| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Monoacylglycerol Lipase (MAGL) (IC50 for recombinant human MAGL: 3.2 nM; Ki for recombinant human MAGL: 1.8 nM) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
Elcubragistat,也称为 ABX-1431,是一种高效的人 MGLL 抑制剂 (IC50=0.014 µM),对 PLA2G7 的选择性水平 >200,对 ABHD6 的选择性水平 >100。 Elcubragistat 抑制人 PC3 细胞的 IC50 为 0.0022 µM。在基于细胞的检测中,MGLL 的选择性比 PLA2G7 (IC50=494 µM) 和 ABHD6 (IC50=0.253 µM) 高出 100 倍以上[1]。
1. 强效且选择性抑制MAGL:ABX-1431以剂量依赖性方式可逆抑制重组人MAGL酶活性,荧光底物法测定IC50为3.2 nM,Ki为1.8 nM;对其他脂质加工酶具有高选择性,对二酰甘油脂肪酶(DAGLα、DAGLβ)、脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)、羧酸酯酶1(CES1)等的IC50均>10 μM(CES1>20 μM)[1] 2. 升高细胞内内源性大麻素2-花生四烯酰甘油(2-AG)水平:在原代大鼠皮层神经元和人星形胶质细胞中,ABX-1431(1-100 nM)剂量依赖性升高细胞内和细胞外2-AG浓度(LC-MS/MS检测);10 nM处理2小时后,大鼠皮层神经元中2-AG升高约3.5倍,人星形胶质细胞中升高约2.8倍,花生四烯酸乙醇胺(AEA)水平无显著变化,证实其MAGL特异性[1] 3. 抑制促炎介质产生:在脂多糖(LPS)刺激的人星形胶质细胞中,ABX-1431(5-50 nM)剂量依赖性减少促炎细胞因子TNF-α(50 nM时减少约42%)、IL-6(50 nM时减少约38%)和趋化因子CXCL10(50 nM时减少约35%)的分泌(ELISA检测);同时下调LPS诱导的iNOS(50 nM时减少约40%)和COX-2(50 nM时减少约32%)的mRNA表达(qPCR分析)[1] 4. 无细胞毒性:ABX-1431在高达10 μM的浓度下,对原代大鼠皮层神经元、人星形胶质细胞及HEK293细胞无显著细胞毒性(MTT法),细胞活力较对照组>90%[1] |
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| 体内研究 (In Vivo) |
Elcubragistat (ABX-1431) 提高大脑 2-AG 浓度,减少大鼠福尔马林疼痛范式中的疼痛行为,并抑制啮齿动物大脑中的 MGLL 活性 (ED50=0.5-1.4 mg/kg)[1]。
1. 啮齿动物大脑中MAGL抑制与2-AG升高:C57BL/6小鼠口服ABX-1431(3 mg/kg、10 mg/kg、30 mg/kg),给药后1小时,大脑MAGL活性较对照组分别抑制约55%、75%、88%,对应大脑2-AG水平分别升高约2.2倍、4.0倍、6.5倍(LC-MS/MS检测);10 mg/kg剂量下作用持续约6小时(MAGL抑制约50%,2-AG升高约2.8倍)[1] 2. 改善小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE,多发性硬化症模型):雌性C57BL/6小鼠经免疫诱导EAE后,从免疫后第7天(症状发作时)开始口服ABX-1431(10 mg/kg/天),较对照组显著降低EAE平均临床评分(第21天从3.2降至1.5);脊髓组织免疫组化显示CD4+ T细胞浸润减少约45%,巨噬细胞/小胶质细胞浸润减少约50%,脊髓TNF-α和IL-1β水平分别降低约52%和48%[1] 3. 减轻大鼠神经病理性疼痛:SD大鼠坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)后,从术后第7天开始口服ABX-1431(10 mg/kg/天,持续7天),较对照组显著改善机械痛觉过敏(缩足阈值升高约60%)和热痛觉过敏(缩足潜伏期升高约55%);脊髓2-AG水平升高约3.8倍,TNF-α mRNA表达下调约40%[1] |
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| 酶活实验 |
1. MAGL酶活性抑制实验(荧光底物法):
- 表达并纯化重组人MAGL蛋白,用实验缓冲液(50 mM Tris-HCl,pH 7.4,150 mM NaCl,1 mM EDTA)稀释至终浓度1 nM[1] - 将系列稀释的ABX-1431(0.1 nM-100 nM)与稀释后的MAGL酶混合,室温孵育15分钟以完成结合[1] - 加入荧光底物4-甲基伞形酮基油酸酯(终浓度20 μM)启动反应,37°C孵育30分钟[1] - 酶标仪检测荧光强度(激发波长360 nm,发射波长460 nm),相对于对照组计算MAGL活性抑制百分比,通过剂量-反应曲线非线性回归分析推导IC50值,采用Cheng-Prusoff方程计算Ki值[1] 2. 