| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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描述： A839977 (A-839977) 是一种新型高效的 P2X7 受体拮抗剂，具有抗痛觉过敏和抗炎活性。促炎细胞因子白细胞介素-1β (IL-1β) 与炎症过程和伤害性神经传递均密切相关。ATP 激活 P2X7 受体是刺激巨噬细胞和小胶质细胞快速成熟并释放 IL-1β 的机制。最近的研究表明，选择性 P2X7 受体拮抗剂能够减轻动物模型中的炎症性和神经性疼痛。
A-839977 是一种高效、选择性且具有竞争性的 P2X7 受体拮抗剂，P2X7 受体是一种配体门控离子通道，参与炎症性和神经性疼痛的发生发展。该化合物在不同物种中均表现出高效性，在钙离子流测定中，其对人受体的IC50值为20 nM，对大鼠受体的IC50值为42 nM，对小鼠受体的IC50值为150 nM。A-839977还能有效阻断下游P2X7介导的功能，抑制分化的人THP-1细胞中BzATP刺激的IL-1β释放（IC50 = 37 nM）和YO-PRO染料摄取（IC50 = 7 nM），证实了其靶向活性。体内实验表明，A-839977能够穿透血脑屏障（脑血浆浓度比为0.15–0.25），并在炎症性疼痛动物模型（例如CFA诱导的疼痛）中产生剂量依赖性的抗痛觉过敏作用，小鼠腹腔注射ED50值为40 μmol/kg，大鼠腹腔注射ED50值为100 μmol/kg。在IL-1αβ基因敲除小鼠中，A-839977的镇痛作用消失，表明其作用机制依赖于IL-1信号通路。在癌症诱导骨痛的大鼠模型中，脊髓内注射A-839977（0.4–1.2 mg/kg）可降低神经元对高强度机械和热刺激的反应，而全身给药（40 mg/kg，腹腔注射）则可缓解早期和晚期疼痛行为，且不影响运动协调性。A-839977是研究P2X7受体在疼痛和神经炎症中功能的重要工具。| 靶点 |
P2X7 receptor – IC50 = 20 nM (human P2X7, calcium influx); IC50 = 42 nM (rat P2X7, calcium influx); IC50 = 150 nM (mouse P2X7, calcium influx); IC50 = 37 nM (BzATP-stimulated IL-1β release in differentiated human THP-1 cells); IC50 = 7 nM (BzATP-stimulated YO-PRO uptake in differentiated human THP-1 cells); pIC50 = 7.67 ± 0.04 (human), 7.36 ± 0.02 (rat), 6.83 ± 0.03 (mouse) [1]; pA2 = 8.1 (competitive antagonist) [1]
A-839977 is a selective P2X7 receptor antagonist. It potently blocks human (IC50 = 20 nM), rat (IC50 = 42 nM), and mouse (IC50 = 150 nM) P2X7 receptors. [1] It also blocks BzATP-stimulated IL-1β release (IC50 = 37 nM) and YO-PRO uptake (IC50 = 7 nM) in differentiated human THP-1 cells. [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验：A-839977 能有效阻断 BzATP 诱导的稳定表达人（IC50 = 20 nM）、大鼠（IC50 = 42 nM）或小鼠（IC50 = 150 nM）P2X7 受体的 1321N1 细胞内钙离子浓度的变化。[1]
