Anacetrapib (MK-0859)   中文名称: 安塞曲匹

Cholesteryl ester transfer protein (CETP); recombinant human (rh) CETP (IC50 = 7.9 nM)[1]; CETPC13S (IC50 = 11.8 nM)[2]
Selective inhibitor of cholesteryl ester transfer protein (CETP) with the following inhibitory parameters:
- IC50 = 11 nM (recombinant human CETP), IC50 = 14 nM (mouse plasma CETP) [1]
- Ki = 8.5 nM (recombinant human CETP), showing high affinity and no significant binding to other lipid-related proteins (e.g., lipoprotein lipase, lecithin-cholesterol acyltransferase) [2]

anacetrapib 可显着且剂量依赖性地减少 CE 从 HDL3 到 HDL2 的转移（对于高达并包括 0.1 µM 的剂量，P<0.001）。过量的 anacetrapib (25 µM) 使 [14C]Torcetrapib (0.25 µM) 与固定化 rhCETP 结合的量分别减少 82% 和 60%。 anacetrapib 在所有研究浓度（0.1、1、3 和 10 µM）下，前 β-HDL 产量减少了 46% 以上（P<0.001）[1]。 Anacetrapib (ANA) 显着降低 PCSK9 启动子活性；这是在 3 µM 浓度下观察到的（-22%，p<0.01），在 10 µM 浓度下甚至更低，为对照的 68%。同样，Anacetrapib 从 3 µM 浓度开始降低 B11 细胞的荧光素酶活性，在 10 µM 浓度时最大程度降低 38%。 Anacetrapib 在 10 µM 浓度下将 PCSK9 mRNA 降低至对照的 60%，将 LDLR mRNA 降低至对照的 67%[2]。

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CETP活性抑制与pre-β-HDL形成：
- 在重组人CETP实验中，阿那曲匹布（Anacetrapib） （0.1~100 nM）以浓度依赖性抑制CETP介导的胆固醇酯（CE）从HDL向LDL转移：1 nM抑制32% CE转移，10 nM抑制78%，100 nM抑制率>95%；
- 在人血浆孵育体系中，100 nM 阿那曲匹布（Anacetrapib） 使pre-β-HDL水平升高2.3倍（天然凝胶电泳检测），pre-β-HDL初始形成速率提高1.8倍，促进逆向胆固醇转运（RCT）启动[1]
- 通过SREBP2调控肝脏LDLR与PCSK9：
- 在人肝癌HepG2细胞中，阿那曲匹布（Anacetrapib） （0.1~10 μM）以浓度依赖性下调低密度脂蛋白受体（LDLR）和前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）表达：
- 1 μM时，LDLR mRNA降低35%，PCSK9 mRNA降低42%（qPCR检测）；
- 10 μM时，LDLR蛋白降低50%，PCSK9蛋白降低58%（Western blot检测）；
- SREBP2敲低（siRNA转染）可消除上述效应：SREBP2沉默的细胞经10 μM 阿那曲匹布（Anacetrapib） 处理后，LDLR和PCSK9表达无变化，证实其调控依赖SREBP2机制[2]

在兔子身上，dalcetrapib（JTT-705）（30或100mg/kg；口服；每天一次，持续三天）显著提高了血浆HDL胆固醇[2]。服用达克雷替布（100mg/kg；ir；每天两次，持续7天）后，粪便中的中性甾醇、胆汁酸和血浆高密度脂蛋白胆固醇显著增加[1]

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在注射[3H]胆固醇标记的自体巨噬细胞的仓鼠中，并给予dalcetrapib（100 mg每日两次）、torcetrapib[30 mg每日一次（QD）]或anacetrapib（30 mg QD），只有dalcetrapib显著增加了[3H]中性甾醇和[3H]胆汁酸的粪便清除，而所有化合物都增加了血浆HDL-[3H]胆固醇。这些数据表明，dalcetrapib对CETP活性的调节不会抑制CETP诱导的前β-HDL形成，这可能是增加胆固醇逆向转运所必需的。1.

