein, NSC-87877 can block downstream signaling pathways such as the Ras-MAPK pathway. Its inhibition of SHP-1 can also modulate immune cell signaling.

NSC-87877（0-0.5 μM，5 天）可抑制 NB 细胞系中的 DUSP26 活性[3]。
NSC-87877（0-0.5 μM，5 天）可导致 p53 在 Ser37 和 Ser46 位点的活化和磷酸化增加[3]。

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NSC-87877 是一种新型、高效且细胞渗透性良好的小分子 SHP-1 和 SHP-2 PTP（蛋白酪氨酸磷酸酶）抑制剂，可在细胞内溶解。其 IC50 值分别为 55 nM 和 318 nM。蛋白质磷酸化对于许多调控细胞活动的过程至关重要，因此也与多种疾病相关。蛋白激酶和磷酸酶的功能控制着细胞内磷酸化的平衡。因此，这些调控蛋白已成为极具吸引力的药物研发靶点。 NSC-87877 以剂量依赖的方式降低了双特异性蛋白磷酸酶 26 (DUSP26) 的磷酸酶活性。NSC-87877 与 DUSP26 的动力学研究表明二者之间存在竞争性抑制关系。NSC-87877 能有效抑制 DUSP26 介导的丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 家族成员 p38 的去磷酸化。由于 DUSP26 参与间变性甲状腺癌 (ATC) 细胞的存活，NSC-87877 可能是一种治疗 ATC 的潜在药物。体外实验表明，NSC-87877 二钠是 SHP-1 和 SHP-2 的强效抑制剂，其对这两种酶的 IC50 值分别为 355 nM 和 318 nM。它还能抑制 HEK293 细胞中 EGF 诱导的 Erk1/2 活化，并显著降低 MDA-MB-468 乳腺癌细胞的活力和增殖。

NSC-87877（30 mg/kg，腹腔注射，每日一次，连续15天）具有强大的抗神经母细胞瘤特性[3]。

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在肾内NB小鼠模型中，NSC-87877治疗可抑制肿瘤生长并增强p53和p38活性。NSC-87877对DUSP26的抑制作用可有效激活p53和p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）肿瘤抑制通路，进而导致NB细胞在体外和体内均表现出细胞毒性。
NSC-87877影响体内NB肿瘤的生长[3]
为了测试小分子抑制剂DUSP26在体内的作用，我们使用了一种成熟的肾内NB肿瘤小鼠模型。30 将表达荧光素酶的SH-SY5Y细胞注射到雌性裸鼠的左肾中。肿瘤生长10天后，小鼠接受腹腔注射安慰剂（对照组）或30 mg/kg NSC-87877，每日一次，持续15天。每周通过腹腔注射荧光素和生物发光成像监测小鼠。图7a显示，治疗第1天两组肿瘤负荷相当，生物发光信号相似，但治疗第15天信号出现差异。第15天进行尸检并称量肿瘤重量。对照组肿瘤显著大于NSC-87877治疗组（P<0.01；图7b）。

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现有文献中未提供NSC-87877二钠的体内数据。作为一种研究工具，需要研究其在动物模型中的作用，以了解其治疗潜力。

在与活性磷酸化p38 (10 ng) 于37 °C孵育15分钟之前，将六组氨酸标签的DUSP26 (1 μg) 与不同浓度的NSC-87877 (0、10或50 μM) 在PTP测定缓冲液中预混。从预孵育的样品开始，加入激酶反应缓冲液（20 mM Tris-HCl (pH 7.5)、20 mM MgCl2、0.1 mM原钒酸钠和1 mM DTT），以及20 μM ATP/10 μCi [γ-32P]ATP和1 μg GST激活转录因子2 (ATF2) 作为底物，以启动激酶测定反应。激酶反应产物经SDS-PAGE分离后进行放射自显影，反应在30℃下进行30分钟后，加入SDS-PAGE上样缓冲液终止反应。为了验证DUSP26不会使ATF2去磷酸化，ATF2通过与p38孵育进行³²P标记。样品在有或无DUSP26的情况下于30℃下继续孵育30分钟，然后进行SDS-PAGE分离。干燥后，将凝胶曝光于X光胶片。

