| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 25mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MDM2 (IC50 = 3.8 nM; Ki = 1 nM); Alrizomadlin targets the mouse double minute 2 (MDM2) protein, also known as HDM2 in humans. MDM2 is a negative regulator of the p53 tumor suppressor pathway and is often overexpressed in cancer cells. Alrizomadlin binds to MDM2 with high affinity, exhibiting an IC50 (half-maximal inhibitory concentration) of 3.8 ± 1.1 nM and a Ki (dissociation constant of binding affinity) of less than 1 nM. By binding to MDM2, alrizomadlin blocks the interaction between MDM2 and p53, thereby preventing MDM2-mediated ubiquitination and proteasomal degradation of p53.
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| 体外研究 (In Vitro) |
Alrizomadlin 在 TP53 野生型癌细胞系中表现出显著的剂量依赖性抗增殖作用。在 TP53 野生型急性髓系白血病细胞系中，alrizomadlin 对 MOLM-13 细胞的 IC50 为 26.8 nM，对 MV-4-11 细胞为 165.9 nM，对 OCI-AML-3 细胞为 315.6 nM。在葡萄膜黑色素瘤细胞系中，alrizomadlin 表现出中等的生长抑制效应，IC50 范围为 0.151 至 1.857 µM。机制上，alrizomadlin 阻断 MDM2-p53 相互作用，导致 p53 蛋白水平升高、下游 p21 表达上调，并以 p53 依赖性方式诱导 G0/G1 期细胞周期阻滞和细胞凋亡。在 1 µM 浓度下，alrizomadlin 可诱导高达 96.8% 的 MOLM-13 细胞发生凋亡。Alrizomadlin 还通过下调抗凋亡蛋白 MCL-1 和 BCL-xL 以及上调促凋亡蛋白 BAX，使癌细胞对 BCL-2 抑制诱导的凋亡更敏感。当与 BCL-2 抑制剂 lisaftoclax 联用时，alrizomadlin 在 TP53 野生型 AML 细胞系中表现出协同的抗增殖和促凋亡活性。
alrizomadlin（0.001-100 μM；72 小时）具有浓度依赖性效应，可抑制 AGS 和 MKN45 细胞的细胞增殖，IC50 分别为 18.9 ± 15.6 nM 和 103.5 ± 18.3 nM [3]。为了改善不同辐射剂量下的照射效果，在 G0/G1 期 48 小时，通过野生型 p53 [3] 诱导 alrizomadlin（0.02 μM，0.2 μM；Alrizomadlin（0.02 μM，0.2 μM；48）） AGS 和 MKN45 细胞。对缺血的影响[3]。在 AGS 和 MKN45 细胞中，alrizomadlin（0.02 μM、0.2 μM；24 小时）激活 p53 以改善放射方向；稳定的 p53 敲低可去除 MDM2、p53、p21、PUMA、BAX、在 p53 宽细胞系（TPC-1、KTC-1）中，alrizomadlin（0.3 μM、1 μM、3 μM、10 μM；24 小时）诱导 G2/M 期的产生聚焦细胞周期标记物 γH2AX [3]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在葡萄膜黑色素瘤异种移植模型（MP41）中，口服 alrizomadlin 在 25、50 和 100 mg/kg 剂量下诱导剂量依赖性抗肿瘤活性，肿瘤生长抑制率分别为 24.8%、38% 和 39.1%。Alrizomadlin 与 MEK 抑制剂 selumetinib 或 FAK 抑制剂 APG-2449 的联合治疗产生协同抗肿瘤效应，TGI 率分别为 65.4% 和 47.5%。机制上，alrizomadlin 增加肿瘤组织中 p53、MDM2 和 p21 的表达，同时抑制 ERK 磷酸化。在 AML 细胞来源和患者来源的异种移植模型中，alrizomadlin 与 lisaftoclax 的联合使用产生深度抗肿瘤反应并延长生存期，且该组合还能使 venetoclax 耐药肿瘤重新对凋亡敏感。在一项晚期实体瘤患者的 I 期临床试验中，alrizomadlin 显示出良好的抗肿瘤活性，特别是在 MDM2 扩增且 TP53 野生型的患者中，客观缓解率为 25%（2/8），疾病控制率为 100%（8/8）。
