| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MCT1/2 (monocarboxylate transporter) (Ki = 2.3 nM and 10 nM)
AR-C155858 targets the solute carrier family 16 member 1 (SLC16A1, also known as MCT1) and MCT2. It is a potent inhibitor with Ki values of 2.3 nM for MCT1 and 10 nM for MCT2. By inhibiting these transporters, AR-C155858 blocks the transport of monocarboxylates such as lactate and pyruvate across the plasma membrane. This inhibition disrupts cellular metabolism, particularly in cancer cells that rely on aerobic glycolysis. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
MCT1/MCT2 C端嵌合体可被AR-C155858（10 nM–100 nM）抑制[1]。AR-C155858可抑制MCT2，在10 nM浓度下抑制率达70%，且抑制作用随浓度增加而增强，但这种增强仅与远低于10 nM的Ki值相符。在非洲爪蟾卵母细胞中，AR-C155858以浓度和时间依赖的方式抑制MCT1的表达[2]。在哺乳动物细胞中，MCT（单羧酸转运蛋白）需要与辅助蛋白结合才能在质膜上表达。Basigin是MCT1、MCT3和MCT4的首选结合蛋白，而embigin是MCT2的首选结合蛋白。在大鼠和兔红细胞中，MCT1分别与embigin和basigin结合，但其对AR-C155858抑制的敏感性相同。我们利用RT-PCR（逆转录-PCR）技术发现，非洲爪蟾卵母细胞含有内源性basigin，但不含embigin。外源性embigin的共表达对MCT1的表达及其对AR-C155858的抑制均无影响。相反，外源性embigin的共表达显著增强了卵母细胞质膜上活性MCT2的表达。这种额外的转运活性对AR-C155858的抑制不敏感，而与内源性basigin共表达的MCT2则可被AR-C155858有效抑制。在有或无外源性embigin的情况下，MCT1和MCT2的嵌合体和C端截短体也在卵母细胞中表达。测定了这些构建体的L-乳酸Km值，结果表明MCT的跨膜（TM）结构域（很可能是TM7-TM12）而非C端是L-乳酸亲和力的主要决定因素，而相关的辅助蛋白几乎没有影响。通过这些构建体进行乳酸转运抑制剂滴定实验表明，embigin通过与MCT2的胞内C端以及TM3和TM6相互作用来调节MCT2对AR-C155858的敏感性。研究发现，MCT2的C端对于其与内源性basigin共表达至关重要。 [1]
本研究旨在表征强效MCT1（单羧酸转运蛋白1）抑制剂AR-C155858的特性。通过对大鼠红细胞中MCT1介导的L-乳酸转运进行抑制剂滴定，测定了AR-C155858的Ki值、MCT1上AR-C155858结合位点数（Et）以及转运蛋白的周转数（kcat）。所得结果分别为2.3±1.4 nM、1.29±0.09 nmol/ml压积细胞和12.2±1.1 s⁻¹。在非洲爪蟾卵母细胞中表达时，AR-C155858能有效抑制MCT1和MCT2，而对MCT4无抑制作用。研究表明，MCT1的抑制作用具有时间依赖性，且该化合物在显微注射后也具有活性，提示AR-C155858可能在与MCT1的胞内位点结合之前就已进入细胞。通过测定几种由MCT1和MCT4不同结构域组合而成的嵌合转运蛋白的抑制剂敏感性，发现AR-C155858的结合位点位于MCT1的C端半部分，并涉及跨膜（TM）结构域7-10。这与先前的研究结果一致，即Phe360（位于TM10）以及Asp302和Arg306（位于TM8）是MCT1底物结合和转运的关键残基。