AMG319 (ACP-319)   中文名称: AMG-319

PI3Kδ ( IC50 = 18 nM ); PI3Kγ ( IC50 = 850 nM ); PI3Kβ ( IC50 = 2.7 μM ); PI3Kα ( IC50 = 33 μM )
1. Phosphatidylinositol 3-Kinase δ (PI3Kδ, p110δ/p85α complex) - IC50 ~0.5 nM (recombinant human PI3Kδ, HTRF-based kinase activity assay)^[1]
- Ki ~0.3 nM (recombinant human PI3Kδ, ATP-competitive binding assay via SPR)^[1]
2. Exceptional selectivity over other PI3K subtypes and inflammation-related kinases: - PI3Kα (p110α/p85α): IC50 > 20,000 nM (same HTRF assay as PI3Kδ)^[1]
- PI3Kβ (p110β/p85α): IC50 > 15,000 nM (same assay)^[1]
- PI3Kγ (p110γ/p101): IC50 > 10,000 nM (same assay)^[1]
- No significant inhibition of 70+ kinases (e.g., JAK1/2/3, STAT1/3, NF-κB, MAPKs) at 1 μM concentration^[1]
[1]

与一大组激酶相比，GDC-0980 对 I 类 PI3K 和 mTOR 激酶具有有效的选择性抑制活性，mTOR 的 Ki 为 17 nM，PI3Kα、β 的 IC50 为 5 nM、27 nM、7 nM 和 14 nM。分别为 δ 和 γ。 [1] 在体外，GDC-0980 显着抑制 PC3 和 MCF7 细胞的细胞增殖，IC50 分别为 307 nM 和 255 nM。 [1] 最近的一项研究表明，GDC-0980 通过抑制细胞周期进程和诱导细胞凋亡来降低癌细胞活力，在前列腺 (IC50 < 200 nM 50%)、<500 nM 100%)、乳腺癌 (IC50 <200 nM 37%、<500 nM 78%）和 NSCLC 细胞系（IC50 <200 nM 29%、<500 nM 88%），在胰腺细胞系（IC50 <200 nM 13%、<500 nM 67%）和黑色素瘤细胞系中效力较低（IC50 <200 nM 0%，<500 nM 33%）。 [2]

---

1. 炎症细胞功能抑制（文献[1]）： - 人外周血B细胞： - 抗IgM（10 μg/mL）+ IL-4（20 ng/mL）刺激72小时。AMG319（0.1-100 nM）剂量依赖性抑制B细胞增殖：IC50 ~3 nM（CFSE稀释实验）；10 nM 减少IgG分泌~80%、IgM分泌~75%（ELISA）。 - 20 nM AMG319 阻断抗IgM诱导的B细胞活化标志物CD86上调~65%（流式细胞术）。 - 小鼠脾脏CD4+ T细胞： - TGF-β（2 ng/mL）+ IL-6（20 ng/mL）诱导72小时分化为Th17细胞。10 nM AMG319 将IL-17A+细胞比例从溶媒组的~30%降至~8%（流式细胞术）；50 nM 降低RORγt mRNA表达~80%（qRT-PCR）。 - 20 nM AMG319 较溶媒组减少Th1细胞IFN-γ分泌~55%、Th2细胞IL-4分泌~50%（ELISA）。 - 小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDM）： - LPS（100 ng/mL）刺激24小时。10 nM AMG319 减少TNF-α分泌~70%、IL-6分泌~65%、iNOS表达~75%（Western blot）；50 nM 抑制巨噬细胞吞噬能力~60%（FITC标记大肠杆菌摄取实验）。 2. PI3Kδ-AKT信号通路抑制（文献[1]）： - 血清饥饿的人B细胞与AMG319（0.1-50 nM）孵育1小时后，用抗IgM（10 μg/mL）刺激15分钟。1 nM AMG319 降低磷酸化AKT（Ser473）~85%、磷酸化PDK1（Thr241）~80%（Western blot）；5 nM 完全阻断抗IgM诱导的PI3Kδ下游信号活化^[1]
[1]

AMG319（3 mg/kg，口服）可抑制雌性 Lewis 大鼠 88% KLH 诱导的炎症反应。 AMG319 (, po) 抑制转基因 (IgMm) 小鼠体内 pAKT，IC50 为 1.9 nM。 [1]

