| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
KRAS(G12C) (IC50 = 2.5 μM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：ARS-853 是一种新型、有效、选择性、KRAS(G12C) 共价抑制剂。它通过与 GDP 结合的癌蛋白结合并防止激活来抑制突变 KRAS 驱动的信号传导。 KRAS 功能获得性突变发生在大约 30% 的人类癌症中。迄今为止，尚未发现针对 KRAS 突变癌症的靶向治疗方法。根据观察到的 ARS-853 的接合率和抑制率，以及用于评估 KRAS 激活状态的突变体特异性质谱分析，KRAS(G12C) 的核苷酸状态处于可调节的动态通量状态通过上游信号因素。这些研究提供了令人信服的证据，证明 KRAS(G12C) 突变会产生过度兴奋状态，而不是静态活跃状态，并且靶向不活跃的 GDP 结合形式是产生新型抗 RAS 疗法的有前途的方法。激酶测定：将最终浓度为 2 μmol/L 的 GDP 负载、六组氨酸标记、截短的 (1-169) KRAS 蛋白（G12C、WT、G13D，如所示）与测试化合物按照表中所示的剂量和时间点一起孵育。含有 20 mmol/L HEPES pH 7.5、150 mmol/L NaCl、1 mmol/L MgCl2 和 1 mmol/L DTT 的缓冲液。通过添加甲酸至0.2%来猝灭反应。通过液相色谱、在飞行时间（TOF；Agilent 6530）或 Q-Exactive（Thermo）质谱仪上对完整蛋白质进行电喷雾质谱分析来确定共价修饰的程度。细胞测定：用指定浓度和孵育时间的化合物处理粘附过夜的细胞（35 × 103）。处理后，用 PBS 缓冲液洗涤细胞两次，并使用含有 9 mol/L 尿素、10 mmol/L DTT 和 50 mmol/L 碳酸氢铵（pH 8）的缓冲液提取蛋白质。碘乙酰胺烷基化和胰蛋白酶消化后，在配备 Q-Exactive 四极杆轨道阱质谱仪 (Thermo Scientific) 的 Dionex RSLCnano LC (Thermo Scientific) 上通过靶向 LC/MS-MS 分析对样品进行分析。样品处理和 LC/MS-MS 方法的详细说明可在补充方法和补充表 S6 中找到。 KRASG12C突变细胞(H358)用ARS853处理5小时。通过 RAS 结合域下拉 (RBD:PD) 测定和使用 KRAS 特异性抗体进行免疫印迹来确定对活性或 GTP 结合 KRAS 水平的影响。
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| 酶活实验 |
将纯化的 KRAS (1 μM) 与 EDTA (10 mM)、GDP (1 mM) 或 GTPηS (1 mM) 一起在室温下孵育 1 小时。然后添加 MgCl2 (1 mM)。添加 ARS853 (1 μM) 后，将混合物在室温下再静置一小时。 ARS853适用于表达不同KRAS突变体的HEK293细胞。使用含有 9 M 尿素、10 mM DTT 和 50 mM 碳酸氢铵（pH 8）的缓冲液来提取蛋白质。将其加热至 65°C 15 分钟，并使用 50 mM 碘乙酰胺在 37°C 下烷基化 30 分钟。样品在 Zeba 旋转脱盐板中进行凝胶过滤以去除盐分，然后添加 10 μg/ml 的测序级胰蛋白酶，并将混合物在 37°C 下孵育 1 小时。将 KRASG12C 目标肽和 KRAS 标准化肽重同位素标准品 (25 fmol) 添加到样品中，然后在 Strata-X 聚合物反相板中对样品进行脱盐。在标准条件下，LC-MS/MS 分析在 Q Exactive 四极轨道阱质谱仪中进行。修饰后的 G12C 肽与重同位素标准品 [1] 的比率表明药物结合了多少 KRASG12C。
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| 细胞实验 |
ARS853 应用于 KRASG12C 突变细胞 (H358)，持续时间为 5 小时。使用 KRAS 特异性抗体和 RAS 结合域下拉 (RBD:PD) 测定，评估了对活性或 GTP 结合 KRAS 量的影响。
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| 动物实验 |
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| 参考文献 |
| 分子式 |
C22H29CLN4O3
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| 分子量 |
432.94
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| 精确质量 |
432.949
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| 元素分析 |
C, 61.03; H, 6.75; Cl, 8.19; N, 12.94; O, 11.09
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| CAS号 |
1629268-00-3
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| 相关CAS号 |
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| SMILES |
CC1(CC1)C2=CC(=C(C=C2Cl)O)NCC(=O)N3CCN(CC3)C4CN(C4)C(=O)C=C
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| InChi Key |
IPFOCHMOYUMURK-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H29ClN4O3/c1-3-20(29)27-13-15(14-27)25-6-8-26(9-7-25)21(30)12-24-18-10-16(22(2)4-5-22)17(23)11-19(18)28/h3,10-11,15,24,28H,1,4-9,12-14H2,2H3
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| 化学名 |
1-[3-[4-[2-[4-chloro-2-hydroxy-5-(1-methylcyclopropyl)anilino]acetyl]piperazin-1-yl]azetidin-1-yl]prop-2-en-1-one
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外) |
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| 溶解度 (体内) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.77 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.77 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.77 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (4.62 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 95% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3098 mL | 11.5489 mL | 23.0979 mL | |
| 5 mM | 0.4620 mL | 2.3098 mL | 4.6196 mL | |
| 10 mM | 0.2310 mL | 1.1549 mL | 2.3098 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 Identification of a covalent KRASG12Cinhibitor active in cells.Cancer Discov.2016 Mar;6(3):316-29 |
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 Proteomic cysteine profiling of ARS-853 selectivity.Cancer Discov.2016 Mar;6(3):316-29 |
 Cellular activity and selectivity of ARS-853.Cancer Discov.2016 Mar;6(3):316-29
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 Cellular activity and selectivity of ARS-853.Cancer Discov.2016 Mar;6(3):316-29 |
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 The kinetics of cellular G12C engagement and signaling inhibition with a GDP-state selective inhibitor demonstrates rapid nucleotide cycling of KRASG12Cbetween GTP- and GDP-bound states.Cancer Discov.2016 Mar;6(3):316-29 |
 Modulation of KRASG12Cactivity alters ARS-853 target engagement and supports novel therapeutic strategies for targeting KRAS.Cancer Discov.2016 Mar;6(3):316-29 |
TP-353
Palbociclib-d4 hydrochloride (PD 0332991-d4 (hydrochloride))
CLK1-IN-2
Abemaciclib metabolite M2-d6 (LSN2839567-d6)
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