| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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PRMT5 (Protein Arginine Methyltransferase 5) in cooperation with MTA (Methylthioadenosine).Biochemical potency: Estimated PRMT5·MTA Ki ≤ 300 femtomolar (fM) [1].
PRMT5 (protein arginine methyltransferase 5). Vopimetostat is a potent, selective, MTA-cooperative PRMT5 inhibitor. It selectively inhibits MTAP-deleted cancer cell lines. PRMT5 is a target in cancers with MTAP deficiency. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在同源细胞系中的效力和选择性：在 HAP1 MTAP 敲除细胞中，TNG462 表现出强效的抗增殖作用，其细胞活力 GI50 为 4 nM，并且在四对同源细胞系中对 MTAP 野生型细胞的平均选择性为 45 倍。在 HAP1 MTAP 敲除细胞的 SDMA（对称二甲基精氨酸）细胞内 Western 印迹 (ICW) 药效学 (PD) 检测中，TNG462 的 IC50 为 800 pM，IC90 为 8 nM，在 HAP1 MTAP 野生型细胞中 IC90 的选择性为 33 倍 [1]。
在更广泛的细胞系中的活性：在一个包含 179 个癌细胞系（代表多种谱系）的细胞系中，TNG462 对 MTAP 敲除细胞系的选择性中位数为 41 倍（相对于 MTAP 野生型细胞系）。在对四种MTAP同源细胞系（LU99、LN18、HCT116、HAP1）进行的为期7天的细胞活力测定中，该化合物对MTAP缺失细胞的平均GI50值为5 nM，对MTAP野生型细胞的平均选择性为44倍[1]。 细胞PRMT5热稳定性：在利用LN18 MTAP缺失癌细胞系进行的体外洗脱研究中，TNG462即使在从培养基中去除化合物72小时后，仍能赋予细胞PRMT5很强的热稳定性。该结果通过以下方法得到证实：用该化合物处理细胞1小时后立即进行检测；处理1小时后在洗脱72小时后进行检测；或连续处理72小时[1]。 选择性机制：对MTAP缺失细胞的选择性是由于MTA协同结合所致。化合物如TNG462与MTA（MTA在MTAP缺失细胞中表达升高）协同结合PRMT5，而非与SAM结合，从而选择性地抑制MTAP缺失细胞中的PRMT5[1]。 脱靶效应分析：TNG462在1 μM和10 μM浓度下针对39种甲基转移酶进行了活性分析，结果显示除PRMT5-MEP50外，对其他酶均无显著活性[1]。 生化分析表明，Vopimetostat对PRMT5具有强效且选择性的抑制作用。体外实验表明，Vopimetostat对MTAP缺失细胞具有选择性的抗增殖活性。该化合物对MTAP缺失癌细胞的选择性使其成为一种很有前景的研究工具。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
药效学 (PD) 活性：在 LU99 MTAP 基因敲除的非小细胞肺癌 (NSCLC) 异种移植模型中，一项为期 7 天的药代动力学/药效学 (PK/PD) 研究表明，口服 TNG462 可导致 SDMA 修饰蛋白水平呈剂量依赖性下降。TNG462 能够维持药效学反应的持久性，最长可达末次给药后 120 小时，而 TNG908 仅能维持 72 小时的药效学反应 [1]。
在 CDX 模型中的抗肿瘤疗效：在 LU99 MTAP 基因敲除的 NSCLC CDX 模型中，TNG462 以 30 mg/kg BID、60 mg/kg BID 或 120 mg/kg QD 的剂量给药均显示出强大的抗肿瘤活性，肿瘤生长抑制率 (TGI) 分别为 96%，肿瘤消退率分别为 66% 和 65%。在 LN18 MTAP 缺失型 GBM CDX 模型中，TNG462 也导致肿瘤消退 [1][2]。 对 PRMT5 抑制剂的再敏感性：在 OCI-LY19 MTAP 缺失型 DLBCL 异种移植模型中，肿瘤在对 TNG908 反应不完全后出现缓慢复发，将 TNG908 的剂量从 120 mg/kg BID 改为 60 mg/kg BID 的 TNG462 后，肿瘤再次立即消退，表明效力更强的 TNG462 恢复了对 PRMT5 抑制剂的敏感性 [1]。 PDX模型中的疗效：在22个MTAP基因敲除的患者来源异种移植（PDX）模型中（这些模型涵盖多种组织学类型，但由于胶质母细胞瘤无法穿透血脑屏障，故不包括胶质母细胞瘤），每日两次口服60 mg/kg的TNG462在所有模型中均表现出显著的抗肿瘤活性。