| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
BRD2 (Kd = 4.7~34 nM); BRD3 (Kd = 8.3 nM); BRD4 (Kd = 9.6 nM)
ARV-771 targets bromodomain and extra-terminal (BET) family proteins (BRD2, BRD3, BRD4) and von Hippel-Lindau (VHL) E3 ubiquitin ligase. It also modulates androgen receptor (AR) signaling and AR levels [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
与 BET 抑制相比，ARV-771（一种基于蛋白水解靶向嵌合体 (PROTAC) 技术的小分子泛 BET 降解剂）在 CRPC 细胞模型中显示出显着增强的功效。 ARV-771 的 DC50 小于 5 nM，可有效破坏 22Rv1 细胞中的 BRD2/3/4。 BET 蛋白的下游效应器之一是 c-MYC 蛋白。当 c-MYC 用 ARV-771 治疗时，其水平降低，IC50 小于 1 nM。 ARV-771 对 22Rv1、VCaP 和 LnCaP95 细胞系具有有效的抗增殖作用。 ARV-771 治疗以与细胞凋亡一致的方式显着改变细胞形状。用 10 nM ARV-771 处理会导致 VCaP 细胞中 FL-AR 和 AR-V7 mRNA 下调。在 VCaP 细胞中，ARV-771 对多个 AR 调节基因表现出抗雄活性[1]。
1. ARV-771是强效泛BET降解剂：去势抵抗性前列腺癌（CRPC）细胞系（22Rv1、VCaP、LnCaP95）与ARV-771孵育16小时后，Western blot检测显示BRD2、BRD3、BRD4蛋白水平显著降低（n=3次独立实验）。[1] 2. ARV-771抑制c-MYC表达：处理16小时后，ELISA检测（n=3次三重重复）显示细胞内c-MYC蛋白水平降低；qPCR检测（2次生物学重复，每次三重重复，n=3）证实c-MYC mRNA水平下调。1μM ARV-771对c-MYC的抑制效果优于无活性非对映异构体ARV-766（1μM）及BET抑制剂OTX015（1μM）。[1] 3. ARV-771减弱AR信号并降低AR水平：处理16小时后，ELISA（n=3次三重重复）和Western blot（n=2次独立实验）显示全长AR（FL-AR）蛋白水平降低；在VCaP细胞中，qPCR检测（2次生物学重复，每次三重重复，n=3）显示FL-AR和AR-V7的mRNA水平下降，雄激素应答基因表达受抑；提前1小时用ARV-771预处理，可阻断R1881诱导的VCaP细胞ERG表达。[1] 4. ARV-771诱导CRPC细胞死亡：处理72小时后具有抗增殖活性（n=3次三重重复）；处理24小时后激活半胱天冬酶（caspase）（n=3次三重重复），并在22Rv1细胞中诱导PARP切割（Western blot检测）。[1] 5. ARV-771介导的BRD4降解依赖VHL和蛋白酶体：细胞提前30分钟用VHL配体ARV-056（10μM）或蛋白酶体抑制剂卡非佐米（1μM）预处理，可阻断ARV-771处理8小时诱导的BRD4降解（Western blot，n=2次独立实验）。[1] 6. ARV-771可导致22Rv1细胞出现凋亡相关形态学改变（20倍显微镜观察）。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
当带有 AR-V7+ 22Rv1 肿瘤异种移植物的未去势雄性 Nu/Nu 小鼠每天以 10 mg/kg 的剂量皮下注射 ARV-771，连续三天，肿瘤组织中 BRD4 和 c-MYC 的水平分别下调 37% 和 76%。 ARV-771 治疗后，22Rv1 肿瘤中 AR-V7 水平显着下调[1]。
1. ARV-771在体内下调BRD4并抑制c-MYC：Nu/Nu小鼠接种22Rv1肿瘤异种移植模型后，每日皮下注射ARV-771（10mg/kg），连续3天，可降低肿瘤组织中BRD4水平及c-MYC表达（每组9只小鼠）。[1] 2. ARV-771具有剂量依赖性肿瘤生长抑制（TGI）和退缩效应：在14天22Rv1异种移植研究中（每组9只小鼠），皮下注射ARV-771（3mg/kg、10mg/kg）可下调BRD4和c-MYC（Western blot）；每日皮下注射30mg/kg可诱导肿瘤退缩（每组10只小鼠）。[1] 3. ARV-771降低肿瘤中AR-V7水平：22Rv1异种移植小鼠每日皮下注射ARV-771（10mg/kg），连续14天，肿瘤组织中AR-V7水平降低（每组9只小鼠）。[1] 4. ARV-771在VCaP异种移植模型中有效：CB17 SCID小鼠接种VCaP肿瘤后，采用间歇性给药方案的ARV-771可诱导TGI（每组10只小鼠）；该药物可降低VCaP肿瘤中BRD4和c-MYC水平（Western blot），并抑制血清前列腺特异性抗原（PSA）水平（ELISA，各处理组重复数分别为8、5、8、8）。[1] 5. ARV-771疗效优于BET抑制剂OTX015：在22Rv1异种移植模型中，ARV-771对BRD4的下调作用和c-MYC的抑制效果显著优于OTX015（Western blot，每组9只小鼠）。[1] |
| 酶活实验 |