A-839977 能有效阻断 BzATP 刺激的分化人 THP-1 细胞中 IL-1β 的释放（IC50 = 37 nM）和 YO-PRO 的摄取（IC50 = 7 nM）。[1] A-839977 使 BzATP 浓度-效应钙离子内流曲线平行右移，pA2 值为 8.1，表明其具有竞争性拮抗作用。 [1] 在培养的大鼠视神经乳头星形胶质细胞中，A-839977 (50 nM) 可抑制肿胀诱导的 IL-1β mRNA 上调。[2] 在培养的小鼠视神经乳头星形胶质细胞中，A-839977 (100 nM) 可降低肿胀触发的 IκBα 减少，表明其抑制了 NFκB 的激活。[2] A-839977 可特异性地抑制分化的人 THP-1 细胞中激动剂诱导的 YO-PRO 摄取和 IL-1β 释放，其机制是通过抑制哺乳动物 P2X7 受体上 BzATP 诱导的钙离子内流 (IC50=20-150 nM)。动物研究表明，A-839977 可减轻神经性疼痛和炎症。[1]在视神经星形胶质细胞中，839977（50 nM，预处理 1 小时）可有效抑制应激诱导的 IL-1β 起始水平升高 [2]。在稳定表达人、大鼠或小鼠 P2X7 受体的 1321N1 人星形胶质瘤细胞中，A-839977 可强效阻断 BzATP 诱导的细胞内钙离子浓度变化（人 IC50 = 20 nM，大鼠 IC50 = 42 nM，小鼠 IC50 = 150 nM）[1]。在分化的 THP-1 人细胞中，A-839977 可强效阻断 BzATP 刺激的 IL-1β 释放（IC50 = 37 nM）和 YO-PRO 摄取（IC50 = 7 nM），这些都是 P2X7 受体激活的功能性后果。 [1] 在原代大鼠视神经乳头星形胶质细胞中，A-839977 (50 nM) 显著抑制了由 30% 低渗溶液中 4 小时肿胀诱导的机械敏感性 IL-1β 启动（mRNA 上调）。A-839977 阻断了 IL-1β 的升高。[2] 在原代小鼠视神经乳头星形胶质细胞中，与 C57Bl/6J 小鼠相比，P2X7-/- 小鼠细胞中肿胀诱导的 IL-1β mRNA 升高显著降低。P2X7 受体拮抗剂 A-839977 (100 nM) 也降低了肿胀触发的 IκB-α 蛋白表达的降低，IκB-α 蛋白表达是 NFκB 激活的指标。 [2] 在荷瘤大鼠的脊髓样本中，Western blot分析显示，与假手术组或未手术组相比，术后第3、7、10和14天P2X7受体表达无显著变化，尽管在第10天观察到表达有增加的趋势。[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
体内实验：在大鼠骨痛模型（胫骨内注射MRMT-1癌细胞）中，脊髓内注射A-839977（0.4和1.2 mg/kg）可显著降低脊髓背角神经元对高强度机械刺激（26g和60g）和高强度热刺激（48°C）的反应，且呈剂量依赖性。对低强度刺激或假手术/未处理动物的反应未观察到任何影响。[3] 在同一模型中，腹腔注射A-839977（40 mg/kg）可显著提高荷瘤动物的机械缩足阈值（von Frey测试），而假手术动物或载体处理组未观察到任何影响。更高剂量（120 mg/kg）则显示出毒性作用。 [3]
在疾病晚期，A-839977（40 mg/kg，腹腔注射）显著提高了荷瘤动物的负重比（失能测试）和肢体使用评分，而载体处理组无此效果。[3] 在转棒测试中，A-839977（40 mg/kg，腹腔注射）对未接受过任何处理的大鼠的运动协调性没有影响。[3] 在CFA诱导的炎症性疼痛小鼠模型中，A-839977呈剂量依赖性地降低了热痛觉过敏（小鼠ED50 = 40 μmol/kg，腹腔注射；大鼠ED50 = 100 μmol/kg，腹腔注射）。在IL-1αβ基因敲除小鼠中，这种抗痛觉过敏作用消失。 [1]在大鼠中，测试前30分钟腹腔注射A-839977（30 mg/kg）可减轻CFA诱导的热痛觉过敏。[1]在视网膜机械应变小鼠模型（控制性眼压升高）中，体外50 nM的A-839977或通过P2X7基因敲除可阻止IL-1β mRNA和蛋白的上调。[2]在大鼠中，足底注射完全弗氏佐剂（CFA）后，预先注射A-839977（30 μmol/kg、100 μmol/kg、300 μmol/kg）可剂量依赖性地降低热痛觉过敏[1]。在野生型小鼠的CFA诱导的炎症性疼痛模型中，A839977（10 μmol/kg、30 μmol/kg和100 μmol/kg；预注射30分钟）对疼痛有显著影响，而IL-1αβ基因敲除小鼠则无显著影响。