其中45%的模型肿瘤生长抑制率（TGI）达到53-96%，55%的模型出现肿瘤缩小，包括一个非小细胞肺癌（NSCLC）PDX模型中观察到的完全缓解，且该缓解在停药后仍得以维持。该活性被描述为与组织学类型无关[1][2]。 联合治疗：TNG462已显示出与靶向治疗药物的协同作用。在一个MTAP基因敲除的NCI-H838 NSCLC CDX模型中，TNG462与MAT2A抑制剂（AGI-41998）联合使用。在其他模型中，TNG908（一种相关化合物）与阿贝西利（CDK4/6抑制剂）、索托拉西布（KRAS G12C抑制剂）联合用药，以及TNG462与奥希替尼（EGFR抑制剂）联合用药，均显示出增强的疗效[2]。 Vopimetostat在体内对MTAP缺陷型实体瘤显示出显著的抗肿瘤活性，包括持久的肿瘤消退和完全缓解。该化合物可口服，并已在临床前癌症模型中进行过研究。体内疗效支持其在癌症研究中的潜力。 |
| 酶活实验 |
酶活性恢复测定：为了确定TNG462的效力，我们采用了酶活性恢复测定。将H4肽浓度提高至10 μM以增强肽竞争。我们测量了TNG462从PRMT5:TNG462二元复合物中的解离情况。在5小时内未观察到酶活性进程曲线的非线性增长，表明TNG462的停留半衰期大于5小时。利用初始表观恢复速率，计算得出未添加MTA时的平均Ki值为2.9 ± 0.6 pM。添加MTA后，初始酶促反应速率降低，使得准确测量Ki值变得困难；因此，在MTA存在下，TNG462的Ki值估计≤300 fM [1]。
其他生化分析：无论是否存在MTA，TNG462的效力均低于荧光偏振肽置换法和放射性FlashPlate法的检测限。表面等离子共振(SPR)结合分析也尝试过，但由于TNG462解离速率慢以及对芯片上PRMT5酶复合物稳定性的担忧而失败[1]。 体外PRMT5抑制酶活性测定采用重组PRMT5酶和合适的肽底物，并在S-腺苷甲硫氨酸(SAM)存在下进行。将不同浓度的Vopimetostat与酶和底物孵育。甲基化通过放射性或荧光法检测。IC50值由剂量反应曲线计算得出。 |
| 细胞实验 |
HAP1 MTAP WT 和 MTAP-Null 细胞内蛋白质印迹 (ICW) 检测：使用 HAP1 MTAP 同源细胞系对。将细胞接种于 384 孔微孔板中，并用化合物处理 24 小时。然后使用多克隆抗体 SDMA 和 DRAQ5 测定标准化的 SDMA 水平。背景信号来自用 1 μM GSK3326595 处理的孔。数据分析采用四参数逻辑 (4-PL) Hill 方程，并将最大效应约束为 0。该分析确定了 SDMA 对 TNG462 在 HAP1 MTAP 缺失细胞中的 IC50 为 800 pM，IC90 为 8 nM [1]。
细胞系活力检测（7 天 CellTiter-Glo 法）：使用 HAP1、HCT116、LU99 和 LN18 MTAP 同源细胞系对。细胞系在含 10% FBS 的 DMEM（高糖）培养基中培养。化合物处理 7 天后，使用 CellTiter-Glo 法测定细胞活力。数据以DMSO对照孔的百分比表示，并使用四参数逻辑（4-PL）Hill方程进行拟合，最大效应或基线值约束为0。该检测确定TNG462在HAP1 MTAP缺失细胞中的存活GI50为4 nM，对MTAP野生型细胞的平均选择性为45倍[1]。 细胞PRMT5热稳定性检测：将LN18 MTAP缺失细胞在不同条件下用TNG462处理（处理1小时、处理1小时后洗脱72小时或连续处理72小时）。收集细胞，通过冻融循环裂解，并将上清液加热至57°C 3分钟。离心去除不溶性蛋白后，进行免疫印迹检测PRMT5。采用 Licor 分析工具包 [1] 进行密度测定。 179 种癌细胞系检测：使用 TNG462 在为期 7 天的 CellTiter-Glo 检测中对 180 种癌细胞系进行分析。效力以相对 IC50 值表示，该值由 4-PL Hill 方程计算得出。选择性通过绘制 TNG462 在 40 mM 浓度下的最大效应 (Amax) 来可视化，并根据曲线拟合结果进行分析。结果显示，对 MTAP 缺失细胞系的选择性中位数为 41 倍 [1]。 将细胞（例如，MTAP 缺失的癌细胞系）培养，并用浓度通常为 0.1–10 μM 的 Vopimetostat 处理 48–96 小时。通过 Western blot 检测对称性二甲基精氨酸 (SDMA) 水平来评估 PRMT5 抑制情况。细胞增殖和活力通过标准检测方法进行评估。细胞凋亡可通过 caspase 激活或 Annexin V 染色进行评估。 |
| 动物实验 |
LU99 CDX PK/PD 研究：将 LU99 癌细胞皮下注射到 6-8 周龄的雌性 BALB/c 裸鼠体内。当肿瘤体积达到约 300 mm³ 时，将小鼠随机分组。TNG462 配制成 5% DMA/20% Captisol 水溶液。采用灌胃法给药，剂量为耐受性良好的剂量（10、30 或 60 mg/kg，每日两次；或 120 mg/kg，每日一次）。以溶剂和 TNG908（120 mg/kg，每日两次）作为对照。给药 7 天后，分别在末次给药后 16、72 或 120 小时收集肿瘤组织，通过免疫印迹法分析 SDMA 的含量 [1]。