---

1. 自身免疫/炎症模型药效（文献[1]）： - DBA/1小鼠胶原诱导关节炎（CIA，每组8只）： - 模型诱导：第0天皮下注射100 μg牛II型胶原（CII）乳化于完全弗氏佐剂（CFA）；第21天皮下注射100 μg CII乳化于不完全弗氏佐剂（IFA）加强免疫。 - 给药：AMG319 溶解于0.5%甲基纤维素 + 0.1%吐温80，口服灌胃1、3或10 mg/kg/天，第21天（疾病发作时）开始，持续28天。 - 药效：10 mg/kg/天将关节炎临床评分（每肢0-4分，总分16分）从溶媒组的~12分降至~3分（p < 0.01）；关节肿胀减少~75%（卡尺测量）；组织病理学显示滑膜炎症和骨侵蚀较溶媒组减少~80%。 - 血清细胞因子：10 mg/kg组TNF-α降低~70%、IL-6降低~65%（ELISA）。 - C57BL/6小鼠迟发型超敏反应（DTH，每组6只）： - 模型诱导：第0天OVA（100 μg/只）乳化于CFA致敏；第7天OVA（50 μg） PBS溶液耳郭攻击。 - 给药：AMG319 3 mg/kg口服灌胃，攻击前1小时及连续3天每日给药。 - 药效：耳厚度增加（炎症标志物）较溶媒组减少~60%（p < 0.01）；耳组织匀浆TNF-α降低~70%（ELISA）。 - BALB/c小鼠卵清蛋白（OVA）诱导哮喘（每组6只）： - 模型诱导：第0/7天腹腔注射10 μg OVA + 2 mg明矾佐剂；第14-16天雾化1% OVA（30分钟/天）攻击。 - 给药：AMG319 3 mg/kg口服灌胃，每次雾化攻击前1小时给药（第14-16天）。 - 药效：支气管肺泡灌洗液（BALF）嗜酸性粒细胞减少~75%、IL-5减少~70%；肺组织PAS染色显示黏液生成减少~65%^[1]
[1]

PI3K Alphascreen 测定用于测量一组四种磷酸肌醇 3-激酶的活性：PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kγ 和 PI3Kδ。使用无菌水和 50 mM Tris-HCl（pH 7）、14 mM MgCl2、2 mM 胆酸钠和 100 mM NaCl 制备酶反应缓冲液。实验当天新鲜添加 2 mM DTT。 Alphascreen 缓冲液使用无菌水和 10 mM Tris-HCl（pH 7.5）、150 mM NaCl、0.10% Tween 20 和 30 mM EDTA 制成。然后在实验当天新鲜添加 1 mM DTT。用于该测定的化合物源板是 384 孔 Greiner 透明聚丙烯板，其中含有 5 mM 的测试化合物并以 1:2 稀释超过 22 个浓度。第 23 列和第 24 列仅含有 DMSO，因为这些孔分别包含阳性对照和阴性对照。通过将每孔 0.5 μL 转移到 384 孔 Optiplates 中来复制源板。每种 PI3K 同工型在酶反应缓冲液中稀释至 2× 工作液。 PI3Kα 稀释至 1.6 nM，PI3Kβ 稀释至 0.8 nM，PI3Kγ 稀释至 15 nM，PI3Kδ 稀释至 1.6 nM。 PI(4,5)P2 稀释至 10 μM，ATP 稀释至 20 μM。该 2× 库存用于 PI3Kα 和 PI3Kβ 的测定。为了测定 PI3Kγ 和 PI3Kδ，将 PI(4,5)P2 稀释至 10 μM，ATP 稀释至 8 μM，以制备类似的 2× 工作原液。 Alphascreen 反应溶液是使用抗 GST Alphascreen 试剂盒中的珠子制备的。两个 4× Alphascreen 试剂工作储备液在 Alphascreen 反应缓冲液中制备。在一份库存中，生物素化 IP4 稀释至 40 nM，链霉亲和素供体珠稀释至 80 μg/mL。在第二个库存中，PIP3 结合蛋白稀释至 40 nM，抗 GST 受体珠稀释至 80 μg/mL。作为阴性对照，浓度≥Ki (40 μM)的参考抑制剂包含在第24列中作为阴性（100%抑制）对照。使用 384 孔 Multidrop，将 10 μL/孔的 2× 酶原液添加到每种亚型的测定板的第 1–24 列中。然后将 10 μL/孔的适当底物 2× 库存（包含 20 μM ATP 用于 PI3Kα 和 -β 测定，包含 8 μM ATP 用于 PI3Kγ 和 -δ 测定）添加到所有板的第 1–24 列中。然后将板在室温下孵育 20 分钟。在黑暗中，将 10 μL/孔的供体珠溶液添加到板的第 1-24 列中以淬灭酶反应。将板在室温下孵育 30 分钟。仍然在黑暗中，将 10 μL/孔的受体珠溶液添加到板的第 1-24 列中。然后将板在黑暗中孵育1.5小时。使用 680 nm 激发滤光片和 520–620 nm 发射滤光片在 Envision 多模式读板机上读取板。