alrizomadlin（口服制剂；100 mg/kg；每天一次；10 天）可改善腺癌肿瘤的体内放射抗性[3]。 |
| 酶活实验 |
Alrizomadlin 对 MDM2 的结合亲和力通过生化结合实验测定。Alrizomadlin 对 MDM2 的 IC50 值为 3.8 ± 1.1 nM，Ki 值小于 1 nM。这些数值表明 alrizomadlin 与 MDM2 蛋白具有高亲和力结合，可有效阻断 MDM2-p53 相互作用。现有文献中未详细说明具体的实验形式（如荧光偏振、时间分辨荧光共振能量转移或表面等离子体共振）。
基于荧光增殖（FP）的蛋白质结合测定[5] 使用重组人His标记的MDM2蛋白（残基1-118）和FAM标记的基于p53的肽作为荧光探针，通过优化、灵敏和定量的基于FP的结合测定来确定MDM2抑制剂的结合亲和力。荧光探针的设计基于先前报道的基于p53的高亲和力拟肽化合物（5-FAM-βAla-βAla-Phe-Met-Aib-pTyr-（6-Cl-LTrp）-Glu-Ac3c-Leu-Asn-NH2）。31该标记肽被命名为PMDM6-F。通过监测由固定浓度的荧光探针和浓度增加至完全饱和的MDM2蛋白组成的混合物的总荧光偏振，确定PMDM6-F与MDM2蛋白的平衡解离常数（Kd）为1.4±0.3 nM。使用Infinite M-1000读板器在Microfluor 1 96孔黑色圆形底板中测量荧光偏振值。在饱和实验中，将1nM的PMDM6-F和不断增加的蛋白质浓度添加到每个孔中，最终体积为125μL的测定缓冲液（100mM磷酸钾，pH 7.5，100μg/mL牛γ-球蛋白，0.02%叠氮化钠（Invitrogen），0.01%Triton X-100和4%DMSO）。将板混合并在室温下温育30分钟，轻轻摇动以确保平衡。在485nm的激发波长和530nm的发射波长下测量以毫偏振单位（mP）为单位的偏振值。然后通过使用Graphpad Prism 6.0软件拟合作为蛋白质浓度函数的S形剂量依赖性FP增加来计算Kd值。在剂量依赖性竞争结合实验中测定测试化合物的IC50和Ki值。将5μL在DMSO中具有不同浓度的受试化合物和120μL在测定缓冲液中具有固定浓度的预孵育的蛋白质/荧光探针复合物（100mM磷酸钾，pH 7.5，100μg/mL牛γ-球蛋白，0.02%叠氮化钠，0.01%Triton X-100）的混合物加入测定板中，并在室温下温和振荡孵育30分钟。竞争性测定中蛋白质和荧光探针的最终浓度分别为10和1nM，DMSO的最终浓度为4%。仅含有蛋白质/荧光探针复合物（相当于0%抑制）的阴性对照和仅含有游离荧光探针（相当于100%抑制）的阳性对照包括在每个测定板中。如上所述测量FP值。IC50值通过使用Graphpad Prism 6.0软件对作为总化合物浓度函数的S型剂量依赖性FP下降进行非线性回归拟合来确定。基于探针对不同蛋白质的Kd值以及竞争性测定中蛋白质和探针的浓度，也通过非线性回归拟合直接获得竞争性抑制剂的Ki值。 |
| 细胞实验 |
体外细胞实验使用 TP53 野生型和 TP53 突变/缺失的癌细胞系进行。细胞在适当的培养基中接种，并用不同浓度的 alrizomadlin（范围 0.001 至 100 µM）处理 72 小时。使用标准细胞活力测定评估细胞活力，并根据浓度-反应曲线计算 IC50 值。通过碘化丙啶染色后流式细胞术分析细胞周期分布，通过 Annexin-V 染色或 Caspase-3/7 活性测量评估细胞凋亡。在联合研究中，alrizomadlin 与 BCL-2 抑制剂 lisaftoclax 或 MEK 抑制剂等在 TP53 野生型 AML 和葡萄膜黑色素瘤细胞系中一起测试。在 T 细胞活化研究中，从小鼠脾脏分离的 CD4+ T 细胞暴露于 250 nM alrizomadlin 处理 3、6 和 24 小时，通过流式细胞术评估细胞活力和活化标志物。