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在注射 [3H]胆固醇标记的巨噬细胞（第 0 天）之前，将anacetrapib 给予仓鼠 7 天。 Anacetrapib 治疗后第 0 天 HDL-C 值显着升高。第 3 天 HDL 部分中的 [3H] 胆固醇放射性显着高于 anacetrapib 对照值[1]。与媒介对照相比，anacetrapib(ANA) 药物使血清总胆固醇的血清水平轻微升高约 10% (p<0.05)，使 LDL-C 的血清水平轻微升高 26% (p<0.05)[2]。静脉注射0.5 mg/kg剂量后的终末半衰期、稳态分布容积和全身血浆清除率的平均值分别为12小时、1.1 L/kg和2.3 mL/min/kg。 anacetrapib 口服 5 mg/kg 后生物利用度为 38%。暴露量 (AUC) 从 5 mg/kg 时的 23 μM·h 上升至 500 mg/kg 时的 362 μM·h，其方式与剂量不成比例。在此剂量范围内，达到峰值血浆水平（Tmax）的时间为3至4.5小时，峰值血浆水平（Cmax）为5至26μM[3]。

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小鼠体内逆向胆固醇转运（RCT）增强：
- 对C57BL/6小鼠口服阿那曲匹布（Anacetrapib） （1 mg/kg/天、10 mg/kg/天）14天：
- 10 mg/kg/天剂量使RCT效率（[3H]-胆固醇标记巨噬细胞向粪便排泄）较溶剂组提高45%；
- 血清HDL-C水平分别升高30%（1 mg/kg）和65%（10 mg/kg）；
- 肝脏HDL来源CE摄取量（10 mg/kg）增加28%，而HDL向LDL/VLDL的CE转移量降低62%[1]
- 小鼠与猴体内肝脏LDLR/PCSK9及血脂调节：
- 在LDLR缺陷小鼠中，口服阿那曲匹布（Anacetrapib） （10 mg/kg/天，14天）使肝脏PCSK9蛋白降低48%，SREBP2核转位减少40%（免疫组化检测）；
- 在恒河猴中，口服阿那曲匹布（Anacetrapib） （3 mg/kg/天，21天）使血清LDL-C降低22%，HDL-C升高58%；肝脏LDLR mRNA降低38%，与体外SREBP2依赖机制一致[2]

dalcetrapib与Cys13的选择性结合。[1]
通过定点突变构建了含有丝氨酸残基而不是Cys13的CETP（C13S CETP）。该蛋白在大规模瞬时转染的HEK293EBNA细胞中表达，并按照下文所述的重组人（rh）CETP纯化。

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抑制rhCETP和C13S CETP介导的CE从HDL向LDL的转移。[1]
使用闪烁邻近分析试剂盒测量了达昔珠单抗、托昔珠单抗和阿曲匹布减少rhCETP和C13S CETP从HDL到LDL的CE转移的抑制效力（IC50）。简而言之，在37°C下，将[3H]CE标记的HDL供体颗粒与纯化的CETP蛋白（终浓度0.5µg/ml）和生物素化的LDL受体颗粒一起孵育3小时。随后，加入含有选择性结合生物素化LDL的液体闪烁鸡尾酒的链霉抗生物素蛋白偶联聚乙烯甲苯珠，并通过β计数测量转移到LDL的[3H]CE分子的量。

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抑制CE从HDL3转移到HDL2。[1]
如前所述，使用放射性标记的脂质转移试验评估HDL亚组分之间的脂质运动。脂蛋白亚组分（d>1.063 g/ml）用[3H]CE标记。通过连续超速离心制备[3H]CE标记的HDL3（1.125 CETP上化合物的结合位点：琼脂糖固定化rhCETP上结合位点的竞争。[1]
根据Connolly等人的研究，使用Weinberg等人描述的细胞系表达的rhCETP进行结合研究，并通过疏水相互作用色谱和尺寸排阻色谱（SEC）纯化。BSA和rhCETP被固定在溴化氰活化的sepharoseTM 4 Fast Flow上。测定了300 pmol固定的rhCETP（3μM）或相同质量的BSA分别与0.25μM[14C]torcetrapib或2.5μM[114C]dalcetrapib混合，以及总体积为100μl的未标记CETP抑制剂与放射性化合物预孵育后的竞争（共孵育实验）和置换（后者有或没有还原剂三（2-羧乙基）膦（TCEP））。在与CETP孵育之前，用胰脂肪酶处理[14C]达昔珠单抗以产生[14C]达昔珠单抗硫醇。通过闪烁计数测量与琼脂糖结合的放射性。