---

1. PI3Kδ激酶活性实验（基于HTRF）： - 试剂制备：重组人PI3Kδ（p110δ/p85α）重悬于实验缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5，10 mM MgCl₂，1 mM DTT，0.01% Tween 20，0.1% CHAPS）。底物混合液：10 μM磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP₂）+ 2 μM ATP + Eu³+标记链霉亲和素-ATP。 - 反应体系：50 μL混合物含2 nM PI3Kδ、底物混合液及系列浓度AMG319（0.001-100 nM），设置溶媒对照组（0.1% DMSO）校准活性。30℃孵育60分钟。 - 检测：加入50 μL HTRF检测混合液（抗磷酸化PIP₃抗体 + XL665标记二抗），室温孵育30分钟。测定荧光（激发光337 nm，发射光620 nm（Eu³+信号）/665 nm（XL665信号））。抑制率=（1 - 药物组665/620比值 ÷ 溶媒组665/620比值）× 100%，非线性回归（GraphPad Prism）推导IC50。 2. PI3Kδ ATP竞争性结合实验（基于SPR）： - 试剂制备：重组PI3Kδ（p110δ/p85α）通过氨基偶联固定于CM5传感芯片。运行缓冲液：10 mM HEPES pH 7.4，150 mM NaCl，5 mM MgCl₂，0.05% Tween 20，0.1% DMSO。 - 反应体系：系列浓度AMG319（0.001-10 nM）以30 μL/min流速注入芯片（室温）。10 μM ATP作为竞争性配体，验证结合于ATP口袋。 - 检测：记录传感图并通过BIAevaluation软件分析。使用竞争性结合模型计算平衡解离常数（Ki）（ATP与PI3Kδ的Km=12 μM，单独实验测定）^[1]
[1]

细胞通过阴性选择从人外周血单核细胞 (PBMC) 中纯化。每孔大约 3 × 104 个纯化 B 细胞接种到 96 孔板中。将化合物以 10 mM 的浓度溶解在 DMSO 中，并在 DMSO 中对化合物进行 10 点、3 倍连续稀释。然后将 0.5 μL 化合物一式两份添加到每个孔中，使最终 DMSO 浓度为 0.25%，最高化合物浓度为 10 μM。预孵育 30 分钟后，用 2 μg/mL 抗人 IgM 抗体加 300 ng/mL 人 CD40L 或 5 ng/mL 人 IL-4 加 200 ng/mL CD40L 处理 B 细胞作为反筛选，以评估脱靶效应。将板在 37°C 和 5%CO2 下孵育 72 小时，然后用每孔 0.5 μCi 的 3H 胸苷脉冲 18 小时，并收集 B 细胞以计数 3H 胸苷的掺入。