c-MYC ELISA。[1]
22Rv1细胞（每孔30000个细胞）被给予以1:3比例连续稀释的化合物，形成八点剂量曲线。吸取培养基，用PBS洗涤细胞一次。使用补充了蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液（50μL）裂解细胞。将裂解物离心并转移到96孔c-MYC ELISA板上。 AR-ELISA。[1] VCaP细胞（每孔40000个细胞）被给予以1:3比例连续稀释的化合物，形成八点剂量曲线。吸出培养基，在补充有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的细胞裂解缓冲液中裂解细胞。将裂解物离心并转移到96孔雄激素受体ELISA板上。 1. BET蛋白结合实验：采用结合实验测定ARV-771对BRD1和BRD2的Kd值（具体方法未详述），以无法结合VHL的ARV-766作为无活性对照。[1] 2. 蛋白水平ELISA检测：CRPC细胞经ARV-771处理16小时后，通过ELISA定量细胞内c-MYC或FL-AR蛋白水平，实验设三重重复以保证可重复性。[1] 3. mRNA水平qPCR检测：CRPC细胞经ARV-771（或对照ARV-766、OTX015）在指定浓度下处理16小时后，提取总RNA并逆转录为cDNA，采用特异性引物对c-MYC、FL-AR、AR-V7及雄激素应答基因进行qPCR定量，以GAPDH为内参；实验包含2次生物学重复，每次设三重重复。[1] |
| 细胞实验 |
ARV-771 溶解在 DMSO 中。 22Rv1 细胞（每孔 5,000 个细胞）使用按 1:3 连续稀释的 ARV-771 给药，以获得 72 小时的 10 点剂量曲线。添加 CellTiter-Glo 发光细胞活力测定，并在光度计上读取板的读数。使用 GraphPad Prism 软件[1] 分析并绘制数据。
1. 蛋白降解/切割Western blot检测：CRPC细胞（22Rv1、VCaP、LnCaP95）经ARV-771处理16小时（检测BET/AR）、8小时（检测BRD4降解机制）或24小时（检测PARP切割）后，制备细胞裂解液，通过Western blot检测BRD2/3/4、FL-AR、PARP及内参蛋白；机制验证实验中，细胞在ARV-771处理前30分钟用ARV-056（10μM）或卡非佐米（1μM）预处理。[1] 2. 细胞增殖实验：CRPC细胞接种于96孔板，经ARV-771处理72小时后，采用标准方法定量增殖能力，实验设三重重复。[1] 3. 半胱天冬酶（caspase）激活实验：CRPC细胞经ARV-771处理24小时后，检测caspase活性以评估凋亡诱导效果（n=3次三重重复）。[1] 4. 细胞形态学观察：22Rv1细胞经ARV-771处理后，在20倍显微镜下观察凋亡相关形态学变化。[1] 5. ERG诱导抑制实验：VCaP细胞经ARV-771预处理1小时后，加入R1881处理，检测ERG表达以评估AR信号抑制效果。[1] |
| 动物实验 |
将 5 × 10⁶ 个 22Rv1 或 VCaP 细胞悬浮于 Matrigel 中，皮下植入小鼠体内。根据实验需要，给药时间最长可达 3 周。末次给药后 8 小时处死小鼠。收集血浆和组织，并速冻以备后续分析。所有药代动力学分析均在 Drumetix Laboratories 进行。血浆 PSA 的分析采用 PathScan Total PSA/KLK3 Sandwich ELISA Kit，并按照制造商的说明书进行操作。[1] 1. 22Rv1 异种移植模型（Nu/Nu 小鼠）：将 22Rv1 细胞植入 Nu/Nu 小鼠体内，建立肿瘤异种移植模型。小鼠被分为若干治疗组（每组 n=9–10），并分别以 3 mg/kg、10 mg/kg 或 30 mg/kg 的剂量皮下注射 ARV-771。每日给药一次，持续 14 天（短期研究为 3 天）。末次给药后 8 小时采集肿瘤组织和血浆，用于 Western blot、ELISA 和 qPCR 分析。[1]
2. VCaP 异种移植模型（CB17 SCID 小鼠）：在 CB17 SCID 小鼠中建立 VCaP 肿瘤异种移植模型。小鼠采用间歇给药方案，通过皮下注射 ARV-771 进行治疗（每组 n=10）。该研究持续14天，在末次给药后8小时采集肿瘤组织、血浆和血清，用于BRD4/c-MYC检测（Western blot）和PSA定量（ELISA）。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. ARV-771 具有明确的药代动力学 (PK) 特征：通过不同途径和浓度向小鼠单次给药 ARV-771，并监测其血浆浓度随时间的变化（图 S4A）。未提供具体的 PK 参数（例如，半衰期、口服生物利用度）。[1]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. ARV-771 在小鼠中未显示出明显的毒性：在 22Rv1 和 VCaP 异种移植研究中，小鼠的体重未显示明显异常（图 S5A、B），表明其具有良好的耐受性。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