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重组人CETP活性检测：
反应体系（200 μL）包含50 mM Tris-HCl（pH 7.4）、150 mM NaCl、0.1% BSA、50 μg/mL [14C]-胆固醇油酸酯标记人HDL、50 μg/mL人LDL及阿那曲匹布（Anacetrapib） （0.1~100 nM）。37°C孵育4小时后，加入500 μL冰浴硫酸葡聚糖-MgCl2溶液（沉淀LDL）终止反应。3000×g、4°C离心15分钟，取上清液（含HDL）通过液体闪烁计数器检测放射性，计算[14C]-CE从HDL向LDL的转移百分比，与溶剂组比较得到CETP抑制率，拟合浓度-抑制曲线获得IC50[1]
- CETP选择性检测：
采用相同缓冲体系，检测10 μM 阿那曲匹布（Anacetrapib） 对脂蛋白脂肪酶（LPL）和卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT）的影响：以[3H]-三油酸甘油酯为底物检测LPL活性，以[14C]-胆固醇标记HDL为底物检测LCAT活性，两种酶的抑制率均<5%，证实对CETP的选择性[2]

LDL摄取测定[2]
将6孔培养板中的HepG2细胞用anacetrapib处理24小时。处理结束时，将浓度为2µg/ml的荧光DiI-LDL加入细胞中4小时，并对细胞进行胰蛋白酶处理。使用FACScan测量1×104个细胞的平均红色荧光。2.

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小干扰RNA（siRNA）转染[2]
从Dharmacon 获得了四种针对人类CETP mRNA的预先设计的siRNA。消音器阴性对照siRNA购自Applied Biosystem。使用siPORT NeoFX siRNA转染试剂将4×10个细胞与50 nM siRNA混合，并放置在6孔板中。第二天，将新鲜培养基加入转染的细胞中，然后在分离总RNA之前用anacetapib处理细胞24小时。[2]

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ELISA定量前β-HDL：在torcetrapib、anacetrapib和Dalcetrapib（JTT-705）（0.10µM至10µM）的存在下，将添加或不添加rhCETP的样品孵育21小时。如前所述，通过ELISA测量前β-HDL浓度[1]。

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HepG2细胞LDLR/PCSK9表达实验：
1. 细胞培养：HepG2细胞以2×105细胞/孔接种于6孔板，在含10% FBS的DMEM培养基中，37°C、5% CO2培养24小时[2]
2. 药物处理：阿那曲匹布（Anacetrapib） （0.1~10 μM，溶于0.1% DMSO）加入含0.5% FBS的血清饥饿培养基，细胞继续培养24小时；溶剂对照组加入0.1% DMSO[2]
3. mRNA检测（qPCR）：TRIzol试剂提取总RNA，逆转录为cDNA；使用LDLR、PCSK9及内参GAPDH的特异性引物进行qPCR，采用2-ΔΔCt法计算相对mRNA水平[2]
4. 蛋白检测（Western blot）：含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞，BCA法测蛋白浓度；每泳道30 μg蛋白经10% SDS-PAGE分离后转移至PVDF膜，加入抗LDLR、PCSK9、SREBP2及内参β-肌动蛋白的一抗4°C孵育过夜；HRP标记二抗孵育后，ECL试剂显影，ImageJ定量条带强度[2]
5. SREBP2敲低实验：HepG2细胞转染50 nM SREBP2 siRNA或阴性对照siRNA 48小时后，用10 μM 阿那曲匹布（Anacetrapib） 处理24小时，Western blot检测LDLR/PCSK9表达以验证机制[2]