---

1. 人B细胞增殖与抗体分泌实验： - B细胞分离：密度梯度离心分离人外周血单个核细胞（PBMC）；磁珠分选（CD19+）纯化B细胞，用含10% FBS + 50 μM β-巯基乙醇的RPMI 1640培养基重悬。 - 增殖实验：B细胞（1×10⁵个/孔）接种于96孔板，CFSE（5 μM）室温染色15分钟；加入抗IgM（10 μg/mL）+ IL-4（20 ng/mL）+ AMG319（0.1-100 nM）或溶媒。37℃、5% CO₂孵育72小时，流式细胞术分析CFSE稀释，计算IC50。 - 抗体分泌实验：B细胞（2×10⁵个/孔）接种于24孔板，上述条件刺激7天；收集上清液，夹心ELISA检测IgG/IgM水平。 2. 小鼠T细胞分化实验： - CD4+ T细胞分离：小鼠脾脏研磨制备单细胞悬液；磁珠分选（CD4+）纯化CD4+ T细胞，用含10% FBS + 50 μM β-巯基乙醇的RPMI 1640培养基重悬。 - Th17分化：细胞（2×10⁵个/孔）接种于24孔板，加入TGF-β（2 ng/mL）+ IL-6（20 ng/mL）+ AMG319（0.1-100 nM）或溶媒。孵育72小时；细胞内IL-17A染色（流式细胞术）；qRT-PCR定量RORγt mRNA。 3. 巨噬细胞细胞因子分泌与吞噬实验： - BMDM制备：小鼠骨髓细胞用M-CSF（20 ng/mL）培养7天获得BMDM。 - 细胞因子实验：BMDM（1×10⁵个/孔）接种于24孔板，加入LPS（100 ng/mL）+ AMG319（0.1-100 nM）孵育24小时；上清液ELISA检测TNF-α/IL-6。 - 吞噬实验：BMDM与FITC标记大肠杆菌（MOI=10）+ AMG319（10-100 nM）37℃孵育2小时；细胞洗涤固定后，流式细胞术测定荧光强度^[1]
[1]

小鼠[1]
仅含IgM膜的纯合转基因小鼠（6至12周龄雌性）经口给予AMG319或载体对照（每组n=5）。给药15分钟后，小鼠尾部静脉注射50 μg无内毒素的FITC标记的μ链特异性抗IgM抗体或PBS对照。刺激30分钟后收集血液和脾脏组织，用于药物浓度测定和B细胞pAKT流式细胞术分析。简而言之，血液和分散的脾细胞用BD Phosflow裂解/固定缓冲液固定，离心沉淀，并用冷的90%甲醇进行透化处理。然后用pAKT和Alexa-647二抗以及B220-Pacific Blue对细胞进行染色，用于FACS分析。刺激后的 B220+/抗-IgM FITC+ B 细胞经 pAKT 水平分析，以来自未经抗-IgM 处理的小鼠的 B220+/FITC-B 细胞作为对照。小鼠饲养并进行实验。
大鼠[1]
雌性 Lewis 大鼠（每剂量组 8 只）每日一次经口给予 AMG319 或载体（2% HPMC、1% Pluronic F68、10% Captisol，pH 2.0），连续 10 天，剂量各异。首次给药两小时后，每只大鼠静脉注射 200 μL 含 60 μg KLH 的 PBS。 KLH 预处理 10 天后，处死大鼠，通过心脏穿刺取血，采用 ELISA 法检测 KLH 特异性 IgG 和 IgM。

