| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Mcl-1 (Ki = 0.13 nM)
AMG-176 targets myeloid cell leukemia 1 (MCL1) protein (Ki = 0.19 nM for human MCL1; no significant binding to BCL-2 (Ki > 1000 nM), BCL-xL (Ki > 1000 nM), BCL-w (Ki > 1000 nM), or BFL-1 (Ki > 1000 nM)) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Tapoclax 是一种能够刺激细胞显色和抗肿瘤作用的化合物。它还促进诱导型髓系白血病细胞中 MCL-1 (Ki=0.13 nM) 的产生。此后，tapotoclax 附着在 MCL-1 上并阻止其功能。它刺激肿瘤细胞并干扰 MCL-1/Bcl-2 样蛋白 11 (BCL2L11；BIM) 复合物的形成 [1][2]。
1. AMG-176对多种血液癌细胞系展现出强效抗增殖活性，在急性髓系白血病（AML）细胞系中IC50值为0.03 μM-1.2 μM（如MV4-11：0.06 μM、MOLM-13：0.09 μM、OCI-AML3：0.32 μM），多发性骨髓瘤（MM）细胞系中IC50值为0.18 μM-0.25 μM（如RPMI-8226：0.18 μM、U266：0.25 μM），慢性淋巴细胞白血病（CLL）细胞系中IC50值为0.45 μM-0.51 μM（如MEC-1：0.45 μM、HG3：0.51 μM）[1] 2. AMG-176可剂量依赖性诱导MCL1依赖型血液癌细胞凋亡，经膜联蛋白V/碘化丙啶（Annexin V/PI）染色流式细胞术检测，MV4-11细胞经0.1 μM AMG-176处理24小时后凋亡率达45%，0.5 μM处理后凋亡率升至82%[1] 3. 蛋白质免疫印迹（western blot）分析显示，AMG-176可触发AML（MV4-11）和MM（RPMI-8226）细胞系中聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）、半胱天冬酶-3/9（caspase-3/caspase-9）的切割，证实内在凋亡通路被激活；此外，AMG-176还能剂量依赖性下调MCL1蛋白水平，并使BIM从MCL1-BIM复合物中释放[1] 4. 克隆形成实验表明，AMG-176（0.01-0.5 μM）可显著减少原发性AML母细胞（n=12）的集落形成，平均IC50为0.12 μM，而对正常造血祖细胞（CD34+细胞）的影响极小，IC50>5 μM[1] 5. AMG-176与标准化疗药物（阿糖胞苷、柔红霉素）或靶向药物（维奈克拉、硼替佐米、艾代拉里斯）联合使用时，在AML、MM、CLL细胞系中展现出协同抗增殖效应（多数组合的联合指数<0.8），诱导凋亡的效果较单药治疗显著增强[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
1. 在MV4-11 AML皮下异种移植小鼠模型中，AMG-176以10、30、50 mg/kg的剂量腹腔注射，每日1次，连续14天，可剂量依赖性抑制肿瘤生长，肿瘤生长抑制（TGI）率分别为42%、78%和91%；50 mg/kg剂量还能将中位总生存期（OS）从载体组的28天延长至45天[1]
2. 在RPMI-8226 MM皮下异种移植小鼠模型中，AMG-176（30 mg/kg腹腔注射，每日1次，连续14天）的TGI达72%，中位OS较载体组延长32%；与硼替佐米（0.5 mg/kg腹腔注射，每周2次）联合使用时，8只小鼠中有6只实现肿瘤完全消退，中位OS延长2.1倍[1] 3. 在弥散性AML小鼠模型（尾静脉注射MOLM-13-荧光素酶细胞）中，AMG-176（50 mg/kg腹腔注射，每日1次，连续10天）在第14天使生物发光信号（肿瘤负荷）降低85%，中位OS从载体组的22天延长至38天；与阿糖胞苷（100 mg/kg腹腔注射，每日1次，连续5天）联合使用后，肿瘤负荷进一步降低96%，中位OS延长至52天[1] 4. 在原发性患者来源的异种移植（PDX）模型中（3例AML、2例MM），AMG-176（30-50 mg/kg腹腔注射，每日1次，连续14天）在4/5的模型中诱导显著肿瘤消退（TGI≥60%），并延长所有模型的生存期，且对正常骨髓造血功能影响极小[1] |
| 酶活实验 |
1. MCL1荧光偏振（FP）结合实验：将重组人MCL1蛋白与荧光标记的BH3肽（BIM BH3）及系列稀释的AMG-176在缓冲体系中室温孵育60分钟；利用酶标仪检测偏振值，绘制竞争结合曲线并计算AMG-176对MCL1的Ki值；通过在相同条件下将AMG-176与重组BCL-2、BCL-xL、BCL-w和BFL-1蛋白共孵育，验证其结合特异性[1]