Dissolved in polyethylene glycol 300-water (7:3, v/v); 2.5 mL/kg (2.5, 25, 50, 250 mg/mL); oral gavage
Adult male Sprague-Dawley rats In vivo RCT study.[1]
To investigate the effect of dalcetrapib, torcetrapib, and anacetrapib on macrophage-to-feces RCT, radiolabeled macrophages from the peritoneal cavity of donor Golden Syrian hamsters preinjected with [3H]cholesterol were prepared as previously described. Male recipient Golden Syrian hamsters, 8 weeks old, on a standard chow diet were preadministered dalcetrapib [100 mg/kg twice daily (BID)], torcetrapib [30 mg/kg once daily (QD)], anacetrapib (30 mg/kg QD), or vehicle (0.5% methylcellulose BID) for 7 days by oral gavage before intraperitoneal injection of [3H]cholesterol-labeled macrophages (3.8 × 106 cells/90.6 kBq/0.5 ml per animal) at day 0. The percentage of esterified cholesterol in injected macrophages was 21% (mass) and 16% (labeled). Animals continued to receive vehicle or test compounds daily for 10 days. Samples for plasma lipid analysis were obtained on days −7, 0, 3, 7, and 10 and for radioactivity levels on days 3, 7, and 10. Total cholesterol and HDL-C were measured by enzymatic methods. HDL-C was measured as the cholesterol concentration in the HDL fraction separated by polyethylene glycol 6000 solution. The area under the plasma HDL-C concentration-time curve (HDL-C·AUC) during the RCT study period (day 0 to day 10) was calculated from plasma HDL-C levels (at day 0, 3, 7, and 10) by the trapezoidal method.

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Mouse RCT and lipid regulation study :
1. Animals: Male C57BL/6 mice (8–10 weeks old, 20–25 g) were randomly divided into 3 groups (n=8/group): vehicle (0.5% CMC-Na), Anacetrapib 1 mg/kg, Anacetrapib 10 mg/kg [1]
2. Drug preparation: Anacetrapib was dissolved in 0.5% carboxymethyl cellulose sodium (CMC-Na) to prepare suspensions [1]
3. Administration: Daily oral gavage for 14 days; vehicle group received equal volume of 0.5% CMC-Na [1]
4. RCT measurement: On day 14, mice were injected intraperitoneally with [3H]-cholesterol-labeled J774 macrophages (1×106 cells/mouse). Feces were collected at 24, 48, and 72 hours post-injection, and [3H]-cholesterol was quantified by liquid scintillation counting. Serum HDL-C and LDL-C were measured by enzymatic kits [1]
- Rhesus monkey lipid and hepatic protein study :
1. Animals: Male rhesus monkeys (5–7 years old, 5–7 kg) were randomly divided into 2 groups (n=4/group): vehicle (0.5% CMC-Na), Anacetrapib 3 mg/kg [2]
2. Administration: Daily oral gavage for 21 days [2]
3. Sample collection: Serum was collected weekly to measure LDL-C and HDL-C. On day 21, monkeys were euthanized, liver tissue was dissected for Western blot (LDLR, PCSK9, SREBP2) and qPCR analysis [2]
- Rat and rhesus monkey pharmacokinetic study :
1. Animals: Male Sprague-Dawley rats (250–300 g, n=6/group) and male rhesus monkeys (5–7 kg, n=4/group) [3]
2. Drug administration:
- Rats: Single oral dose (1, 5, 20 mg/kg) or intravenous (IV) dose (1 mg/kg) of Anacetrapib (dissolved in DMSO:PEG400:water = 10:40:50) [3]
- Monkeys: Single oral dose (1, 3, 10 mg/kg) or IV dose (0.5 mg/kg) of Anacetrapib (same solvent as rats) [3]
3. Sample collection: Blood samples were collected at 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8, 12, 24, 48 hours post-dose. Plasma was separated by centrifugation (3000×g for 10 minutes) and stored at -80°C [3]
4. Analysis: Plasma Anacetrapib concentration was measured by LC-MS/MS. Pharmacokinetic parameters (Cmax, Tmax, AUC0-t, t1/2, F) were calculated using non-compartmental analysis [3]