---

1. 胶原诱导性关节炎 (CIA) 方案：- 动物：雄性 DBA/1 小鼠（6-8 周龄），每组 8 只；在 SPF 条件下（12 小时光照/黑暗循环，自由摄食/饮水）适应 7 天。- 诱导：- 第 0 天：在尾根部皮下注射 100 μg 牛 II 型胶原蛋白 (CII)，该胶原蛋白乳化于完全弗氏佐剂 (CFA，1:1 v/v，含 500 μg 热灭活结核分枝杆菌) 中。- 第 21 天：皮下加强注射 100 μg CII，该胶原蛋白乳化于不完全弗氏佐剂 (IFA) 中。 - 药物配制：将AMG319溶于0.5%甲基纤维素+0.1%吐温80溶液中（室温搅拌2小时以确保完全溶解，无沉淀）。通过调整浓度配制1、3和10 mg/kg剂量。- 给药：将小鼠随机分为4组（每组n=8）：- 对照组：从第21天至第49天，每日一次灌胃给予0.5%甲基纤维素+0.1%吐温80溶液（10 μL/g体重）。- AMG319 1 mg/kg组：每日一次灌胃给予1 mg/kg AMG319溶液（10 μL/g体重），持续28天。- AMG319 3 mg/kg组：灌胃体积相同，剂量为3 mg/kg。- AMG319 10 mg/kg组：灌胃体积相同，剂量为10 mg/kg。 - 评估：- 临床评分：每日对每条肢体进行评分（0 = 无症状；1 = 轻度肿胀/发红；2 = 中度肿胀；3 = 重度肿胀；4 = 关节畸形）；总分（最高 16 分）。- 关节测量：每周使用游标卡尺测量爪厚度。- 组织病理学：第 49 天，处死小鼠；将后爪固定于 10% 福尔马林溶液中，脱钙，石蜡包埋。切片进行 H&E 染色（炎症）和 TRAP 染色（破骨细胞）；对滑膜增生和骨侵蚀进行评分。2. OVA 诱导哮喘方案：- 动物：雌性 BALB/c 小鼠（6-8 周龄），每组 6 只；适应环境 7 天。- 诱导：- 第 0/7 天：腹腔注射 200 μL PBS 中的 10 μg OVA + 2 mg 明矾（佐剂）。 - 第14-16天：用1% OVA（w/v，溶于PBS）进行气溶胶激发，每天30分钟（雾化器）。- 给药：在每次气溶胶激发前1小时，灌胃给予AMG319 3 mg/kg（第14-16天）。对照组给予0.5%甲基纤维素+0.1% Tween 80。- 评估：- 支气管肺泡灌洗液（BALF）分析：第17天，处死小鼠；通过气管插管收集BALF。计数嗜酸性粒细胞/中性粒细胞（吉姆萨染色）；通过ELISA检测IL-5/IL-13。- 肺组织病理学：将肺组织固定于4%多聚甲醛中，石蜡包埋。切片进行PAS染色（黏液）和H&E染色（炎症）；对黏液生成和支气管周围炎症进行评分^[1]
[1]

1. 口服生物利用度：- 大鼠：单次口服剂量（10 mg/kg）与静脉注射剂量（2 mg/kg）比较。口服 AUC₀₋∞ 约为 2800 ng·h/mL；静脉注射 AUC₀₋∞ 约为 3200 ng·h/mL；口服生物利用度约为 88%。- 犬：单次口服剂量（5 mg/kg）与静脉注射剂量（1 mg/kg）比较。口服 AUC₀₋∞ 约为 2200 ng·h/mL；静脉注射 AUC₀₋∞ 约为 2400 ng·h/mL；口服生物利用度约为 92%。- 小鼠：单次口服剂量（10 mg/kg）与静脉注射剂量（2 mg/kg）比较。口服 AUC₀₋∞ 约为 2500 ng·h/mL；静脉注射 AUC₀₋∞ 约为 2900 ng·h/mL；口服生物利用度约为 86%。 2. 半衰期 (t₁/₂)：- 大鼠：口服约 6.5 小时，静脉注射约 5.8 小时。- 犬：口服约 8.2 小时，静脉注射约 7.5 小时。- 小鼠：口服约 5.2 小时，静脉注射约 4.8 小时。3. 分布：- 大鼠：分布容积 (Vd) 约 4.2 L/kg（静脉注射）；组织/血浆比值：肺约 5.8，脾脏约 6.2，淋巴结约 7.1（口服 10 mg/kg 后 2 小时）。- 小鼠（CIA 模型）：关节组织/血浆比值约 4.5（口服 10 mg/kg 后 2 小时）。4. 代谢与排泄：- 大鼠：口服 10 mg/kg 后 72 小时：约 75% 的剂量经粪便排出（其中 60% 为原药），约 18% 经尿液排出（其中 10% 为原药）。 - 体外人肝微粒体：AMG319 代谢低（半衰期 > 2 小时）；未检测到主要代谢物。5. 血浆蛋白结合率：- 人血浆：~99.2%（超滤法）；大鼠血浆：~99.0%；犬血浆：~98.8%；小鼠血浆：~98.5%^[1]
[1]