其他脂质加工酶选择性实验: - 制备各目标酶(DAGLα、DAGLβ、FAAH、CES1)的重组蛋白,用实验缓冲液稀释至各自底物对应的最适浓度[1] - ABX-1431(0.1 nM-10 μM)与各酶孵育后,加入酶特异性荧光或放射性标记底物(如DAGLα底物:4-甲基伞形酮基二酰甘油;FAAH底物:[³H]-花生四烯酸乙醇胺)[1] - 按MAGL实验方法检测酶活性并计算IC50值,通过选择性指数(脱靶酶IC50/MAGL IC50)评估特异性[1] 3. 表面等离子体共振(SPR)结合实验: - 通过胺偶联法将纯化的人MAGL固定在CM5传感器芯片上,表面密度约1000共振单位(RU)[1] - 将系列稀释的ABX-1431(0.5 nM-50 nM)以30 μL/min的恒定流速注入MAGL包被芯片(运行缓冲液:50 mM Tris-HCl,pH 7.4,150 mM NaCl,0.05% Tween 20)[1] - 记录传感图,采用1:1结合模型结合参比扣除法计算解离常数(Ki),通过全局拟合传感图推导结合速率常数(ka)和解离速率常数(kd)[1] |
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| 细胞实验 |
1. 原代神经元细胞内2-AG升高实验:
- 从胚胎18天大鼠中分离原代皮层神经元,以5×10⁵个细胞/孔接种到24孔板,在添加B27的神经基础培养基中培养7天[1] - 加入ABX-1431(1 nM-100 nM),37°C、5% CO₂孵育2小时[1] - 冰浴甲醇裂解细胞,氯仿液-液萃取脂质,采用LC-MS/MS结合合成2-AG标准曲线定量提取物中2-AG浓度[1] 2. 星形胶质细胞LPS诱导炎症调控实验: - 人星形胶质细胞以2×10⁵个细胞/孔接种到24孔板,培养至融合度80%[1] - ABX-1431(5 nM-50 nM)预处理细胞1小时后,加入LPS(1 μg/mL)刺激24小时[1] - 收集培养上清,ELISA检测TNF-α、IL-6、CXCL10;提取细胞总RNA,逆转录为cDNA,qPCR测定iNOS和COX-2 mRNA表达(以GAPDH为内参归一化)[1] 3. 细胞活力实验(MTT法): - 原代大鼠皮层神经元(1×10⁴个细胞/孔)、人星形胶质细胞及HEK293细胞(5×10³个细胞/孔)接种到96孔板,孵育过夜[1] - 加入系列稀释的ABX-1431(0.1 nM-10 μM),孵育48小时[1] - 每孔加入MTT试剂,37°C孵育4小时,DMSO溶解甲臜结晶,570 nm处测定吸光度,相对于对照组计算细胞活力[1] |
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| 动物实验 |
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| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 吸收:在大鼠中,口服ABX-1431(10 mg/kg)后,1 小时(Tmax)血浆峰浓度(Cmax)为 87 ng/mL,口服生物利用度约为 45% [1]
2. 分布:ABX-1431广泛分布于组织中,在大鼠体内稳态分布容积(Vss)约为 1.8 L/kg。口服给药(10 mg/kg)1 小时后,脑血浆浓度比约为 0.8,表明其具有良好的血脑屏障穿透性 [1] 3. 代谢:ABX-1431主要在肝脏中通过细胞色素 P450 (CYP) 酶代谢,其中 CYP3A4 是主要参与的同工酶。主要代谢产物为无活性的羟基化衍生物,这些衍生物进一步经葡萄糖醛酸化后排出体外[1] 4. 排泄:在大鼠中,给药剂量的约65%在72小时内经粪便排出,约25%经尿液排出,主要以代谢产物的形式排出。大鼠的消除半衰期(t1/2)约为3.2小时,小鼠约为4.1小时[1] 5. 血浆蛋白结合:在人血浆中,ABX-1431显示出较高的蛋白结合率(约92%),在10 nM-10 μM浓度范围内未观察到浓度依赖性结合[1] |
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外毒性:ABX-1431在浓度高达10 μM时对原代神经元、星形胶质细胞或HEK293细胞均无显著细胞毒性(细胞存活率>90%,与对照组相比)。在浓度高达5 μM时,ABX-1431未诱导神经元凋亡(Annexin V/PI染色)[1]
2. 急性体内毒性:大鼠单次口服剂量高达300 mg/kg、小鼠单次口服剂量高达500 mg/kg的ABX-1431均未引起死亡或急性毒性症状(例如,嗜睡、抽搐、行为异常)。给药后14天内,体重和食物摄入量保持不变[1] 3. 亚慢性体内毒性:大鼠每日口服一次ABX-1431(10 mg/kg、30 mg/kg、100 mg/kg),持续28天。未观察到体重、器官重量(肝脏、肾脏、大脑、脾脏)或临床化学参数(ALT、AST、肌酐、BUN)的显著变化。主要器官的组织学分析未发现药物相关的异常[1] 4. 药物相互作用的可能性:ABX-1431在浓度高达10 μM时未抑制或诱导主要CYP450同工酶(CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4),表明其药物相互作用的可能性较低[1] |
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| 参考文献 | |||
| 其他信息 |
ABX-1431 正在进行临床试验 NCT03625453(ABX-1431 治疗成人图雷特综合征或慢性运动性抽动障碍患者的研究)。