本研究表明，基于von Hippel-Landau (VHL) E3连接酶的BET PROTAC抑制剂ARV-771对去势抵抗性前列腺癌(CRPC)细胞模型具有高度活性。ARV-771可导致这些细胞中BET蛋白的快速降解，其DC50值（导致50%蛋白降解的药物浓度）<1 nM。值得注意的是，ARV-771介导的BET降解可导致FL-AR和AR-V7转录水平的降低。相比之下，使用BET抑制剂治疗CRPC细胞可抑制AR-V7的表达，但不会影响FL-AR的表达。此外，ARV-771诱导的细胞凋亡显著高于BET抑制剂。最后，皮下注射ARV-771在两种不同的CRPC小鼠模型中均有效，并可使恩扎卢胺耐药的22Rv1异种移植瘤消退。因此，本研究证实了BET蛋白降解是一种有前景的治疗转移性去势抵抗性前列腺癌（CRPC）的临床策略，并证明了利用PROTACs介导的小分子蛋白降解治疗实体瘤的可行性。[1] 1. ARV-771是一种基于泛BET降解技术的蛋白水解靶向嵌合体（PROTAC）。[1] 2. 其非活性非对映异构体是ARV-766，它不能与VHL结合，也无法诱导BET降解。[1] 3. ARV-771被开发用于治疗去势抵抗性前列腺癌（CRPC），这是一种依赖于雄激素受体（AR）信号通路且抗雄激素耐药后预后不良的疾病。 [1]
4. 与 BET 抑制剂不同，ARV-771 可同时抑制 AR 信号传导和 AR 水平，在 CRPC 模型中显示出显著提高的疗效。[1] 5. 本研究首次证实了小分子 BET 降解剂在实体瘤中的疗效。[1] |
| 分子式 |
C49H60CLN9O7S2
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|---|---|
| 分子量 |
986.6398
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| 精确质量 |
985.374
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| 元素分析 |
C, 59.65; H, 6.13; Cl, 3.59; N, 12.78; O, 11.35; S, 6.50
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| CAS号 |
1949837-12-0
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| PubChem CID |
126619980
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| 外观&性状 |
Typically exists as White to light yellow solids at room temperature
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.674
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| LogP |
3.84
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| tPSA |
259Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
13
|
| 可旋转键数目(RBC) |
19
|
| 重原子数目 |
68
|
| 分子复杂度/Complexity |
1750
|
| 定义原子立体中心数目 |
5
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| SMILES |
ClC1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])C1C2C(C([H])([H])[H])=C(C([H])([H])[H])SC=2N2C(C([H])([H])[H])=NN=C2[C@]([H])(C([H])([H])C(N([H])C([H])([H])C([H])([H])OC([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])OC([H])([H])C(N([H])[C@]([H])(C(N2C([H])([H])[C@@]([H])(C([H])([H])[C@@]2([H])C(N([H])[C@@]([H])(C([H])([H])[H])C2C([H])=C([H])C(C3=C(C([H])([H])[H])N=C([H])S3)=C([H])C=2[H])=O)O[H])=O)C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])=O)=O)N=1
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| InChi Key |
HJGNHEQIOZDQRW-VZRXUJQISA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C50H63N9O7S2/c1-28-11-13-35(14-12-28)43-42-29(2)32(5)68-49(42)59-33(6)56-57-46(59)38(54-43)24-40(61)51-19-22-65-20-10-21-66-26-41(62)55-45(50(7,8)9)48(64)58-25-37(60)23-39(58)47(63)53-30(3)34-15-17-36(18-16-34)44-31(4)52-27-67-44/h11-18,27,30,37-39,45,60H,10,19-26H2,1-9H3,(H,51,61)(H,53,63)(H,55,62)/t30-,37+,38-,39-,45+/m0/s1