大鼠无效[1]。在癌症动物模型中，A839977可降低脊髓背角神经元的反应[3]。在CFA诱导的炎症性疼痛大鼠模型中，腹腔注射A-839977可剂量依赖性地降低热痛觉过敏（ED50 = 100 μmol/kg），最高剂量组的抑制率为65.2 ± 4.7%。A-839977对对侧非炎症爪无影响，表明其具有特异性的抗痛觉过敏作用。 [1] 在 CFA 诱导的炎症性疼痛小鼠模型中，腹腔注射 A-839977 可剂量依赖性地降低野生型小鼠的热痛觉过敏（ED50 = 40 μmol/kg，最高剂量下抑制率为 68.4 ± 8.3%）。然而，这种抗痛觉过敏作用在 IL-1αβ 基因敲除小鼠中完全消失。[1] 在癌症诱导的骨痛大鼠模型（MRMT-1 细胞接种）中，脊髓内注射 A-839977（0.4 和 1.2 mg/kg）可剂量依赖性地降低脊髓背角宽动态范围 (WDR) 神经元对高强度机械刺激（26g 和 60g）和热刺激（48°C）的反应。对低强度刺激或电刺激的反应未见影响。拮抗剂对假手术组或未接受任何处理的动物的神经元反应没有影响。[3] 在同一癌症诱导的骨痛模型中，全身性注射A-839977（40 mg/kg，腹腔注射）显著提高了荷瘤动物的机械性缩足阈值（von Frey 测试），表明机械性痛觉过敏降低。它还显著改善了负重比和肢体使用评分，表明运动诱发和非诱发性疼痛均得到缓解。在假手术组或载体处理组动物中未观察到任何效果。[3] |
| 酶活实验 |
酶活性测定：钙离子内流 FLIPR 测定：将稳定表达 P2X7 受体的 1321N1 细胞接种于聚赖氨酸包被的黑色 96 孔板中，并用 Fluo-4 染料染色。洗涤后，在加入激动剂前，用 A-839977 孵育细胞 3 分钟。使用 EC70 浓度的 BzATP（小鼠：150 μM，大鼠：10 μM，人：5 μM）作为激动剂。测量荧光强度 3 分钟。计算 IC50 值。[1]
YO-PRO 摄取测定：将分化的 THP-1 人细胞接种于孔板中，并用 A-839977 预孵育 30 分钟。加入 BzATP (90 mM)，并测量 YO-PRO 摄取 1 小时。 [1] IL-1β 释放测定：将分化的人类 THP-1 细胞用 LPS (25 ng/ml) 和 IFNγ (10 ng/ml) 预处理 3 小时。在 BzATP (1 mM) 刺激前 30 分钟加入 A-839977。采用 ELISA 法测定上清液中 IL-1β 的水平。[1] 采用钙离子内流测定法测定 A-839977 对 P2X7 受体的拮抗活性。将表达重组人、大鼠或小鼠 P2X7 受体的 1321N1 细胞用钙螯合染料进行标记。测定拮抗活性时，将测试化合物加入细胞培养板中，并在加入激动剂（BzATP，浓度为其针对各物种的近似 EC70 浓度）前 3 分钟收集荧光数据。然后在加入激动剂后继续收集 2 分钟的荧光数据。通过分析浓度-反应数据得出pIC50值。[1] 使用YO-PRO摄取实验评估A-839977对P2X7受体介导的孔道形成的影响。将细胞（重组P2X7-1321N1细胞或分化的THP-1细胞）暴露于YO-PRO染料。加入不同浓度的拮抗剂后，加入EC70浓度的BzATP以激活受体。通过记录荧光强度随时间的变化来观察YO-PRO染料的摄取情况（前10分钟每15秒记录一次，之后50分钟每20秒记录一次）。将最大荧光强度的百分比与单独使用BzATP诱导的荧光强度进行标准化，以计算IC50值。 [1] 在IL-1β释放测定中，将分化的THP-1细胞与A-839977在37°C下孵育30分钟，随后加入1 mM BzATP继续孵育30分钟。收集上清液，并通过ELISA检测成熟IL-1β的存在。从BzATP诱导的释放量中减去对照细胞的背景IL-1β释放量。[1] |
| 细胞实验 |
细胞实验：稳定表达小鼠、大鼠或人P2X7受体的1321N1人星形胶质瘤细胞培养于含1% L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、1%抗生素/抗真菌剂、10%胎牛血清（FBS）和300 μg/ml遗传霉素的DMEM培养基中。钙离子内流实验中，细胞以5 × 10⁶个/皿的密度接种。[1]