对 L-乳酸和丙酮酸嵌合体的 Km 值测定表明，分子的 C 端和 N 端均会影响转运动力学，这与我们提出的 MCT1 分子模型及其转运机制相符，该机制除了需要 TM8 中的 Asp302 和 Arg306 外，还需要 TM1 中的 Lys38 [Wilson, Meredith, Bunnun, Sessions and Halestrap (2009) J. Biol. Chem. 284, 20011-20021] [2]。 体外实验表明，AR-C155858 能高效抑制 MCT1 和 MCT2 的活性（Ki 值分别为 2.3 nM 和 10 nM）。在 10 nM 至 100 nM 的浓度范围内，它能有效抑制 MCT1/MCT2 C 端嵌合体的活性。这些活性成分的活性证实了其作为一种高效且选择性的MCT抑制剂的作用。其对乳酸转运和细胞代谢的影响已在多种细胞系中得到证实。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
目的：单羧酸转运蛋白（MCT）抑制剂可通过阻断肾脏对γ-羟基丁酸（GHB）的重吸收，成为治疗GHB过量的潜在策略。本研究进一步评估了一种新型高效MCT抑制剂AR-C155858对GHB毒代动力学/毒效动力学（TK/TD）的影响。[2]
方法：大鼠分别静脉注射或口服给予GHB（200、600或1500 mg/kg），并同时给予或不给予AR-C155858。采用全身容积描记法持续监测呼吸频率。收集血浆和尿液样本，持续8小时。同时评估AR-C155858对GHB脑/血浆分布的影响。 [2] 结果：AR-C155858治疗显著提高了本研究中使用的所有GHB剂量下静脉注射GHB后的肾脏清除率和总清除率。AR-C155858显著改善了GHB引起的呼吸抑制，表现为呼吸频率的提高。与单独使用GHB（0.25 ± 0.02）相比，AR-C155858治疗还显著降低了GHB的脑/血浆分配比（0.1 ± 0.03）。口服GHB后，AR-C155858治疗也显著提高了GHB的肾清除率（CLR）和口服清除率（CLoral，CL/F）（分别从1.82 ± 0.63 ml/min/kg增至5.74 ± 0.86 ml/min/kg，以及从6.52 ± 0.88 ml/min/kg增至10.2 ± 0.75 ml/min/kg）。 [2] 结论：这种新型高效的MCT抑制剂有望成为GHB过量中毒的潜在治疗选择。[2] 在体内，AR-C155858被用于研究MCT在各种生理和病理过程中的作用，包括癌症代谢。通过抑制MCT1和MCT2，它可以调节乳酸转运，并影响肿瘤的生长和转移。然而，现有文献中并未详细描述其体内疗效研究的具体细节。它是一种研究性化合物，尚未获准用于临床。 |
| 酶活实验 |
大鼠红细胞中MCT1活性的测定[2]
如前所述，使用pH敏感电极监测细胞外pH值的变化来测定L-乳酸向大鼠红细胞的转运。将红细胞置于添加了5 μM DIDS和100 μM乙酰唑胺的轻缓冲盐溶液中，以抑制碳酸氢盐/CO2介导的质子转移，红细胞的血细胞比容为3.5%或7%。在测定乳酸转运之前，将红细胞在室温（22–25 °C）下预孵育1小时，预孵育过程中加入或不加入所需浓度的AR-C155858。该实验在6 °C下进行，通过加入10 mM L-乳酸启动底物摄取。通过对 pH 值变化的时间进程进行一级回归分析，计算初始转运速率，并通过测定少量添加标准 NaOH 引起的 pH 值变化，将其转换为每分钟的 H+ 纳摩尔数 (nmol/min)。 非洲爪蟾卵母细胞中 MCT 转运活性的测定 [2] cRNA 由适当的线性化 pGHJ 质粒进行体外转录制备，并按先前所述方法 [33] 注射到非洲爪蟾卵母细胞中。大多数实验注射 20 ng cRNA，但对于 [14C] 动力学实验，注射量经过调整，以确保摄取量随时间呈线性变化。更多详情请参见补充表 S2（http://www.BiochemJ.org/bj/425/bj4250523add.htm）。对照组注射等体积 (9.2 nl) 的水。然后将卵母细胞在 OR3 培养基中培养 72 小时，每天更换新鲜培养基。如前所述，通过两种方法测定野生型或嵌合型MCT对L-乳酸的转运速率：一是使用比率型pH敏感荧光染料BCECF [2′-7′-双(羧乙基)-5(6)-羧基荧光素]监测细胞内pH的变化；二是测量[14C]底物（L-乳酸或丙酮酸）的摄取量。为了测定AR-C155858的敏感性，将10个卵母细胞置于含有5 ml摄取缓冲液[75 mM NaCl、2 mM KCl、0.82 mM MgCl2、1 mM CaCl2和20 mM MES (pH 6.0)]的六孔板中，并根据需要，在有或无AR-C155858的情况下预孵育所需时间（通常为45分钟）。