免疫复合物激酶活性检测。将HA-p38和FLAG-DUSP26表达质粒共转染至HEK 293细胞中进行免疫复合物激酶活性检测。转染48小时后，用H₂O₂（1 mM，30分钟）刺激细胞，并预先用NSC-87877（0–100 μM，3小时）处理。离心去除多余液体后，使用抗HA琼脂糖珠对细胞提取物进行免疫沉淀。琼脂糖珠依次用PTP裂解缓冲液处理一次，用150 mM NaCl、5 mM EDTA、2 mM DTT和1 mM PMSF处理两次，最后用20 mM Tris-HCl（pH 7.5）、20 mM MgCl₂和5 mM EDTA的混合物处理一次。随后，将磁珠再次悬浮于激酶反应缓冲液（20 mM Tris-HCl (pH 7.5)、20 mM MgCl2 和 1 mM DTT）中，该缓冲液含有 20 μM ATP、0.3 μCi [γ-32P]ATP 和 1 μg GST-ATF2，于 30 摄氏度孵育 1 小时。采用 SDS-PAGE 技术分离激酶反应产物。凝胶干燥后进行胶片曝光。

体外磷酸酶活性测定及动力学评价。采用基于先前发表技术的 96 孔微孔板测定法，使用底物 3-O-甲基荧光素磷酸酯 (OMFP) 评估磷酸酶活性，底物浓度根据各酶的 Km 值而变化。分别使用 H2O 和 DMSO 溶解 NSC-87877 和 OMFP。所有反应均以1% DMSO为最终浓度进行。最终孵育混合物（150 μl）包含30 mM Tris-HCl（pH 7）、75 mM NaCl、1 mM乙二胺四乙酸（EDTA）、0.1 mM二硫苏糖醇（DTT）、0.33%牛血清白蛋白（BSA）和100 nM PTPs。该混合物已针对酶活性进行了优化。加入OMFP启动反应，并在37 °C下孵育30分钟。使用多孔板读数仪（GENios Pro；激发滤光片485 nm；发射滤光片535 nm）测量产物的荧光发射。在整个实验过程中，反应呈线性，且与酶和底物的浓度呈正相关。抑制剂的半数抑制常数 (IC50) 定义为 PTP 活性降低 50% 时的浓度。使用 Prism 3.0 曲线拟合软件获得 Lineweaver-Burk 图的最佳曲线拟合和半数抑制常数。每个实验至少重复三次，每次重复均进行三份平行实验。

使用活性磷酸化 MAPK 进行去磷酸化测定。在 PTP 测定缓冲液（30 mM Tris-HCl (pH 7)、75 mM NaCl、1 mM EDTA、0.1 mM DTT 和 0.33% BSA）中，将六组氨酸标签的 DUSP26 (1 μg) 与活性磷酸化 p38 (10 ng)、ERK (10 ng) 或 JNK (50 ng) 混合。然后将混合物在 37 °C 下孵育 30 分钟。在 30 μl 的反应体系中，将 1 μg DUSP26 与 10 ng 活性磷酸化 p38 以及不同浓度的 NSC-87877（0、10 或 100 μM）混合，以检测 NSC-87877 是否在体外下调 DUSP26 对 p38 的作用。混合物在 37 °C 下孵育 30 分钟。使用磷酸化 MAPK 抗体，对样品进行 Western blotting 分析，以确定 MAPK 的磷酸化状态。

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使用体外磷酸酶活性测定法评估 NSC-87877 的抑制活性。将重组 SHP-1 或 SHP-2 酶与荧光底物和不同浓度的化合物孵育。测量底物的去磷酸化程度，并计算 IC50 值。

细胞收集后，使用含有 50 mM Tris-HCl (pH 8)、300 mM NaCl、1% NP-40 和 1 mM PMSF（苯甲基磺酰氟）的缓冲液进行超声裂解。裂解液在 4 °C 下处理 30 分钟，然后以 4000 rpm 的转速离心澄清。上清液通过重力流上样至 Ni-NTA 树脂柱。使用含有 20 mM Tris-HCl (pH 8)、500 mM NaCl 和 200–300 mM 咪唑的缓冲液进行洗脱后，再用含有 20 mM Tris-HCl (pH 8)、50 mM 咪唑和 500 mM NaCl 的缓冲液冲洗树脂柱。将洗脱的蛋白质在含有 20 mM Tris-HCl、100 mM NaCl、30% 甘油和 0.5 mM PMSF 的透析液中透析过夜后，储存于 -80 °C。

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在多种细胞系中评估 NSC-87877 的细胞活性。通过蛋白质印迹法检测 Erk1/2 等磷酸化蛋白，评估其对细胞信号传导的影响。采用标准方法测定其对细胞活力和增殖的影响。