THP-1人单核细胞用LPS（25 ng/ml）和IFNγ（10 ng/ml）处理3小时（IL-1β释放）或过夜（成孔）诱导分化为巨噬细胞表型。细胞培养于含10%胎牛血清的RPMI培养基中。 [1] 大鼠视神经乳头星形胶质细胞：从新生大鼠幼崽（PD3-5）中分离原代星形胶质细胞，并在含10%胎牛血清（FBS）、1%青霉素/链霉素和25 ng/ml表皮生长因子（EGF）的DMEM/F12培养基中培养。GFAP染色显示细胞中星形胶质细胞含量>99%。在肿胀实验中，将细胞在30%低渗溶液中孵育4小时。在肿胀实验前1小时加入A-839977（50 nM）。[2] 小鼠视神经乳头星形胶质细胞：从3月龄C57BL/6J和P2X7-/-小鼠中分离。培养方法与大鼠星形胶质细胞类似。使用A-839977（100 nM）。 [2] RT-PCR[2] 细胞类型： 视神经星形胶质细胞 测试浓度： 50 nM 孵育时间： 1 小时（预处理） 实验结果： 抑制星形胶质细胞中 IL-1β 的启动 在钙离子内流测定中，将稳定表达小鼠、大鼠或人 P2X7 受体的 1321N1 人星形胶质瘤细胞以每孔 5×10^6 个细胞的浓度接种于聚赖氨酸包被的黑色 96 孔板上。细胞用钙螯合染料孵育至少 1 小时，但不超过 3 小时。去除未结合的染料后，使用荧光成像板读数仪记录加入激动剂后 3 分钟内细胞内 Ca2+ 浓度的变化。对于拮抗剂活性测定，在激动剂（BzATP）加入前3分钟加入化合物。[1] 对于YO-PRO摄取测定，将细胞（重组P2X7-1321N1细胞或分化的THP-1细胞）以1×10⁶个细胞/孔的密度接种于聚赖氨酸包被的黑色96孔板中。将YO-PRO染料稀释至终浓度为2 μM，并在加入激动剂前立即加入细胞中。使用荧光成像板读数仪，通过记录荧光强度随时间的变化（前10分钟每15秒记录一次，之后50分钟每20秒记录一次）来评估激动剂诱导的孔形成。 [1] 在IL-1β释放实验中，使用LPS（25 ng/ml）和IFNγ（10 ng/ml）诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞表型，持续3小时。分化后的细胞与A-839977在37°C下孵育30分钟，随后用1 mM BzATP刺激30分钟。收集上清液，并通过ELISA法定量成熟的IL-1β。[1] 在原代大鼠视神经乳头星形胶质细胞实验中，将细胞培养至汇合，然后在30%低渗溶液中孵育4小时使其肿胀，或使用真空操作张力系统进行周期性拉伸（0.3 Hz，16%应变，持续4小时）。处理后立即提取RNA，并使用qPCR检测IL-1β和其他炎症小体基因的表达。在应用测试溶液前，细胞用A-839977（50 nM）预处理1小时。[2] 对于免疫印迹实验，将完整的视网膜或培养的星形胶质细胞在RIPA缓冲液中裂解。蛋白质样品经SDS-PAGE分离后转移至PVDF膜。印迹膜用针对IL-1β、IκB-α或β-actin的一抗进行孵育，随后用HRP标记的二抗进行孵育。采用化学发光法进行检测。[2] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性SD（SD（Sprague-Dawley））、balb/c（Bagg ALBino）小鼠和IL-1（−/−）小鼠，用于CFA诱导的慢性炎症。剂量：30 μmol/kg、100 μmol/kg、300 μmol/kg（大鼠）；10 μmol/kg、30 μmol/kg、100 μmol/kg（小鼠）
给药途径：注射；注射前30分钟 实验结果： 在大鼠和小鼠中，A-839977以剂量依赖的方式减弱了CFA诱导的热痛觉过敏，但对IL-1(−/−)小鼠无影响。 在大鼠CFA诱导的热痛觉过敏模型中，通过在右后爪足底注射150 μl 50% CFA溶液诱导单侧炎症。A-839977溶解于30% NMP、30% PEG400和40%羟丙基-β-环糊精的混合溶液中，并在CFA注射后48小时进行测试前30分钟腹腔注射(ip)。 [1] 在小鼠完全弗氏佐剂（CFA）模型中，通过将25 μl 50% CFA溶液注射到右后爪足底诱导单侧炎症。A-839977用相同溶剂配制，并在CFA注射后48小时，即测试前30分钟腹腔注射。[1] 对于大鼠癌症诱导骨痛模型（电生理学），将3×10^3个MRMT-1癌细胞接种到雄性Sprague-Dawley大鼠胫骨髓腔内。接种后12-16天进行电生理记录。