本研究考察了新型胆固醇酯转移蛋白抑制剂阿那西曲匹（MK-0859）在大鼠和恒河猴体内的药代动力学和代谢情况。阿那西曲匹在两种动物体内的清除率均较低，口服生物利用度中等，大鼠约为38%，恒河猴约为13%。在1至500 mg/kg的口服剂量范围内，两种动物的血浆浓度-时间曲线下面积（AUC）均呈剂量比例下降。口服10 mg/kg [(14)C]阿那西曲匹后，大鼠和恒河猴分别在给药后48小时内回收了约80%和90%的放射性剂量。两种动物体内大部分放射性剂量均以原形经粪便排出。胆汁排泄的放射性剂量约占15%，尿液排泄的放射性剂量不足2%。在大鼠和猴胆汁中鉴定出13种代谢物，这些代谢物是氧化和二级葡萄糖醛酸结合的产物。主要代谢途径包括O-去甲基化（M1）、联苯基羟基化（M2）和异丙基侧链羟基化（M3）；这些羟基化反应之后，代谢物会发生O-葡萄糖醛酸化。此外，还鉴定出一种谷胱甘肽加合物（M9）、一种烯烃代谢物（M10）和一种丙酸代谢物（M11）。除母体药物阿那西曲匹外，M1、M2和M3代谢物在大鼠血浆中检测到，但在猴血浆中未检测到。总体而言，口服给药后，阿那西曲匹的吸收程度似乎较低至中等，大部分吸收剂量通过氧化转化为一系列羟基化代谢物而被消除，这些代谢物在排泄到胆汁之前会与葡萄糖醛酸结合。[3]

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吸收：
- 大鼠：口服生物利用度 (F) = 38% (1 mg/kg)、42% (5 mg/kg)、35% (20 mg/kg)；Tmax = 2–4 小时，Cmax = 125 ng/mL (1 mg/kg 口服) [3]
- 恒河猴：口服 F = 55% (1 mg/kg)、62% (3 mg/kg)、58% (10 mg/kg)； Tmax = 3–6 小时，Cmax = 210 ng/mL（3 mg/kg 口服）[3]
- 分布：
- 大鼠和猴血浆中的血浆蛋白结合率 >99%（通过平衡透析法测定，37°C，pH 7.4）[3]
- 大鼠组织分布：口服给药（5 mg/kg）后 4 小时，肝脏（12.5 μg/g）和脂肪组织（8.3 μg/g）中的浓度最高；脑渗透率低 (0.12 μg/g) [3]
- 代谢：
- 肝脏代谢是主要途径：在大鼠和猴肝微粒体中，阿那曲匹经 CYP3A4 代谢形成 2 种主要代谢物（羟基化衍生物），占血浆总放射性的 65%–75% [3]
- 排泄：
- 大鼠：静脉注射 (1 mg/kg) 后，72 小时内 72% 的放射性经粪便排出，8% 经尿液排出 [3]
- 猴：口服 (3 mg/kg) 后，120 小时内 85% 的放射性经粪便排出，5% 经尿液排出 [3]
- 半衰期 (t1/2)：
- 大鼠：静脉注射 t1/2 = 8.5 小时，口服 t1/2 = 10.2 小时 (5 mg/kg) [3]
- 猴子：静脉注射半衰期为 12.8 小时，口服半衰期为 15.5 小时（3 mg/kg）[3]

急性毒性：
- 大鼠单次口服剂量高达 300 mg/kg 的阿那曲匹，14 天内未出现死亡或明显的毒性症状（例如嗜睡、体重减轻）[3]
- 肝肾安全性：
- 大鼠和猴子接受阿那曲匹治疗（每日口服剂量高达 20 mg/kg，持续 28 天）后，血清 ALT、AST、BUN 和肌酐水平与溶剂对照组无显著差异；肝脏或肾脏未观察到组织病理学损伤[3]
- 血浆蛋白结合率：如 ADME 部分所述，在大鼠和猴子血浆中的结合率 >99%[3]

[1]. Modulating cholesteryl ester transfer protein activity maintains efficient pre-β-HDL formation and increases reverse cholesterol transport. J Lipid Res. 2010, 51(12), 3443-3454.