LU99 CDX 疗效研究：将 LU99 癌细胞皮下注射到 6-8 周龄的雌性 BALB/c 裸鼠体内。当肿瘤体积达到约 200 mm³ 时，将小鼠随机分组。TNG462 配制成 5% DMA/20% Captisol 水溶液，并以 30 mg/kg BID、60 mg/kg BID 或 120 mg/kg QD 的剂量进行口服给药，持续 21 天。每组 n=8 只小鼠 [1]。 OCI-LY19 DLBCL CDX 模型研究：将 OCI-LY19 癌细胞皮下注射到小鼠体内。当肿瘤可触及（约 125 mm³）时，将小鼠随机分组。TNG462（40 mg/kg BID）或 TNG908（120 mg/kg BID）进行口服给药。在转换组中，第 36 天将治疗方案从 120 mg/kg BID TNG908 改为 40 mg/kg BID TNG462。TNG462 用酸化水（pH 4-6）配制 [1]。 PDX 模型疗效研究：对于各种 MTAP 基因敲除的 PDX 模型，小鼠（每组/模型 n=3-5）口服给予 TNG462，剂量为 60 mg/kg BID。在一个肺（鳞状细胞癌）PDX模型中，TNG462以30或60 mg/kg的剂量每日两次给药，直至第76天，之后停止给药并观察小鼠至第140天。TNG462配制于5% DMA/20% Captisol或酸化水中，两种配方提供的暴露量相当[1][2]。 在MTAP缺失癌症的异种移植模型中进行了Vopimetostat的体内动物研究。该化合物通常以1-50 mg/kg的剂量口服给药。评估肿瘤生长抑制、肿瘤消退和生存率。采用小鼠PRMT5抑制剂研究的标准方案。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
体外代谢稳定性：TNG462在人肝微粒体中表现出良好的稳定性，清除率 (Clint) 为 16 μL min⁻¹ mg⁻¹ [1]。
比格犬体内药代动力学：静脉注射 1 mg/kg 后，清除率为 23 mL min⁻¹ kg⁻¹，分布容积 (Vdss) 为 21 L/kg，半衰期 (T1/2) 为 14 小时。口服 3 mg/kg 后，血药峰浓度 (Cmax) 为 0.064 μg/mL，AUCinf 为 1.19 h·μg/mL，生物利用度 (F) 为 52%。血浆蛋白结合率（游离药物百分比）为 26.8% [1]。 食蟹猴体内药代动力学：静脉注射 1 mg/kg 后，清除率为 20 mL min⁻¹ kg⁻¹，分布容积 (Vdss) 为 26 L/kg，半衰期 (T1/2) 为 20 小时。口服 3 mg/kg 后，血药峰浓度 (Cmax) 为 0.058 μg/mL，注射曲线下面积 (AUCinf) 为 0.727 h·μg/mL，生物利用度为 32%。血浆蛋白结合率（游离药物百分比）为 25.0% [1][2]。 预测的人体药代动力学：碱性胺驱动的较高分布容积 (Vdss) 导致预测的人体半衰期 >24 小时，这支持每日一次 (QD) 给药方案。采用每日一次给药方案的预测暴露量，其Cmax/Cmin比值小于2倍，可在谷浓度时覆盖MTAP缺失的GI90细胞，同时保持较低的Cmax以避免覆盖MTAP野生型细胞[1]。 Vopimetostat具有良好的口服生物利用度和药代动力学特性。其分子量为520.69，分子式为C28H36N6O2S。该化合物可溶于DMSO（100 mg/mL）。目前公开文献中尚未完全披露其体内药代动力学参数，例如半衰期、Cmax和AUC。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
hERG 活性测定：TNG462 在 hERG 细胞病变试验中的 IC50 值为 8.6 μM，比靶向 MTAP 缺失的 GI90 (11 nM) 的 IC50 值高出近 800 倍 [1]。
脱靶安全性评估：TNG462 在体外毒理学安全性评估（SAFETYscan E/IC50 检测 78 种已知的脱靶结合和功能性试验）中，浓度高达 10 μM，未发现任何值得关注的活性 [1]。 血浆蛋白结合率：在临床前动物模型中，犬的血浆蛋白结合率（未结合百分比）为 26.8%，食蟹猴为 25.0% [1]。 Vopimetostat 的毒理学数据仅限于临床前研究。该化合物仅供研究使用，尚未获准用于人类治疗。目前尚未发表系统的毒理学评价。应遵守处理化学抑制剂的标准安全预防措施。 |
| 参考文献 |
[1]. Discovery of TNG462: A Highly Potent and Selective MTA-Cooperative PRMT5 Inhibitor to Target Cancers with MTAP Deletion. J Med Chem. 2025 Mar 13;68(5):5097-5119.