雌性裸鼠肾内神经母细胞瘤 (NB) 肿瘤小鼠模型。
30 mg/kg。
腹腔注射，每日一次，持续 15 天。

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RNA 干扰和 NSC-87877 对原位小鼠模型中 NB 细胞生长的影响[3]
使用雌性 Nu-nude 小鼠（Taconic Biosciences，美国纽约州哈德逊）进行 NSC-87877 的体内试验，并与对照组进行比较。如前所述³⁰，将 SH-SY5Y 转导的荧光素酶细胞 (SY5Y-Luc) 和 SH-SY5Y 转导的 shDUSP26-1 细胞植入左肾。植入 10 天后对小鼠进行成像并测量通量。使用 5 × 10⁷ 总通量 (p/s) 的阈值来标准化接受治疗的小鼠。实验分为两组，一组腹腔注射NSC-87877（剂量为30 mg/kg/天），另一组腹腔注射等体积的0.9%氯化钠溶液作为对照。15天后进行尸检并测量肿瘤重量。为进行磷酸化免疫印迹分析，将SH-SY5Y-Luc植入三只小鼠的肾脏。当达到预先设定的通量阈值后，两只小鼠接受30 mg/kg的NSC-87877治疗，另一只小鼠接受对照注射。分别在注射NSC-87877后12小时和24小时处死小鼠并进行尸检。立即用液氮速冻肿瘤组织，以便后续提取蛋白质。将10 mg肿瘤组织研磨，与蛋白裂解缓冲液混合，通过22G针头抽吸，冰上孵育30分钟提取蛋白。[3]在动物实验中，通常通过腹腔注射或静脉注射给啮齿动物给予NSC-87877，并评估其对肿瘤生长或免疫反应的影响。

所提供的文献中未详细描述NSC-87877二钠的药代动力学性质。作为一种小分子（分子量503.42），它可溶于DMSO和水。

未提供 NSC-87877 二钠的毒理学数据。

[1]. Discovery of a novel shp2 protein tyrosine phosphatase inhibitor. Mol Pharmacol. 2006 Aug;70(2):562-70.

[2]. NSC-87877, inhibitor of SHP-1/2 PTPs, inhibits dual-specificity phosphatase 26 (DUSP26). Biochem Biophys Res Commun. 2009 Apr 17;381(4):491-5.

[3]. NSC-87877 inhibits DUSP26 function in neuroblastoma resulting in p53-mediated apoptosis. Cell Death Dis. 2015 Aug 6;6(8):e1841.

8-O-7-[(6-磺酰基-2-萘基)肼基]-5-喹啉磺酸是一种萘磺酸。Shp2 是一种非受体蛋白酪氨酸磷酸酶 (PTP)，由 PTPN11 基因编码。它参与生长因子诱导的丝裂原活化蛋白 (MAP) 激酶 Erk1 和 Erk2 (Erk1/2) 的激活，并与致癌细菌幽门螺杆菌的致病性相关。此外，在儿童白血病和努南综合征中发现了 Shp2 的功能获得性突变。因此，小分子 Shp2 PTP 抑制剂对于评估 Shp2 作为治疗靶点以及开展 Shp2 的功能化学生物学研究至关重要。通过筛选美国国家癌症研究所 (NCI) 化合物库，我们鉴定出 8-羟基-7-(6-磺基萘基)二氮喹啉-5-磺酸 (NSC-87877) 是一种有效的 Shp2 PTP 抑制剂。分子建模和定点突变研究表明，NSC-87877 可与 Shp2 PTP 的催化裂隙结合。NSC-87877 在体外表现出对 Shp1 的交叉抑制作用，但其对 Shp2 的选择性高于其他 PTP（PTP1B、HePTP、DEP1、CD45 和 LAR）。值得注意的是，NSC-87877 可抑制表皮生长因子 (EGF) 诱导的细胞培养物中 Shp2 PTP、Ras 和 Erk1/2 的激活，但不阻断 EGF 诱导的 Gab1 酪氨酸磷酸化或 Gab1-Shp2 结合。此外，NSC-87877抑制Gab1-Shp2嵌合体激活Erk1/2，但对佛波酯（PMA）诱导的Shp2非依赖性Erk1/2激活无影响。这些结果表明，NSC-87877是首个能够在细胞培养中抑制Shp2 PTP且无显著脱靶效应的PTP抑制剂。我们的研究也首次提供了Shp2介导的EGF诱导Erk1/2 MAP激酶激活的药理学证据。[1] 蛋白质磷酸化在许多调节细胞活性的机制中发挥着关键作用，因此与多种疾病相关。细胞内磷酸化平衡受蛋白激酶和磷酸酶的调控。因此，这些调控蛋白已成为药物研发的潜在靶点。本研究采用体外磷酸酶活性测定法筛选蛋白酪氨酸磷酸酶（PTPs），以鉴定可被8-羟基-7-(6-磺基萘-2-基)重氮喹啉-5-磺酸（NSC-87877）抑制的PTPs。NSC-87877是SHP-1和SHP-2 PTPs的强效抑制剂。该抑制剂能够以剂量依赖的方式降低双特异性蛋白磷酸酶26（DUSP26）的磷酸酶活性。NSC-87877与DUSP26的动力学研究表明二者呈竞争性抑制关系。NSC-87877能够有效抑制DUSP26介导的丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）家族成员p38的去磷酸化。由于DUSP26参与间变性甲状腺癌（ATC）细胞的存活，NSC-87877可能是一种治疗ATC的潜在药物。[2]

