A-366

别名: A 366A-366 A366
目录号: V9842 纯度: ≥98%
A-366 (A366) 是一种新型、有效的肽竞争性组蛋白甲基转移酶 G9a 抑制剂,具有抗癌活性。
A-366 CAS号: 1527503-11-2
产品类别: Histone Methyltransferase
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
10mg
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50mg
100mg
250mg
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纯度: ≥98%

产品描述
A-366 (A366) 是一种新型、有效的肽竞争性组蛋白甲基转移酶 G9a 抑制剂,具有抗癌活性。它抑制 G9a 的 IC50 为 3 nM,选择性比其他甲基转移酶和其他非表观遗传靶标高 100 倍以上。 A-366 已被证明可以抑制细胞中的 H3K9 甲基化,IC50 为 100 nM,并且与之前的基于喹唑啉的探针相比,其细胞毒性最小。 A-366 选择性抑制 G9a 和密切相关的 GLP (EHMT1),但不抑制其他组蛋白甲基转移酶。与其他已知的 G9a/GLP 小分子抑制剂相比,A-366 对肿瘤细胞系生长的细胞毒性作用明显较低,尽管对 H3K9me2 甲基化的细胞活性相当。
生物活性&实验参考方法
体外研究 (In Vitro)
A-366(0.01-10 μM;14 天)影响 MV4;11 细胞的活力并导致分化 [4]。在 PC-3 前列腺癌细胞中,A-366(0.3-3 μM;72 小时)以浓度和时间依赖性方式降低总体 H3K9me2 水平,细胞 EC50 约为 300 nM。 A-366(0.01-10 μM;4 天;HL-60 细胞)以剂量依赖性方式减少分化和伴随的增殖。 A-366 处理的 HL-60 细胞的 DNA 含量分析显示 G1 期细胞增加,这与细胞停滞一致 [4]。
体内研究 (In Vivo)
当 MV4;11 异种移植物用 A-366(30 mg/kg;渗透微型泵;每天一次,持续 14 天)处理时,会发生生长抑制 [4]。
细胞实验
细胞活力测定 [4]
细胞类型: MV4; 11 个细胞
测试浓度: 0.01-10 μM
孵育时间: 14 天
实验结果: 产生抑制增殖和活力降低,与 CD11b 染色观察到的剂量反应相对应。
动物实验
Animal/Disease Models: 6-8 weeks old SCID beige female mice (MV4; 11 xenografts) [4]
Doses: 30 mg/kg
Route of Administration: via mini-osmotic pump; one time/day for 14 days
Experimental Results: In In the model, A-366 treatment produced a modest 45% tumor growth inhibition.
参考文献

[1]. Epigenetics meets GPCR: inhibition of histone H3 methyltransferase (G9a) and histamine H3 receptor for Prader-Willi Syndrome. Sci Rep. 2020;10(1):13558. Published 2020 Aug 11.

[2]. Identification of a small-molecule ligand of the epigenetic reader protein Spindlin1 via a versatile screening platform. Nucleic Acids Res. 2016;44(9):e88.

[3]. Discovery and development of potent and selective inhibitors of histone methyltransferase g9a. ACS Med Chem Lett. 2014;5(2):205-209. Published 2014 Jan 2.

[4]. The Histone Methyltransferase Inhibitor A-366 Uncovers a Role for G9a/GLP in the Epigenetics of Leukemia. PLoS One. 2015;10(7):e0131716. Published 2015 Jul 6.

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C19H27N3O2
分子量
329.4366
精确质量
329.21
CAS号
1527503-11-2
PubChem CID
76285486
外观&性状
Light yellow to yellow solid powder
LogP
3.057
tPSA
60.08
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
4
可旋转键数目(RBC)
6
重原子数目
24
分子复杂度/Complexity
471
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
BKCDJTRMYWSXMC-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C19H27N3O2/c1-23-16-12-14-15(21-18(20)19(14)6-4-7-19)13-17(16)24-11-5-10-22-8-2-3-9-22/h12-13H,2-11H2,1H3,(H2,20,21)
化学名
5'-methoxy-6'-(3-(pyrrolidin-1-yl)propoxy)spiro[cyclobutane-1,3'-indol]-2'-amine
别名
A 366A-366 A366
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~50 mg/mL (~151.77 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.59 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.59 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.0355 mL 15.1773 mL 30.3545 mL
5 mM 0.6071 mL 3.0355 mL 6.0709 mL
10 mM 0.3035 mL 1.5177 mL 3.0355 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片
  • Screening for selectivity of G9a-inhibitors at 1 µM among dopamine D1, D5, D2 and D3 receptors (D1R, D5R, D2R, D3R, respectively) and at the histamine H4 receptor (H4R). For comparison, the figure depicts the inhibition of specific binding to H3R that was extracted from affinity screening data. Bars represent means ± s.d. of the inhibition of radioligand binding to the respective receptor by either A-366, UNC-0642 or control compound (100 µM fluphenazine for D1R and D5R, 10 µM haloperidol for D2R and D3R, 100 µM JNJ-7777120 for H4R or 10 µM pitolisant for H3R).[3H]-SCH23390, [3H]-spiperone, [3H]-histamine and [3H]Nα-methylhistamine were used as radiolabelled tracers at D1R/D5R, D2R/D3R, H4R and H3R, respectively, each at approx. 1 × KD.[1].Reiner D, et al. Epigenetics meets GPCR: inhibition of histone H3 methyltransferase (G9a) and histamine H3 receptor for Prader-Willi Syndrome. Sci Rep. 2020;10(1):13558. Published 2020 Aug 11.
  • Schild-assay revealing antagonist properties of A-366 at rat isoform of H3R. (a) Effects of the H3R agonist Nα-methylhistamine on formation of cAMP concentrations were studied in a cAMP response element-driven luciferase reporter gene (CRE-Luc) assay in HEK-293 T cells that were stably transfected with the receptor as described by Nordemann et al.44,45 Evaluated data originated from two independent experiments performed in duplicate and are stated as means ± s.d. (b) Data from panel a were transformed to a Schild-plot that resulted in a regression of R2 = 0.91 (black line, with 95% confidence band depicted with small dots). The slope was not different from unity (grey line).[1].Reiner D, et al. Epigenetics meets GPCR: inhibition of histone H3 methyltransferase (G9a) and histamine H3 receptor for Prader-Willi Syndrome. Sci Rep. 2020;10(1):13558. Published 2020 Aug 11.
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