取出5个卵母细胞，置于50 μl含有L-[14C]乳酸（0.5 mM，7.4 MBq/ml）的摄取缓冲液中，其中添加或不添加所需浓度的AR-C155858。在室温下继续孵育，直至摄取量随时间呈线性变化；该时间因所用构建体而异，详见补充表S2。随后，用冰冷的摄取缓冲液快速洗涤卵母细胞5次，最后一次洗涤后，将每个卵子转移至闪烁瓶中，并在100 μl 2% (w/v) SDS溶液中剧烈涡旋混合匀浆。然后加入闪烁液（10 ml Emulsifier-Safe），并通过闪烁计数测定[14C]。[2] 为了测定丙酮酸和L-乳酸的Km值，将卵母细胞在孵育缓冲液[75 mM NaCl、2 mM KCl、0.82 mM MgCl2、1 mM CaCl2和20 mM Tris/Hepes (pH 7.4)]中平衡5分钟，然后将四个卵母细胞与40 μl含有[14C]标记的L-乳酸或丙酮酸（7.4 MBq/ml）的摄取缓冲液一起孵育，最终浓度分别为0.2、0.5、1、2、5、20、50和75 mM。孵育持续至摄取量随时间呈线性变化（详见补充表S2），之后洗涤卵母细胞并按上述方法制备闪烁计数样品。通过减去同时测定的水注射卵母细胞的摄取量，确定MCT1介导的L-乳酸净摄取量。[2] 如前所述，将卵母细胞包埋于鸡肝中切片，并通过免疫荧光显微镜观察，证实了质膜上MCT的表达。 AR-C155858的体外酶活性测定用于评估其抑制MCT1和MCT2转运活性的能力。这些测定通常使用表达转运蛋白的细胞或含有重组MCT的蛋白脂质体。在化合物存在的情况下，测定放射性标记底物（例如[14C]-乳酸）的转运。抑制效力（Ki）由这些测定确定。 |
| 细胞实验 |
红细胞中 MCT1 活性的测定 [1]
如前所述，使用 pH 敏感电极监测细胞外 pH 值的变化，测定 L-乳酸向大鼠和兔红细胞的转运。将红细胞（5% 血细胞比容）在室温 (22 °C) 下与所需浓度的 AR-C155858 或不进行预孵育 1 小时，然后在 6 °C 下测定 L-乳酸 (10 mM) 的转运。通过对 pH 值变化的时间进程进行一级回归分析计算初始转运速率，并通过测定少量添加标准 NaOH 引起的 pH 值变化，将其转换为 nmol H+/min。 非洲爪蟾卵母细胞中 MCT 转运活性的测定 [1] 如前所述，制备 cRNA 并将其注射到非洲爪蟾卵母细胞中。所有实验中，均注射 10 ng MCT cRNA 或 ±10 ng 大鼠 embigin cRNA（溶于 9.2 nl 水中），对照组仅注射水。卵母细胞质膜上 MCT 和 embigin 的表达已通过免疫荧光显微镜证实，方法如前所述。MCT 动力学实验通过使用 H+ 敏感染料 BCECF [2′,7′-双-(2-羧乙基)-5(6)-羧基荧光素] 监测细胞内 pH 值或测定 L-[14C]乳酸 (7.4 MBq/ml) 的摄取量来进行。摄取缓冲液包含 75 mM NaCl、2 mM KCl、0.82 mM MgCl2、1 mM CaCl2 和 20 mM Tris/Hepes (pH 7.4)。在 pH 6 的条件下进行 AR-C155858 抑制剂滴定实验，卵母细胞预先在含有所需浓度 AR-C155858 的另一种摄取缓冲液（75 mM NaCl、2 mM KCl、0.82 mM MgCl2、1 mM CaCl2 和 20 mM MES，pH 6）中孵育 45 分钟，然后按照先前描述的方法 [38] 测定 L-[14C]乳酸 (0.5 mM) 的摄取量。除非另有说明，所有 MCT 构建体的摄取量均在 2.5 分钟内测定，但 MCT2trn（含或不含 embigin）和 MCT2/1（含或不含 embigin）的摄取时间分别为 5 分钟和 10 分钟。我们确定这些条件代表了吸收量随时间呈线性变化的最长时期（结果未显示）。 体外细胞实验评估了AR-C155858对乳酸转运和细胞代谢的影响。用AR-C155858处理细胞，并测量乳酸或其他单羧酸的吸收。还可以评估其对细胞增殖、糖酵解通量和线粒体呼吸的影响。这些实验证明了该化合物在相关的细胞环境中具有功能活性。 |
| 动物实验 |
毒代动力学/毒效学研究[3]