细胞增殖测定 [3] 细胞类型： AGS 和 MKN45 细胞 测试浓度： 0.0001μM、0.001μM、0.01μM、0.1μM、1μM、 10μM、100μM 孵育持续时间：72小时 实验结果：和S期减少[4]。以浓度依赖性方式抑制细胞增殖。 RT-PCR[3] 细胞类型： AGS 和 MKN45 细胞 测试浓度： 0.02 μM、0.2 μM 孵育持续时间：48小时 实验结果：MDM2、p21、PUMA和BAX mRNA表达增加。 细胞周期分析[3] 细胞类型： AGS 和 MKN45 细胞 测试浓度： 0.02 μM、0.2 μM 孵育持续时间：48小时 实验结果：细胞停滞在G0/G1期。 细胞凋亡分析 [4] 细胞类型： DePTC p53 Wide 细胞类型： TPC-1 细胞、KTC-1 细胞 测试浓度：0.3μM、1μM、3μM、10μM 孵育时间：24 hrs（小时） 实验结果： S期细胞数量减少，G2/M期细胞增多。 蛋白质印迹分析[3] 细胞类型： AGS 和 MKN45 细胞 测试浓度： 0.2 μM 孵育持续时间：72小时 实验结果：MDM2和p53表达增强，p53的稳定敲低将其消除。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 4周龄雄性BALB/c无胸腺裸鼠，MKN45细胞[3]
剂量： 100 mg/kg 给药途径： 口服（po（灌胃））每日一次；10天 实验结果： 异种移植瘤生长减少。 体内药效学研究使用异种移植小鼠模型进行。在葡萄膜黑色素瘤模型（MP41）中，荷瘤小鼠口服 alrizomadlin，剂量为 25、50 和 100 mg/kg。使用数字卡尺定期测量肿瘤体积，并计算肿瘤生长抑制率。在联合研究中，alrizomadlin 与 selumetinib 或 APG-2449 联合给药。在 AML 异种移植模型中，使用细胞来源和患者来源的异种移植模型评估 alrizomadlin 与 lisaftoclax 的联合效果。评估了肿瘤生长、生存期以及 harvested 肿瘤组织中的生物标志物表达。Alrizomadlin 通过口服给药，现有文献中未指定溶剂配方的详细信息。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在一项针对晚期实体瘤患者的首次人体 I 期研究中，alrizomadlin 在 100 至 200 mg 剂量范围内表现出近似线性的药代动力学特征。最大耐受剂量确定为 150 mg，推荐的 II 期剂量为 100 mg，给药方案为每隔一天口服一次，在 28 天周期的 21 天内给药（即服药 21 天、停药 7 天）。在给药后 0.5、1、2、4、6、8、12、24 和 48 小时收集血浆样本进行药代动力学分析，使用非房室模型分析计算参数。Alrizomadlin 给药与血浆中巨噬细胞抑制性细胞因子-1水平的升高相关，这是 p53 通路激活的生物标志物。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在一项针对晚期实体瘤患者的 I 期临床试验中，alrizomadlin 显示出可接受的安全性特征。最常见的 3/4 级治疗相关不良事件为血小板减少症（33.3%）、淋巴细胞减少症（33.3%）、中性粒细胞减少症（23.8%）和贫血（23.8%）。200 mg 队列中的一名患者经历了剂量限制性毒性，表现为血小板减少症和发热性中性粒细胞减少症。在一项 alrizomadlin 联合或不联合 toripalimab 治疗晚期实体瘤患者的 II 期研究中，常见的治疗相关不良事件包括恶心、食欲下降、血小板减少症、中性粒细胞减少症和贫血。观察到 ≥3 级血小板减少症和中性粒细胞减少症，一名患者因 4 级血小板减少症停止治疗；未报告治疗相关死亡。在 150 mg 剂量水平的联合治疗组中未观察到剂量限制性毒性。
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| 参考文献 |
[1]. 4-((3′R,4′S,5′R)-6″-Chloro-4′-(3-chloro-2-fluorophenyl)-1′-ethyl-2″-oxodispiro[cyclohexane-1,2′-pyrrolidine-3′,3″-indoline]-5′-carboxamido)bicyclo[2.2.2]octane-1-carboxylic Acid (AA-115/APG-115): A Potent and Orally Active Murine Double Minute 2 (MDM2) Inhibitor in Clinical Development. J Med Chem. 2017 Apr 13; 60(7): 2819–2839.