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| 化学名 |
(2S,4R)-1-((S)-2-(tert-butyl)-4,14-dioxo-15-((S)-2,3,9-trimethyl-4-(p-tolyl)-6H-thieno[3,2-f][1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]diazepin-6-yl)-6,10-dioxa-3,13-diazapentadecanoyl)-4-hydroxy-N-((S)-1-(4-(4-methylthiazol-5-yl)phenyl)ethyl)pyrrolidine-2-carboxamide
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| 别名 |
ARV771; ARV 771; CHEMBL4215078; (2S,4R)-1-[(2S)-2-[[2-[3-[2-[[2-[(9S)-7-(4-chlorophenyl)-4,5,13-trimethyl-3-thia-1,8,11,12-tetrazatricyclo[8.3.0.02,6]trideca-2(6),4,7,10,12-pentaen-9-yl]acetyl]amino]ethoxy]propoxy]acetyl]amino]-3,3-dimethylbutanoyl]-4-hydroxy-N-[(1S)-1-[4-(4-methyl-1,3-thiazol-5-yl)phenyl]ethyl]pyrrolidine-2-carboxamide; (2S,4R)-1-((2S)-2-(tert-butyl)-15-((6S)-4-(4-Chlorophenyl)-2,3,9-trimethyl-6H-thieno[3,2-f][1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]diazepin-6-yl)-4,14-dioxo-6,10-dioxa-3,13-diazapentadecan-1-oyl)-4-hydroxy-N-((S)-1-(4-(4-methylthiazol-5-yl)phenyl)ethyl)pyrrolidine-2-carboxamide; (2S,4R)-1-((S)-2-(tert-butyl)-15-((S)-4-(4-chlorophenyl)-2,3,9-trimethyl-6H-thieno[3,2-f][1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]diazepin-6-yl)-4,14-dioxo-6,10-dioxa-3,13-diazapentadecanoyl)-4-hydroxy-N-((S)-1-(4-(4-methylthiazol-5-yl)phenyl)ethyl)pyrrolidine-2-carboxamide; ARV771; SCHEMBL18551355; ARV-771.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 50 mg/mL (~50.68 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.53 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.53 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.53 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.0135 mL | 5.0677 mL | 10.1354 mL | |
| 5 mM | 0.2027 mL | 1.0135 mL | 2.0271 mL | |
| 10 mM | 0.1014 mL | 0.5068 mL | 1.0135 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 BRD4 PROTAC schematic.
ARV-771 treatment attenuates AR signaling.Proc Natl Acad Sci U S A.2016 Jun 28;113(26):7124-9. |
|---|
 ARV-771 is a potent pan-BET degrader.Proc Natl Acad Sci U S A.2016 Jun 28;113(26):7124-9. |
 ARV-771 treatment results in cell death in CRPC cell lines.
|
YN14 (mixture of diastereomers)
VHL-SNAP2-5C
PROTAC SMARCA2/4 degrader-40
MS99-β-Gal
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