2. 等温滴定量热法（ITC）实验：在25℃条件下，将AMG-176滴定至量热仪样品池中的重组MCL1蛋白溶液中；记录结合相互作用产生的热变化，分析数据以确定AMG-176-MCL1复合物的结合亲和力（KD）和热力学参数（ΔH、ΔS）[1] 3. 均相时间分辨荧光（HTRF）实验：将MCL1蛋白与生物素化的BH3肽、Eu标记的抗MCL1抗体及递增浓度的AMG-176共孵育；检测665 nm和620 nm处的HTRF信号，量化AMG-176对MCL1-BH3肽结合的抑制作用，以证实其拮抗活性[1] |
| 细胞实验 |
1. 细胞活力实验：将血液癌细胞系（AML、MM、CLL）和正常CD34+造血祖细胞以5×10³个/孔的密度接种于96孔板；加入系列稀释的AMG-176（0.001-10 μM），在37℃、5% CO₂条件下孵育72小时；加入细胞活力检测试剂，通过吸光度/荧光值计算抗增殖活性的IC50值；联合用药实验中，将AMG-176与阿糖胞苷、硼替佐米或维奈克拉按固定剂量比共处理，采用周-泰勒法计算联合指数[1]
2. 凋亡检测实验：将癌细胞用AMG-176（0.01-1 μM）处理24-48小时后收集，用Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）染色；通过流式细胞术量化早期（Annexin V+/PI-）和晚期（Annexin V+/PI+）凋亡细胞比例；对于原发性AML母细胞，从患者骨髓样本中分离细胞后用AMG-176处理，采用相同染色方案检测凋亡率[1] 3. 凋亡标志物蛋白质免疫印迹实验：AMG-176处理细胞24-48小时后，用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的裂解液裂解细胞；定量蛋白浓度后，将等量蛋白进行SDS-PAGE电泳并转移至膜上；用抗MCL1、BIM、PARP、caspase-3、caspase-9和β-肌动蛋白（内参）的抗体孵育膜；通过二抗结合物检测抗体，并用密度计量法量化条带强度[1] 4. 集落形成实验：将原发性AML母细胞和正常CD34+细胞接种于含生长因子和系列稀释AMG-176（0.01-5 μM）的半固体培养基中；在37℃、5% CO₂条件下孵育14天后计数集落，计算相对于载体处理对照组的集落形成抑制百分比[1] |
| 动物实验 |
1. 皮下异种移植模型（AML/MV4-11）：将5×10⁶个MV4-11细胞皮下注射到6-8周龄的雌性NOD/SCID小鼠右侧腹部；待肿瘤体积达到100-150 mm³后开始治疗；将AMG-176配制成10% DMSO、40% PEG400和50%无菌生理盐水的溶剂，并以10、30或50 mg/kg的剂量腹腔注射（IP），每日一次，连续14天；每2天使用游标卡尺测量肿瘤体积（体积=长×宽²/2），并监测体重以评估毒性；当肿瘤体积超过 2000 mm³ 或出现痛苦迹象时，对小鼠实施安乐死 [1]
2. 皮下异种移植模型 (MM/RPMI-8226)：将 1×10⁷ 个 RPMI-8226 细胞皮下注射到 NOD/SCID 小鼠体内；当肿瘤体积达到 150-200 mm³ 时，将小鼠随机分组，分别接受 AMG-176 (30 mg/kg，腹腔注射，每日一次，共 14 天)、硼替佐米 (0.5 mg/kg，腹腔注射，每周两次，共 3 次) 或二者联合治疗；每周测量两次肿瘤体积和体重，并记录 60 天的总生存期 [1] 3. 播散性 AML 模型 (MOLM-13-荧光素酶)：将 1×10⁶ 个稳定表达荧光素酶的 MOLM-13 细胞经尾静脉注射到 NOD/SCID 小鼠体内；注射后7天，进行生物发光成像（BLI）以确认肿瘤移植；小鼠接受AMG-176（50 mg/kg，腹腔注射，每日一次，共10天）、阿糖胞苷（100 mg/kg，腹腔注射，每日一次，共5天）或二者联合治疗；每7天进行一次BLI以量化肿瘤负荷，并监测生存期60天[1] 4. 患者来源的异种移植（PDX）模型：从患者骨髓穿刺液中分离出原代AML/MM细胞，并注射到NOD/SCID gamma（NSG）小鼠体内（MM皮下注射，AML静脉注射）；一旦检测到肿瘤（AML：BLI信号；MM：可触及的肿瘤），小鼠接受AMG-176（30-50 mg/kg，腹腔注射，每日一次，共14天）治疗；肿瘤生长情况通过生物发光成像（BLI，AML）或卡尺测量（MM）进行评估，外周血/骨髓通过流式细胞术分析以评估正常造血功能[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 在雄性 CD-1 小鼠中，静脉注射 (IV) AMG-176 (5 mg/kg) 的末端半衰期 (t1/2) 为 2.8 小时，分布容积 (Vd) 为 0.9 L/kg，总清除率 (CL) 为 0.25 L/h/kg；口服 (20 mg/kg) 的生物利用度较低 (F = 8.2%)，血浆峰浓度 (Cmax) 为 0.32 μM，达峰时间为 1 小时 (Tmax) [1]