[2]. A phase Ib/II study of APG-115 in combination with MK-3475 in patients with unresectable or metastatic melanomas or advanced solid tumors, Ann Oncol. 2019 Feb 1; 30(Supplement_1). pii: mdz027. [3]. A novel small molecule inhibitor of MDM2-p53 (APG-115) enhances radiosensitivity of gastric adenocarcinoma, J Exp Clin Cancer Res. 2018 May 2;37(1):97. [4]. Restoration of p53 using the novel MDM2-p53 antagonist APG115 suppresses dedifferentiated papillary thyroid cancer cells. Oncotarget. 2017 Jun 27;8(26):43008-43022. [5]. Design of Chemically Stable, Potent, and Efficacious MDM2 Inhibitors That Exploit the Retro-Mannich Ring-Opening-Cyclization Reaction Mechanism in Spiro-oxindoles. J Med Chem. 2014 Dec 26; 57(24): 10486–10498. |
| 其他信息 |
Alrizomadlin 是一种新型 MDM2 抑制剂，可阻断 MDM2 与 p53 的相互作用。目前正在进行癌症治疗方面的研究。
Alrizomadlin 是一种口服的人类双微体 2 同源物 (HDM2；小鼠双微体 2 同源物；MDM2) 抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。口服后，alrizomadlin 与 HDM2 结合，阻止 HDM2 蛋白与肿瘤抑制蛋白 p53 的转录激活结构域结合。通过阻止 HDM2-p53 相互作用，抑制了蛋白酶体介导的 p53 酶促降解，并恢复了 p53 的转录活性。这可能导致 p53 信号通路的恢复，并最终导致 p53 介导的肿瘤细胞凋亡。HDM2 是一种锌指蛋白，也是 p53 通路的负调控因子，在癌细胞中经常过表达。它与癌细胞的增殖和存活密切相关。 |
| 分子式 |
C34H38CL2FN3O4
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|---|---|
| 分子量 |
642.5934
|
| 精确质量 |
641.222
|
| 元素分析 |
C, 63.55; H, 5.96; Cl, 11.03; F, 2.96; N, 6.54; O, 9.96
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| CAS号 |
1818393-16-6
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| 相关CAS号 |
1818393-16-6
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| PubChem CID |
91972012
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| 外观&性状 |
White to off-white solid
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
805.8±65.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
441.1±34.3 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±3.0 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.658
|
| LogP |
7.63
|
| tPSA |
98.7
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
44
|
| 分子复杂度/Complexity |
1160
|
| 定义原子立体中心数目 |
3
|
| SMILES |
ClC1C=CC2=C(C=1)NC([C@@]12[C@@H](C2C=CC=C(C=2F)Cl)[C@H](C(NC23CCC(C(=O)O)(CC2)CC3)=O)N(CC)C21CCCCC2)=O
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| InChi Key |
YJCZPJQGFSSFOL-MNZPCBJKSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C34H38Cl2FN3O4/c1-2-40-27(28(41)39-32-16-13-31(14-17-32,15-18-32)30(43)44)25(21-7-6-8-23(36)26(21)37)34(33(40)11-4-3-5-12-33)22-10-9-20(35)19-24(22)38-29(34)42/h6-10,19,25,27H,2-5,11-18H2,1H3,(H,38,42)(H,39,41)(H,43,44)/t25-,27+,31?,32?,34+/m0/s1
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| 化学名 |
4-((3'R,4'S,5'R)-6''-chloro-4'-(3-chloro-2-fluorophenyl)-1'-ethyl-2''-oxodispiro[cyclohexane-1,2'-pyrrolidine-3',3''-indoline]-5'-carboxamido)bicyclo[2.2.2]octane-1-carboxylic acid
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| 别名 |
AA-115; APG115; AA 115; APG115; AA115; APG-115
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~155.62 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (7.78 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 50.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (7.78 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 50.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.89 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.5562 mL | 7.7810 mL | 15.5620 mL | |
| 5 mM | 0.3112 mL | 1.5562 mL | 3.1124 mL | |
| 10 mM | 0.1556 mL | 0.7781 mL | 1.5562 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT02935907 | COMPLETED | Drug: APG-115 | Patients With Advanced Solid Tumor or Lymphoma | Ascentage Pharma Group Inc. | 2016-10 | Phase 1 |
| NCT04496349 | RECRUITING | Drug: APG-115 Drug: APG-2575 |
T-Prolymphocytic Leukemia | Ascentage Pharma Group Inc. | 2021-07-12 | Phase 2 |
| NCT04785196 | RECRUITING | Drug: APG-115 Drug: Toripalimab |
Advanced Solid Tumor Liposarcoma | Ascentage Pharma Group Inc. | 2021-05-26 | Phase 1 Phase 2 |
| NCT05701306 | RECRUITING | Drug: APG-115 Drug: APG-2575 |
Neuroblastoma Solid Tumor |
Ascentage Pharma Group Inc. | 2023-02-28 | Phase 1 |
| NCT03781986 | ACTIVE, NOT RECRUITING | Drug: APG-115 Drug: Carboplatin |
Malignant Salivary Gland Cancer Salivary Gland Cancer |
University of Michigan Rogel Cancer Center | 2019-10-28 | Phase 1 Phase 2 |
|
PHPS1 Sodium
BE 2254
环胞啶硫酸盐
Azido-PEG5-acid
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