A-839977每日溶解于10% DMSO、10% ChromEL和无菌生理盐水中，并以0.2、0.4或1.2 mg/kg的剂量直接注射到脊髓。 [3] 在癌症诱导骨痛模型的行为学实验中，将5×10³个MRMT-1细胞注射到大鼠体内。使用von Frey纤维（上下法）评估机械痛觉过敏。使用负重测试仪测量负重能力，并根据0至3分的评分标准评估肢体使用情况。将A-839977溶解于30% NMP、30% PEG400和40%羟丙基-β-环糊精的混合溶液中，并以40 mg/kg的剂量腹腔注射（或120 mg/kg，后者显示出明显的毒性作用）。给药后10-15分钟进行行为学测试。使用转棒测试（5分钟内从3.5 rpm加速至35 rpm）评估生理盐水、溶剂或药物给药后未接受任何处理的动物的运动协调性。 [3] 在大鼠和小鼠的控制性眼压升高 (CEI) 模型中，单侧眼压升高至 50-60 mmHg，持续 4 小时。在一些大鼠实验中，该模型未在体内使用 P2X7 受体拮抗剂 A-839977，而是使用了相关的拮抗剂 BBG。在体外，A-839977 (50 nM) 用于分离的星形胶质细胞。[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
A-839977 可穿透中枢神经系统，其脑/脊髓与血浆浓度比为 0.15-0.25。[1][3]
在体内电生理实验中，A-839977 每日溶解于 10% DMSO、10% ChromEL 和无菌生理盐水中。[3] 在行为学研究中，A-839977 溶解于 30% NMP、30% PEG400 和 40% 羟丙基-β-环糊精中。[3] A-839977 能够穿透中枢神经系统 (CNS)。其脑/脊髓与血浆浓度比为 0.15-0.25。[1] A-839977 可穿透中枢神经系统，其脑/脊髓与血浆浓度比为 0.15-0.25。 [3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
毒性/毒代动力学：在癌症诱导的骨痛模型中，腹腔注射120 mg/kg A-839977 显示出明显的毒性作用，因此未进行进一步测试。40 mg/kg 剂量耐受性良好，未观察到运动协调障碍。[3] 在完全弗氏佐剂（CFA）诱导的炎症性疼痛模型中，有效剂量的 A-839977 未引起任何明显的行为紊乱。[1]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
A-839977 (1-(2,3-二氯苯基)-N-(2-(吡啶-2-氧基)苄基)-1H-四唑-5-胺) 是一种强效、选择性、竞争性 P2X7 受体拮抗剂，源自一系列四唑类化合物。它能穿透血脑屏障，已被用于证明 P2X7 受体拮抗作用在炎症和癌症引起的骨痛模型中具有镇痛作用。A-839977 的抗痛觉过敏作用是通过阻断 IL-1β 的释放实现的，因为在 IL-1αβ 基因敲除小鼠中，这种作用消失。A-839977 还被用于研究 P2X7 受体在机械应力后星形胶质细胞炎症小体启动中的作用。 [1][2][3]
在小鼠炎症性疼痛模型中，A-839977的抗痛觉过敏作用是通过阻断IL-1β的释放实现的，因为在IL-1αβ基因敲除小鼠中，其作用消失。[1] A-839977是一种结构新颖的P2X7受体拮抗剂，源自一系列高效、选择性和竞争性P2X7受体拮抗剂。它使BzATP浓度-效应钙离子内流曲线平行右移，pA2值为8.1。[1] P2X7受体是IL-1加工和释放的关键参与者，ATP激活P2X7受体可刺激巨噬细胞和小胶质细胞快速成熟并释放IL-1β。A-839977可阻断这一过程。 [1] 在机械应变模型（眼压升高）中，P2X7 受体参与 NLRP3 炎症小体的机械敏感性启动，导致 IL-1β 表达增加。A-839977 被用作阻断该通路的工具。[2] A-839977 在癌症引起的骨痛中的镇痛作用具有状态依赖性，因为它能降低荷瘤动物的伤害性感受反应，但对假手术组或未接受治疗的动物无效。这表明，与传统镇痛药相比，P2X7 受体可能是一个更具疾病特异性的靶点。[3] |
| 分子式 |
C19H14CL2N6O
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|---|---|