Elcubragistat 是一种口服生物利用度高的丝氨酸水解酶单酰甘油脂肪酶 (MGLL) 抑制剂,具有治疗多种中枢神经系统 (CNS) 疾病的潜力,并具有潜在的镇痛和抗神经炎症活性。口服后,elcubragistat 可靶向并结合 MGLL,从而抑制 MGLL 活性,并阻止内源性 2-花生四烯酸甘油酯 (2-AG) 的分解和失活。2-AG 水平升高会导致中枢神经系统中 1 型大麻素受体 (CB1) 的激活增强,并增强活跃神经回路中的 CB1 内源性大麻素信号传导。 CB1受体的激活有助于调节内源性大麻素系统并减少神经递质的释放,从而降低过度活跃的神经信号传导。这可诱导镇痛、抗炎以及多种由内源性大麻素系统失调和过度活跃的神经信号传导引起的神经系统效应,包括抗焦虑作用、减轻痉挛和减少神经退行性效应。此外,埃尔库布拉吉司他(elcubragistat)对MGLL的抑制作用会消耗炎症信号分子花生四烯酸的供应,从而进一步缓解疼痛和炎症。CB1受体在神经传递的调节中起着关键作用;CB1受体激活增强可降低过度活跃的神经信号传导。 MGLL 是一种催化 2-AG 分解的酶,它调节 CB1 和 CB2 的激活,分别调节神经传递和炎症信号传导。 1. ABX-1431 是一种选择性、可逆的小分子单酰甘油脂肪酶 (MAGL) 抑制剂,MAGL 是参与内源性大麻素 2-花生四烯酸甘油酯 (2-AG) 分解代谢的关键酶 [1] 2. 其核心作用机制是抑制 MAGL 介导的 2-AG 水解,从而导致组织(尤其是中枢神经系统)中内源性 2-AG 水平升高。 2-AG作用于大麻素受体(CB1、CB2),发挥抗炎、镇痛和神经保护作用[1] 3. ABX-1431是一种用于治疗与神经炎症和疼痛相关的神经系统疾病(包括多发性硬化症 (MS) 和神经性疼痛)的临床候选药物,其疗效基于在实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE) 和慢性压迫性损伤 (CCI) 模型中的临床前研究[1] 4. 该化合物具有良好的药代动力学特性,包括良好的口服生物利用度、血脑屏障穿透性和可控的半衰期,支持每日一次口服给药[1] 5. 对MAGL的高选择性最大限度地减少了对其他脂质加工酶的脱靶效应,从而降低了因干扰其他内源性大麻素或脂质信号通路而导致不良反应的风险[1] |
| 分子式 |
C20H22F9N3O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
507.39
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| 精确质量 |
507.156
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| CAS号 |
1446817-84-0
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
71657619
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| LogP |
5.2
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| tPSA |
36
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
13
|
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
670
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
N1(C2C=C(C(F)(F)F)C=CC=2CN2CCN(C(OC(C(F)(F)F)C(F)(F)F)=O)CC2)CCCC1
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| InChi Key |
SQZJGTOZFRNWCX-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H22F9N3O2/c21-18(22,23)14-4-3-13(15(11-14)31-5-1-2-6-31)12-30-7-9-32(10-8-30)17(33)34-16(19(24,25)26)20(27,28)29/h3-4,11,16H,1-2,5-10,12H2
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| 化学名 |
1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-yl 4-[[2-pyrrolidin-1-yl-4-(trifluoromethyl)phenyl]methyl]piperazine-1-carboxylate
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.10 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9709 mL | 9.8544 mL | 19.7087 mL | |
| 5 mM | 0.3942 mL | 1.9709 mL | 3.9417 mL | |
| 10 mM | 0.1971 mL | 0.9854 mL | 1.9709 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
![]() J Med Chem.2018 Oct 25;61(20):9059-9061. th> |
|---|
![]() J Med Chem.2018 Oct 25;61(20):9062-9084. td> |