[2]. TNG462 is a potential best-in-class MTA-cooperative PRMT5 inhibitor for the treatment of MTAP-deleted solid tumors. Cancer Research, 2023, 83(7_Supplement): 4970-4970. [3]. Piperidin-1- yl-n-pyrydi ne-3-yl-2-oxoacet am ide derivatives useful for the treatment of mtap-deficient and/or mt a-accumulating cancers. Patent WO2022026892A1. |
| 其他信息 |
背景：MTAP缺失发生于约10-15%的人类癌症中，为靶向治疗提供了庞大的患者群体。MTA协同PRMT5抑制剂，例如TNG462，通过选择性靶向MTAP缺失的癌细胞，提供了一种合成致死策略[1][2]。
作用机制(MOA)：TNG462与MTA协同结合PRMT5，MTA是一种在MTAP缺失细胞中积累的内源性代谢物。这种结合阻止PRMT5使用其辅因子SAM，从而抑制靶蛋白（例如参与剪接的蛋白）的二甲基化，最终导致MTAP缺失细胞死亡[1][2]。 临床状态：TNG462目前正在进行治疗MTAP缺失型癌症的I/II期临床试验（NCT05732831）[1]。 Vopimetostat（CAS：2760483-96-1，分子式C28H36N6O2S，分子量520.69）是一种口服有效的选择性PRMT5抑制剂。它与MTA协同作用，并选择性靶向MTAP缺失型癌症。它显示出显著的抗肿瘤活性，包括持久的肿瘤消退。该药物尚未进入临床试验，也未获得监管机构的批准。该化合物仅作为研究级抑制剂提供给实验室使用。 |
| 分子式 |
C28H36N6O2S
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|---|---|
| 分子量 |
520.689444541931
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| 精确质量 |
520.262
|
| 元素分析 |
C, 64.59; H, 6.97; N, 16.14; O, 6.15; S, 6.16
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| CAS号 |
2760483-96-1
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| PubChem CID |
164752829
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
4.3
|
| tPSA |
133
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
37
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| 分子复杂度/Complexity |
808
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| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
S1C2C=CC(=CC=2N=C1C1CCN(C)CC1)[C@H]1CC[C@H](C)CN1C(C(NC1C=NC(=C(CC)C=1)N)=O)=O
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| InChi Key |
DHAGMIPSRSPWSH-GAJHUEQPSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C28H36N6O2S/c1-4-18-13-21(15-30-25(18)29)31-26(35)28(36)34-16-17(2)5-7-23(34)20-6-8-24-22(14-20)32-27(37-24)19-9-11-33(3)12-10-19/h6,8,13-15,17,19,23H,4-5,7,9-12,16H2,1-3H3,(H2,29,30)(H,31,35)/t17-,23+/m0/s1
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| 化学名 |
N-(6-amino-5-ethylpyridin-3-yl)-2-[(2R,5S)-5-methyl-2-[2-(1-methylpiperidin-4-yl)-1,3-benzothiazol-5-yl]piperidin-1-yl]-2-oxoacetamide
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| 别名 |
TNG-462; TNG 462; Vopimetostat; TNG462; N-(6-Amino-5-ethylpyridin-3-yl)-2-((2R,5S)-5-methyl-2-(2-(1-methylpiperidin-4-yl)benzo[d]thiazol-5-yl)piperidin-1-yl)-2-oxoacetamide;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~192.05 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9205 mL | 9.6026 mL | 19.2053 mL | |
| 5 mM | 0.3841 mL | 1.9205 mL | 3.8411 mL | |
| 10 mM | 0.1921 mL | 0.9603 mL | 1.9205 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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