AR-C155858对静脉注射γ-羟基丁酸（GHB）毒代动力学和呼吸抑制的影响[3] 本研究采用与我们之前发表的研究类似的全身容积描记法，研究了AR-C155858对GHB诱导的呼吸抑制的影响。动物在容积描记室中适应45分钟后，采集15分钟内5次呼吸参数的基线测量值。GHB以200、600或1500 mg/kg的剂量静脉推注，同时或不同时给予AR-C155858（1或5 mg/kg静脉推注）。在GHB 600 mg/kg组中，同时给予较低剂量的AR-C155858（0.1 mg/kg静脉推注）。在所有治疗组中，AR-C155858均在GHB给药后5分钟给予。本实验与我们之前评估GHB单独作用于呼吸系统影响的研究在相似的时间和方法下进行；因此，为了进行比较，我们使用了之前发表的单独给予200、600和1500 mg/kg GHB的大鼠的数据。GHB给药时间被定义为0分钟。在GHB给药后8小时内，每隔一段时间采集血液和尿液样本。呼吸参数，包括呼吸频率、潮气量和分钟通气量（呼吸频率×潮气量），分别在2.5、5、7.5、10、15、20、25和30分钟以及之后每隔15分钟记录一次，直至8小时。所有动物组均通过颈静脉插管给予浓度为300 mg/ml的GHB无菌水溶液。 AR-C155858 以 0.1、1 或 2.5 mg/ml 的浓度溶于 10% 环糊精生理盐水中，经颈静脉插管给药。所有治疗组均包含 3-6 只动物，并与各自的 GHB 单药组进行比较，以确定 AR-C155858 对 GHB 诱导的呼吸抑制的影响。另设一组动物单独接受 AR-C155858（1 mg/kg 静脉推注），以研究该抑制剂本身对呼吸的影响。 AR-C155858 对稳态下 GHB 血脑分配的影响 [3] 为了评估 AR-C155858 对 GHB 进入大脑转运的影响，我们单独或联合使用 AR-C155858（5 mg/kg 静脉推注）给予 GHB（400 mg/kg 静脉推注，随后以 208 mg/kg/hr 的速度静脉输注）（n=4）。选择该 GHB 剂量是为了使稳态血浆 GHB 浓度达到 800 µg/ml，与上述毒代动力学研究中使用的 600 mg/kg GHB 静脉注射后大鼠体内观察到的高 GHB 浓度相似。此外，该 GHB 浓度也与临床 GHB 过量病例中观察到的浓度相似 (5)。动物在异氟烷麻醉下于GHB给药后4小时处死，随后在稳态下采集血液和脑组织样本。脑组织样本立即置于液氮中冷冻，并储存于−80°C直至分析。 AR-C155858对口服GHB毒代动力学的影响 由于GHB常被滥用于口服，因此本研究评估了AR-C155858对大鼠口服GHB毒代动力学的影响。动物通过灌胃给予GHB，同时或不给予AR-C155858（5 mg/kg，静脉推注）。AR-C155858分别在GHB给药后5分钟或1小时给予（n = 4–6）。在另一组动物中，同时通过灌胃给予AR-C155858（10 mg/kg）和GHB（1500 mg/kg）。给药前，大鼠禁食过夜。GHB给药后，每隔一段时间采集一次血液和尿液样本，持续至15小时。GHB以300 mg/ml的水溶液形式给药，AR-C155858以2.5 mg/ml的10%环糊精生理盐水溶液形式给药。 AR-C155858的体内动物研究是在癌症模型中进行的，以评估其抗肿瘤疗效。它通过抑制MCT1和MCT2，可以干扰肿瘤代谢并抑制肿瘤生长。然而，现有文献中并未详细描述这些研究的具体细节。AR-C155858是一种研究性化合物，尚未获准用于临床。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
现有文献中并未详尽描述AR-C155858的具体药代动力学数据。作为一种小分子化合物，其药代动力学特性对其体内疗效至关重要。然而，目前尚无半衰期和生物利用度等具体参数。该化合物仅供研究使用，不得用于人体。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
现有文献中关于AR-C155858的具体毒性数据并不详尽。作为一种MCT抑制剂，其毒性特征可能与其作用机制相关。然而，其对MCT1和MCT2的高选择性可能有助于其获得良好的安全性。该药物仅供研究用途，不得用于人体。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
为了协调本研究的所有结果，我们提出了如图 7 所示的方案。该方案的关键特征如下：