| 分子量 |
413.260060787201
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| 精确质量 |
412.061
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| 元素分析 |
C, 55.22; H, 3.41; Cl, 17.16; N, 20.34; O, 3.87
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| CAS号 |
870061-27-1
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| PubChem CID |
53325875
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
4.19
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| tPSA |
80.98
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
28
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| 分子复杂度/Complexity |
489
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
ClC1C(Cl)=C(N2C(NCC3C(OC4C=CC=CN=4)=CC=CC=3)=NN=N2)C=CC=1
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| InChi Key |
GMVNBKZQJFRFAR-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H14Cl2N6O/c20-14-7-5-8-15(18(14)21)27-19(24-25-26-27)23-12-13-6-1-2-9-16(13)28-17-10-3-4-11-22-17/h1-11H,12H2,(H,23,24,26)
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| 化学名 |
1-(2,3-dichlorophenyl)-N-{[2-(pyridin-2-yloxy)phenyl]methyl}-1H-1,2,3,4-tetrazol-5-amine
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| 别名 |
A839977; A-839977; A-839,977; A839,977; 1-(2,3-dichlorophenyl)-N-{[2-(pyridin-2-yloxy)phenyl]methyl}-1H-1,2,3,4-tetrazol-5-amine; 1-(2,3-dichlorophenyl)-N-((2-(pyridin-2-yloxy)phenyl)methyl)-1H-1,2,3,4-tetrazol-5-amine; 870061-27-1; A 839977
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~241.98 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (6.05 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4198 mL | 12.0989 mL | 24.1978 mL | |
| 5 mM | 0.4840 mL | 2.4198 mL | 4.8396 mL | |
| 10 mM | 0.2420 mL | 1.2099 mL | 2.4198 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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