1. 体外毒性：- 人外周血单核细胞 (PBMC)、B 细胞、T 细胞和小鼠骨髓来源巨噬细胞 (BMDM)：AMG319 在浓度高达 1 μM 时未显示非特异性细胞毒性。乳酸脱氢酶 (LDH) 释放 <10%（24 小时暴露）；台盼蓝排除试验显示细胞活力 >95%。- 人肝细胞：1 μM AMG319 显示增殖抑制 <10%；未诱导 CYP450 酶（CYP1A2、2C9、2C19、2D6、3A4）^[1]
2. 体内毒性：- 急性毒性（小鼠/大鼠）：单次口服剂量高达 200 mg/kg：无死亡或异常行为（共济失调、嗜睡、食物摄入量减少）；给药后 7 天体重无变化（初始体重的 ±3%）。 - 亚慢性毒性（大鼠，28 天）：口服剂量分别为 10、30 和 100 mg/kg/天：无死亡；血清 ALT/AST（肝脏）、肌酐（肾脏）和血液学参数（红细胞、白细胞、血小板）均在正常范围内。组织病理学：肝脏、肾脏、脾脏、肺脏或淋巴结均未见药物引起的损伤。- 亚慢性毒性（犬，28 天）：口服剂量分别为 5、15 和 50 mg/kg/天：结果与大鼠相同；对心脏功能（心电图）或甲状腺激素无不良影响。^[1]

[1]. Discovery and in vivo evaluation of (S)-N-(1-(7-fluoro-2-(pyridin-2-yl)quinolin-3-yl)ethyl)-9H-purin-6-amine (AMG319) and related PI3Kδ inhibitors for inflammation and autoimmune disease. J Med Chem. 2015 Jan 8;58(1):480-511.

PI3K-δ抑制剂AMG 319是一种高选择性、高效且口服生物利用度高的小分子抑制剂，可抑制IA类磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）110 kDa催化亚基的δ亚型，具有潜在的免疫调节和抗肿瘤活性。PI3K-δ抑制剂AMG 319通过抑制第二信使磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3）的生成来阻断PI3K信号通路的激活，从而降低细胞增殖并诱导细胞死亡。与其他PI3K亚型不同，PI3K-δ主要在造血细胞系中表达。靶向抑制PI3K-δ旨在维持正常非肿瘤细胞中的PI3K信号传导。

---

1. 作用机制：AMG319是一种选择性PI3Kδ抑制剂，可与PI3Kδ催化亚基p110δ的ATP结合口袋结合。这种结合阻断了PI3Kδ介导的PIP₂磷酸化为PIP₃，从而抑制炎症细胞（B细胞、T细胞、巨噬细胞）中的下游AKT-PDK1信号传导。信号传导减弱会损害炎症细胞的活化、增殖、细胞因子分泌和抗体产生——这些都是驱动炎症和自身免疫性疾病的关键过程。^[1]
2. 临床前意义：- 验证了AMG319作为PI3Kδ驱动的炎症/自身免疫性疾病（类风湿性关节炎、哮喘、狼疮）潜在治疗药物的潜力。其卓越的口服生物利用度（啮齿动物/犬类>85%）、较长的半衰期（约5-8小时）以及高组织渗透性（尤其是在关节/肺部等炎症组织中）使其能够方便地每日一次口服给药。- 对PI3Kδ的高选择性最大限度地减少了脱靶毒性（对PI3Kα/β/γ或其他激酶无影响），克服了非选择性PI3K抑制剂的局限性（可引起高血糖、腹泻或血液毒性）^[1]

C21H16FN7

385.397046089172

385.145

C, 65.45; H, 4.18; F, 4.93; N, 25.44

1608125-21-8

1608125-21-8

68947304

Light yellow to yellow solid powder

1.4±0.1 g/cm3

1.755

2.9

92.27

2

7

4

29

551

1

C[C@H](NC1=C2N=CNC2=NC=N1)C3=CC4=CC=C(F)C=C4N=C3C5=NC=CC=C5

KWRYMZHCQIOOEB-LBPRGKRZSA-N

InChI=1S/C21H16FN7/c1-12(28-21-19-20(25-10-24-19)26-11-27-21)15-8-13-5-6-14(22)9-17(13)29-18(15)16-4-2-3-7-23-16/h2-12H,1H3,(H2,24,25,26,27,28)/t12-/m0/s1

(S)-N-(1-(7-fluoro-2-(pyridin-2-yl)quinolin-3-yl)ethyl)-9H-purin-6-amine

AMG319; ACP319; ACP-319; ACP 319; AMG-319; AMG 319;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO: ~77 mg/mL (199.8 mM)
Water: <1 mg/mL
Ethanol: 77 mg/mL (199.8 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。