(i) MCT2 优先结合 embigin 而非内源性 basigin。MCT2 与 basigin 的结合需要两种蛋白 C 端之间的相互作用，而 MCT1 则不需要。因此，在没有 embigin 共表达的情况下，MCT1trn 表达良好，而 MCT2trn 则表达不佳。 (ii) 在没有 basigin 的情况下，MCT1 可以结合 embigin；然而，当两者同时存在时，除非 MCT2 的 C 端尾部取代 MCT1 的 C 端（MCT1/2c），从而促进 MCT1 与 embigin 的结合，否则 MCT1 倾向于结合 basigin。 (iii) 当与embigin结合时，AR-C155858与MCT2（而非MCT1）的结合亲和力显著降低，且该效应与MCT2的C端尾部是否存在无关。我们的数据表明，AR-C155858抑制MCT2的效力取决于其结合的辅助蛋白。在哺乳动物细胞中，embigin是MCT2的首选内源性结合伴侣[22]，因此，MCT2介导的乳酸转运对AR-C155858抑制的敏感性可能远低于MCT1介导的乳酸转运。这或许可以解释为何AR-C155858的使用需谨慎，以阐明MCT1（对AR-C155858高度敏感）、MCT2（对AR-C155858敏感性较低）和MCT4（对AR-C155858不敏感）在脑等组织代谢中的不同作用，正如Bröer等人[41]报道的那样。然而，显然有必要开发完全亚型特异性且不受相关辅助蛋白影响的MCT抑制剂。[1] 此前，阿斯利康发现了一类新型高特异性MCT1抑制剂，据报道，该类抑制剂不与MCT4结合，且对MCT2的亲和力较低。这些抑制剂与大鼠和人细胞中内源性MCT1结合的Kd值在低纳摩尔范围或更低，这与在几乎不含或完全不含内源性MCT1的Ins-1细胞中表达的MCT1的Kd值一致。在酵母中表达的MCT1也测得了类似的Kd值。我们测得AR-C155858与大鼠红细胞中MCT1结合的Ki值为2.3 ± 1.4 nM，这与放射性配体结合实验中AR-C155858与人红细胞中MCT1结合的Ki值1.2 nM完全一致。[2] 总之，这种新型高效抑制剂AR-C155858在静脉注射和口服给药后均能提高大鼠体内GHB的肾清除率和总清除率。AR-C155858还显著改善了GHB引起的呼吸抑制，这可能是通过抑制GHB的肾脏重吸收和脑摄取实现的，而这两种过程均由单链甘油三酯（MCT）介导。我们的研究证实了使用MCT抑制剂作为潜在治疗策略来改善GHB引起的呼吸抑制的概念，呼吸抑制是GHB过量致死的主要原因之一。[3] AR-C155858是一种强效且选择性的单羧酸转运蛋白MCT1和MCT2抑制剂，其Ki值分别为2.3 nM和10 nM。它与转运蛋白的细胞内位点结合。AR-C155858是研究细胞代谢（尤其是癌细胞代谢）的重要研究工具。它尚未获准用于临床，仅供研究用途。 |
| 分子式 |
C21H27N5O5S
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|---|---|
| 分子量 |
461.5346
|
| 精确质量 |
461.173
|
| 元素分析 |
C, 54.65; H, 5.90; N, 15.17; O, 17.33; S, 6.95
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| CAS号 |
496791-37-8
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| PubChem CID |
10226546
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
763.1±70.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
415.3±35.7 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±2.7 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.634
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| LogP |
0.93
|
| tPSA |
150.69
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
32
|
| 分子复杂度/Complexity |
769
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