2. 在雌性 NOD/SCID 小鼠中，腹腔注射 AMG-176 (30 mg/kg) 的 Cmax 为 2.1 μM (Tmax = 0.5 小时)，24 小时 AUC₀ 为 6.8 μM·h；该药物表现出良好的组织渗透性，给药后2小时骨髓（1.8 μM）和脾脏（2.3 μM）中的浓度均高于大多数MCL1依赖性癌细胞的体外IC50值[1]。 3. AMG-176主要通过人肝微粒体中的CYP3A4代谢，CYP2C9和CYP2D6的贡献较小；48小时内，小鼠尿液和粪便中以原形排出的药物不足5%[1]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. AMG-176 在小鼠、大鼠和人血浆中均表现出较高的血浆蛋白结合率（分别为 97.5%、98.2% 和 99.1%）[1]
2. CD-1 小鼠的急性毒性研究表明，腹腔注射剂量高达 200 mg/kg 时，未观察到死亡或明显的毒性；亚慢性毒性试验（腹腔注射，50 mg/kg/天，持续 14 天）显示轻度体重下降（<10%），肝肾功能指标（ALT、AST、BUN、肌酐）或血液学参数（白细胞、红细胞、血小板）无显著变化[1] 3. 体外 CYP450 抑制试验表明，AMG-176 在浓度高达 10 μM 时不抑制 CYP1A2、CYP2C19 或 CYP2D6，对 CYP3A4 (IC50 = 8.7 μM) 和 CYP2C9 (IC50 = 9.2 μM) 的抑制作用较弱，表明药物相互作用风险较低[1] 4. 在非人灵长类动物（食蟹猴）中，重复静脉注射 AMG-176 (10-30每周一次，每次mg/kg，持续4周）导致短暂性淋巴细胞减少和中性粒细胞减少，停药后7天内恢复正常；肝脏、肾脏、骨髓或其他主要器官未观察到组织病理学改变[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Tapotoclax是一种诱导髓系白血病细胞分化蛋白MCL-1（髓系细胞白血病-1）抑制剂，具有潜在的促凋亡和抗肿瘤活性。给药后，tapotoclax与MCL-1结合并抑制其活性。这会破坏MCL-1/Bcl-2样蛋白11（BCL2L11；BIM）复合物的形成，并诱导肿瘤细胞凋亡。 MCL-1 是一种属于 Bcl-2 蛋白家族的抗凋亡蛋白，在癌细胞中表达上调，并促进肿瘤细胞存活。
药物适应症 治疗急性髓系白血病 1. AMG-176 是一种首创的选择性小分子 MCL1 抑制剂。MCL1 是 BCL-2 蛋白家族中的促生存成员，在血液系统恶性肿瘤中经常过表达，并与化疗耐药相关[1] 2. AMG-176 的作用机制是与 MCL1 的 BH3 结合槽结合，破坏其与促凋亡蛋白（BIM、BAK、BAX）的相互作用，从而触发线粒体固有凋亡途径[1] 3. AMG-176 正在进行 I/II 期临床试验（NCT02675452，NCT03672695）用于治疗复发/难治性 AML、MM 和 CLL，初步数据显示具有临床活性和可控的安全性[1] 4. [2] 指出AMG-176代表了靶向 MCL1 的重大进展，MCL1 是 BCL-2 家族成员，由于其灵活的 BH3 结合口袋，因此一直以来都难以治疗；其对 MCL1 相对于其他 BCL-2 家族蛋白的高选择性可最大限度地减少靶向毒性（例如，与维奈托克等 BCL-2 抑制剂相关的血小板减少症）[2] 5. 临床前数据表明，AMG-176 对 MCL1 高度依赖的癌症尤其有效，包括 FLT3 突变型 AML、t(11;14) 阳性 MM 和 del(17p) CLL，并且与其他药物联合使用可以克服对 MCL1 抑制的适应性耐药性[1] |
| 分子式 |
C33H41CLN2O5S
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|---|---|
| 分子量 |
613.207047224045
|
| 精确质量 |
612.24
|
| 元素分析 |
C, 64.64; H, 6.74; Cl, 5.78; N, 4.57; O, 13.05; S, 5.23
|
| CAS号 |
1883727-34-1
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| 相关CAS号 |
1883727-34-1
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| PubChem CID |
118910268
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
6.8
|
| tPSA |
93.3
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
1
|
| 重原子数目 |
42
|
| 分子复杂度/Complexity |
1110
|
| 定义原子立体中心数目 |
6
|
| SMILES |