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双特异性蛋白磷酸酶26（DUSP26）在高危神经母细胞瘤（NB）中过表达，并通过抑制p53功能导致化疗耐药。体外实验表明，DUSP26也能有效抑制p38 MAP激酶。我们假设抑制DUSP26会以p53和/或p38介导的方式减少NB细胞的生长。NSC-87877（8-羟基-7-[(6-磺基-2-萘基)偶氮]-5-喹啉磺酸）是一种新型DUSP26小分子抑制剂，可有效抑制NB细胞系的生长并诱导其凋亡。用靶向DUSP26的小发夹RNA（shRNA）处理NB细胞系，在体外和体内均表现出增殖缺陷。用NSC-87877处理NB细胞系导致p53磷酸化（Ser37和Ser46）和活化增加，下游p38效应蛋白（热休克蛋白27 (HSP27) 和MAP激酶活化蛋白激酶2 (MAPKAPK2)）活化增加，以及聚ADP核糖聚合酶/caspase-3裂解增加。用shRNA敲低p53表达和用SB203580（4-[4-(4-氟苯基)-2-(4-甲亚磺酰基苯基)-1H-咪唑-5-基]吡啶）抑制p38活性可部分逆转DUSP26抑制引起的细胞毒性。在肾脏受累的小鼠神经母细胞瘤（NB）模型中，NSC-87877 治疗可抑制肿瘤生长并增强 p53 和 p38 的活性。这些结果共同表明，通过激活 p53 和 p38 丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 肿瘤抑制通路，使用 NSC-87877 抑制 DUSP26 是诱导体外和体内 NB 细胞毒性的有效策略。[3] NSC-87877 二钠（CAS：56932-43-5）是一种强效且细胞渗透性良好的 SHP-1 和 SHP-2 抑制剂。它是研究这些磷酸酶在信号传导和疾病中作用的重要研究工具。

C19H11N3NA2O7S2

503.416

502.983

C, 45.33; H, 2.20; N, 8.35; Na, 9.13; O, 22.25; S, 12.74

56932-43-5

NSC-87877;56990-57-9

92576

Brown to black solid

5.478

189

1

10

2

33

857

0

S(C1C([H])=C(C(=C2C=1C([H])=C([H])C([H])=N2)O[H])/N=N/C1C([H])=C([H])C2C([H])=C(C([H])=C([H])C=2C=1[H])S(=O)(=O)[O-])(=O)(=O)[O-].[Na+].[Na+]

IFVGQKHFUZRWNA-UHFFFAOYSA-L

InChI=1S/C19H13N3O7S2.2Na/c23-19-16(10-17(31(27,28)29)15-2-1-7-20-18(15)19)22-21-13-5-3-12-9-14(30(24,25)26)6-4-11(12)8-13;;/h1-10,23H,(H,24,25,26)(H,27,28,29);;/q;2*+1/p-2

disodium;8-hydroxy-7-[(6-sulfonatonaphthalen-2-yl)diazenyl]quinoline-5-sulfonate

NSC87877 disodium; NSC 87877 disodium; 56932-43-5; NSC-87877 disodium; NSC87877; 8-Hydroxy-7-(6-sulfo-2-naphthylazo)-5-quinolinesulfonic acid disodium salt; Disodium 8-hydroxy-7-[(6-sulphonato-2-naphthyl)azo]quinoline-5-sulphonate; disodium;8-hydroxy-7-[(6-sulfonatonaphthalen-2-yl)diazenyl]quinoline-5-sulfonate; disodium 8-hydroxy-7-[(1E)-2-(6-sulfonatonaphthalen-2-yl)diazen-1-yl]quinoline-5-sulfonate; NAPHTHYLAZOXINE S; NSC 87877; NSC-87877; NSC.87877; NSC87877

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO: 100~125 mg/mL (198.6~248.3 mM)
Water: ~100 mg/mL (~198.6 mM)

2% DMSO+35% PEG 300+2% Tween 80+ddH2O: 6mg/mL 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。