CC1=C(C(=NN1)C)CC2=C(C3=C(S2)N(C(=O)N(C3=O)C)CC(C)C)C(=O)N4C[C@@H](CO4)O
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| InChi Key |
ISIVOJWVBJIOFM-ZDUSSCGKSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H27N5O5S/c1-10(2)7-25-20-17(18(28)24(5)21(25)30)16(19(29)26-8-13(27)9-31-26)15(32-20)6-14-11(3)22-23-12(14)4/h10,13,27H,6-9H2,1-5H3,(H,22,23)/t13-/m0/s1
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| 化学名 |
(S)-6-((3,5-dimethyl-1H-pyrazol-4-yl)methyl)-5-(4-hydroxyisoxazolidine-2-carbonyl)-1-isobutyl-3-methylthieno[2,3-d]pyrimidine-2,4(1H,3H)-dione
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| 别名 |
ARC155858; AR-C155858; 496791-37-8; (S)-6-((3,5-dimethyl-1H-pyrazol-4-yl)methyl)-5-(4-hydroxyisoxazolidine-2-carbonyl)-1-isobutyl-3-methylthieno[2,3-d]pyrimidine-2,4(1H,3H)-dione; (S)-6-[(3,5-Dimethyl-1H-pyrazol-4-yl)methyl]-5-[(4-hydroxyisoxazolidin-2-yl)carbonyl]-1-isobutyl-3-methylthieno[2,3-d]pyrimidine-2,4(1H,3H)-dione; 6-[(3,5-dimethyl-1H-pyrazol-4-yl)methyl]-5-[(4S)-4-hydroxy-1,2-oxazolidine-2-carbonyl]-3-methyl-1-(2-methylpropyl)thieno[2,3-d]pyrimidine-2,4-dione; AR-C 155858; 6-[(3,5-dimethyl-1H-pyrazol-4-yl)methyl]-5-[(4S)-4-hydroxy-1,2-oxazolidine-2-carbonyl]-3-methyl-1-(2-methylpropyl)-1H,2H,3H,4H-thieno[2,3-d]pyrimidine-2,4-dione; ARC 155858.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~70 mg/mL (~151.67 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.75 mg/mL (5.96 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 27.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.75 mg/mL (5.96 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 27.5mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1667 mL | 10.8335 mL | 21.6671 mL | |
| 5 mM | 0.4333 mL | 2.1667 mL | 4.3334 mL | |
| 10 mM | 0.2167 mL | 1.0834 mL | 2.1667 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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