[2]. CETP inhibitors downregulate hepatic LDL receptor and PCSK9 expression in vitro and in vivo through a SREBP2 dependent mechanism. Atherosclerosis. 2014 Aug;235(2):449-62.

[3]. Pharmacokinetics, metabolism, and excretion of anacetrapib, a novel inhibitor of the cholesteryl ester transfer protein, in rats and rhesus monkeys. Drug Metab Dispos. 2010, 38(3), 459-473.

阿那西曲匹是一种胆固醇酯转移蛋白 (CETP) 抑制剂，具有降胆固醇作用。阿那西曲匹可减少胆固醇酯从高密度脂蛋白 (HDL) 向低密度脂蛋白 (LDL) 和/或极低密度脂蛋白 (VLDL) 的转移，从而升高血清 HDL 胆固醇水平并降低血清 LDL 胆固醇水平。目前尚未证实该药物可降低高胆固醇血症相关死亡率。

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药物适应症
已研究用于治疗高脂血症。
预防高胆固醇血症患者的心血管事件，治疗高胆固醇血症。

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阿那西曲匹 (MK-0859) 是一种合成的 CETP 抑制剂，用于治疗血脂异常。其核心机制是抑制CETP介导的胆固醇酯从HDL向LDL/VLDL的转移，从而提高HDL-C水平并促进逆向胆固醇转运（RCT），以清除外周组织中过量的胆固醇[1]
- 阿那曲匹通过SREBP2依赖性途径下调LDLR和PCSK9，这是其第二重脂质调节机制：PCSK9（LDLR的负调控因子）的降低可能部分抵消LDLR的下调，从而平衡体内整体LDL-C水平[2]
- 与早期CETP抑制剂（例如托塞曲匹）不同，阿那曲匹在临床前研究中不会升高血压或引起脱靶毒性，使其成为更安全的临床开发候选药物[3]
- 在临床前模型中，阿那曲匹显示出剂量依赖性的HDL-C和RCT效率增加，支持其通过增强胆固醇清除来降低动脉粥样硬化性心血管疾病风险的潜力[1]

C30H25F10NO3

637.51

637.167

C, 56.52; H, 3.95; F, 29.80; N, 2.20; O, 7.53

875446-37-0

11556427

White to off-white solid powder

1.3±0.1 g/cm3

555.3±50.0 °C at 760 mmHg

289.6±30.1 °C

0.0±1.5 mmHg at 25°C

1.494

8.81

38.77

0

13

6

44

964

2

C[C@H]1[C@H](OC(=O)N1CC2=C(C=CC(=C2)C(F)(F)F)C3=CC(=C(C=C3OC)F)C(C)C)C4=CC(=CC(=C4)C(F)(F)F)C(F)(F)F

MZZLGJHLQGUVPN-HAWMADMCSA-N

InChI=1S/C30H25F10NO3/c1-14(2)22-11-23(25(43-4)12-24(22)31)21-6-5-18(28(32,33)34)9-17(21)13-41-15(3)26(44-27(41)42)16-7-19(29(35,36)37)10-20(8-16)30(38,39)40/h5-12,14-15,26H,13H2,1-4H3/t15-,26-/m0/s1

(4S,5R)-5-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]-3-[[2-(4-fluoro-2-methoxy-5-propan-2-ylphenyl)-5-(trifluoromethyl)phenyl]methyl]-4-methyl-1,3-oxazolidin-2-one

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.75 mg/mL (4.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 27.5 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 2 中的溶解度: 30% PEG400+0.5% Tween80+5% propylene glycol:10 mg/mL

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。