C[C@H]1C/C=C/[C@@H]([C@@H]2CC[C@H]2CN3C[C@@]4(CCCC5=C4C=CC(=C5)Cl)COC6=C3C=C(C=C6)C(=O)NS(=O)(=O)[C@@H]1C)OC
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| InChi Key |
JQNINBDKGLWYMU-GEAQBIRJSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C33H41ClN2O5S/c1-21-6-4-8-30(40-3)27-12-9-25(27)18-36-19-33(15-5-7-23-16-26(34)11-13-28(23)33)20-41-31-14-10-24(17-29(31)36)32(37)35-42(38,39)22(21)2/h4,8,10-11,13-14,16-17,21-22,25,27,30H,5-7,9,12,15,18-20H2,1-3H3,(H,35,37)/b8-4+/t21-,22+,25-,27+,30-,33-/m0/s1
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| 化学名 |
(3'R,4S,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-7-chloro-7'-methoxy-11',12'-dimethyl-13',13'-dioxospiro[2,3-dihydro-1H-naphthalene-4,22'-20-oxa-13lambda6-thia-1,14-diazatetracyclo[14.7.2.03,6.019,24]pentacosa-8,16(25),17,19(24)-tetraene]-15'-one
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| 别名 |
tapotoclaxum; tapotoclax; AMG-176; AMG176; AMG 176
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~62.5 mg/mL (~101.9 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2 mg/mL (3.26 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2 mg/mL (3.26 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 2 mg/mL (3.26 mM) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6308 mL | 8.1538 mL | 16.3076 mL | |
| 5 mM | 0.3262 mL | 1.6308 mL | 3.2615 mL | |
| 10 mM | 0.1631 mL | 0.8154 mL | 1.6308 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT05209152 | Recruiting | Drug: AMG 176 Drug: Azacitidine |
Higher Risk Myelodysplastic Syndrome Chronic Myelomonocytic Leukemia |
Amgen | September 1, 2019 | Phase 1 |
| NCT02675452 | Recruiting | Drug: AMG 176 Drug: Azacitidine |
Relapsed or Refractory Multiple Myeloma Relapsed or Refractory Acute Myeloid Leukemia |
Amgen | June 13, 2016 | Phase 1 |
| NCT03797261 | Terminated | Drug: Venetoclax Drug: AMG 176 |
Acute Myeloid Leukemia Non-Hodgkin's Lymphoma |
AbbVie | March 18, 2019 | Phase 1 |
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PROTAC Bcl-xL degrader-4
BCL-XL-IN-4
BAD (103-127) (human), FAM-labeled TFA
PROTAC BCL-xL/BCL-w Degrader 1
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